МОК находится в контакте с польским НОК по делу Тимановской
https://rsport.ria.ru/20210806/timanovskaya-1744620947.html
МОК находится в контакте с польским НОК по делу Тимановской
МОК находится в контакте с польским НОК по делу Тимановской — РИА Новости Спорт, 06.08.2021
МОК находится в контакте с польским НОК по делу Тимановской
Белорусская легкоатлетка Кристина Тимановская находится в Польше, Международный олимпийский комитет (МОК) находится в контакте с польским Национальным… РИА Новости Спорт, 06.08.2021
2021-08-06T09:34
2021-08-06T09:34
2021-08-06T09:35
олимпиада 2020
олимпийские игры
легкая атлетика
томас бах
международный олимпийский комитет (мок)
/html/head/meta[@name=’og:title’]/@content
/html/head/meta[@name=’og:description’]/@content
https://cdnn21.img.ria.ru/images/07e5/08/05/1744516356_0:50:3051:1766_1920x0_80_0_0_6179cd0230fadbfd730644d88860e997.jpg
ТОКИО, 6 авг – РИА Новости, Семен Галькевич. Белорусская легкоатлетка Кристина Тимановская находится в Польше, Международный олимпийский комитет (МОК) находится в контакте с польским Национальным олимпийским комитетом (НОК), сообщил президент МОК Томас Бах.Тимановская должна была выступить на Олимпиаде в Токио в беге на дистанциях 100 и 200 метров. Но из-за отсутствия необходимого количества допинг-проб от участия в эстафете 4х400 метров были отстранены две белорусские бегуньи. Тогда тренерский штаб решил задействовать в эстафете Тимановскую, а спортсменка в соцсетях подвергла критике такое решение. По ее словам, руководство просто пытается за счет спортсменов исправить свою некачественную работу. НОК Белоруссии в воскресенье сообщил, что Тимановская прекращает участие в Олимпийских играх в Токио в связи с эмоционально-психологическим состоянием.Тимановская заявила СМИ, что намерена просить убежища в Европе, обратилась к МОК с просьбой вмешаться в ситуацию и помочь ей. По словам Тимановской, на нее было оказано давление и ее пытаются вывезти из Японии без ее согласия. Посольство Польши в Японии выдало ей визу по гуманитарным причинам.
https://rsport.ria.ru/20210806/timanovskaya-1744618599.html
РИА Новости Спорт
7 495 645-6601
ФГУП МИА «Россия сегодня»
https://xn--c1acbl2abdlkab1og.xn--p1ai/awards/
2021
РИА Новости Спорт
7 495 645-6601
ФГУП МИА «Россия сегодня»
https://xn--c1acbl2abdlkab1og.xn--p1ai/awards/
Новости
ru-RU
https://rsport.ria.ru/docs/about/copyright.html
https://xn--c1acbl2abdlkab1og.xn--p1ai/
РИА Новости Спорт
7 495 645-6601
ФГУП МИА «Россия сегодня»
https://xn--c1acbl2abdlkab1og.xn--p1ai/awards/
https://cdnn21.img.ria.ru/images/07e5/08/05/1744516356_206:0:2937:2048_1920x0_80_0_0_70ead65ef0ae7f923030e21cfb5615b8.jpgРИА Новости Спорт
7 495 645-6601
ФГУП МИА «Россия сегодня»
https://xn--c1acbl2abdlkab1og.xn--p1ai/awards/
РИА Новости Спорт
7 495 645-6601
ФГУП МИА «Россия сегодня»
https://xn--c1acbl2abdlkab1og.xn--p1ai/awards/
олимпийские игры, легкая атлетика, томас бах, международный олимпийский комитет (мок)
09:34 06.08.2021 (обновлено: 09:35 06.08.2021)МОК находится в контакте с польским НОК по делу Тимановской
ТОКИО, 6 авг – РИА Новости, Семен Галькевич. Белорусская легкоатлетка Кристина Тимановская находится в Польше, Международный олимпийский комитет (МОК) находится в контакте с польским Национальным олимпийским комитетом (НОК), сообщил президент МОК Томас Бах.
Тимановская должна была выступить на Олимпиаде в Токио в беге на дистанциях 100 и 200 метров. Но из-за отсутствия необходимого количества допинг-проб от участия в эстафете 4х400 метров были отстранены две белорусские бегуньи. Тогда тренерский штаб решил задействовать в эстафете Тимановскую, а спортсменка в соцсетях подвергла критике такое решение. По ее словам, руководство просто пытается за счет спортсменов исправить свою некачественную работу. НОК Белоруссии в воскресенье сообщил, что Тимановская прекращает участие в Олимпийских играх в Токио в связи с эмоционально-психологическим состоянием.
«МОК не в позиции поменять политическую позицию в стране. Это надо понимать. Наша ответственность – защищать спортсменов так сильно, как мы можем. И наказывать за нарушения, удалять тех, кто не следует нашим ценностям. Пару месяцев назад мы уже приняли решения. Лукашенко и его сын никакие аккредитации не могли получить здесь, под санкциями другие члены НОКа. мы выступаем против политических репрессий. Тимановская в Польше, мы в контакте с польским НОКом, они помогают нам поддерживать ее», — сказал Бах журналистам.
Тимановская заявила СМИ, что намерена просить убежища в Европе, обратилась к МОК с просьбой вмешаться в ситуацию и помочь ей. По словам Тимановской, на нее было оказано давление и ее пытаются вывезти из Японии без ее согласия. Посольство Польши в Японии выдало ей визу по гуманитарным причинам.
6 августа, 09:18Олимпиада 2020МОК продолжает расследование по делу ТимановскойГОСТ Р 50186-92 Посуда керамическая в контакте с пищей. Выделение свинца и кадмия. Допустимые пределы
Текст ГОСТ Р 50186-92 Посуда керамическая в контакте с пищей. Выделение свинца и кадмия. Допустимые пределы
>ГОСТ Р 50186—92 (ИСО 6486/2-81)
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
ПОСУДА КЕРАМИЧЕСКАЯ В КОНТАКТЕ С ПИЩЕЙ. ВЫДЕЛЕНИЕ СВИНЦА И КАДМИЯ.
ДОПУСТИМЫЕ ПРЕДЕЛЫ
Издание официальное
ГОССТАНДАРТ РОССИИ Москва
УДК «42.72-033.6:006.354
Группа У И ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
ПОСУДА КЕРАМИЧЕСКАЯ В КОНТАКТЕ С ПИЩЕИ. ВЫДЕЛЕНИЕ СВИНЦА И КАДМИЯ. ДОПУСТИМЫЕ ПРЕДЕЛЫ
ГОСТ P
50186—92 .
(ИСО 6486/2-81)
Ceramic ware in contact with food. Release of lead and cadmium. Permissible limits
ОКП 59 9100. 59 9200
Дата введения 01.07.93
Настоящий стандарт определяет допустимые пределы выделения свинца н кадмия из керамической посуды (посуды из фарфора, мягкого фарфора, полуфарфора и фаянса как глазурованная, так н пеглазурованная), имеющей контакт с пищей, за исключением посуды из стекла, стеклокерамики и эмалированной посуды.
ГОСТ Р 50185 определяет метод испытания на выделение свинца и кадмия из керамических изделий, имеющих контакт с пищей.
Настоящий стандарт применяется для керамических изделий, предназначенных для приготовления, подачи к столу, сервирования и хранения продуктов литания, исключая изделия, используемые в пищевой промышленности и применяемые в качестве тары, кроме тех случаев, когда изделия в качестве тары долго употребляются покупателем как керамическая посуда.
Керамические изделия, указанные в этом стандарте и исключенные из области применения должны подчиняться допускам, не ’ менее строгим чем те. которые применяют для изделий домашнего обиход;з и общественного питания, даже наоборот, может возникнуть необходимость более жестких стандартов, нормирующих допустимые пределы загрязнения пищевых продуктов. Следует отметить, что согласие с данными пределами выделения вредных
Издание официальное
Издательство стандартов, 1992
Настоящий стандарт не может быть полностью или частично иоенроилведен, тиражирован и распространен бет ралрешення Госстандарта России
веществ, не является альтернативой соответствующим узаконенным допустимым пределам для пищевых продуктов.
В настоящем стандарте применяют следующие определения.
3.1. Керамическая посуда — керамические изделия, предназначенные для контакта с пищевыми продуктами, например, посу-
‘ да из фарфора, мягкого фарфора, полуфарфора и фаянса как глазурованная, так и неглазурованная.
3.2. Плоские изделия — керамическая посуда глубиной не более 25 мм, измеренной от самой нйжней точки до горизонтальной плоскости, проходящей через точку перелива.
3.3. Полые изделия — керамическая посуда глубиной более 25 мм, измеренной от самой нижней точки до горизонтальной плоскости; проходящей через точку перелива.
Полые изделия в зависимости от вместимости разделяют на большие и малые:
а) большие полые изделия — полая посуда вместимостью 1.1л и более;
б) малые полые изделия — полая посуда вместимостью менее 1.1 л.
Допустимые пределы выделения свинца и кадмия с любого отдельного изделия, определенные в соответствии с методом, изложенным в ГОСТ Р 50185 не должны превышать величины, указанной в таблице.
Тип керамической посуды | Единица измерения . | Свинец | КадчиД |
Плоское изделие | мг/дм’ | 1.7 | 0.17 |
Малое полое изделие | мг дмл | 5.0 | 0.50 |
Большое полое изделие | мг/дм* < | 2.5 | 0.25 |
С. 3 ГОСТ P50I86-92
ИНФОРМАЦИОННЫЕ ДАННЫЕ
1. ПОДГОТОВЛЕН И ВНЕСЕН Комитетом легкой промышленности СССР
2. УТВЕРЖДЕН И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Постановлением Госстандарта России от 21.08.92 № 1007
Настоящий стандарт подготовлен методом прямого применения международного стандарта ИСО 6486/2—81 «Керамическая посуда в контакте с пищей. Выделение свинца и кадмия. Допустимые пределы» и полностью ему соответствует
3. Срок первой проверки — 1998 г.- —
4. Введен впервые
5. Ссылочные нормативно-технические документы
Обозначение 11ТД. не который дана ссылка
Номер пункта
1 (ICI Р 50185-92
1. 4
Редактор Т П. Шишина Технический редактор В. Н. Прусакова Корректор Р. И. Корчагина ‘
Сдано в наб 29 09.92 Поди. * печ. ll.il.92 Усл. печ. л. 0.25. Уел. кр.-огт. 0.25. Уч.-кэд. л. 0.20. Ji’P *50 экэ.__________________________________________________________.
Орден л «Зинк Почета» Издательство стандэртов. 123357. Москва. ГСП. Нововреснеиский иср.. 3
Тнн. «.Московский печатник». .Москва, Лялин пер., б. Зак. 1356
«Скала-р» и Huawei подписали соглашение о стратегическом сотрудничестве
| ПоделитьсяСостоялось подписание соглашения о сотрудничестве между производителем модульной платформы для высоконагруженных корпоративных и государственных информационных систем «Скала-р» и поставщиком инфокоммуникационных решений Huawei.
Партнерство «Скала-р» и Huawei даст возможность крупнейшим российским заказчикам использовать экосистему передовых российских разработок в области платформенного программного обеспечения и вычислительной техники для решения задач цифровой трансформации и импортозамещения. Программные компоненты модульной платформы «Скала-р» включены в Единый реестр российских программ для электронных вычислительных машин и баз данных, а вычислительные узлы — в Единый реестр российской радиоэлектронной продукции.
«Благодаря сотрудничеству с Huawei в области производства сетевого оборудования «Скала-р» получит доступ к передовым разработкам высокоскоростной и низколатентной коммутации. Глубокая интеграция и встречная оптимизация компонентов в тесном технологическом сотрудничестве с их производителями обеспечивает машинам «Скала-р» экстремальную устойчивость, позволяет достигать максимально высокой производительности и стабильных показателей на предельных нагрузках. Для нас это лишь первый шаг в рамках технологического сотрудничества: уже сейчас мы ведём переговоры с коллегами из Huawei о возможности локализации платформ и интеграции в них наших наработок», — сказал подписание соглашения генеральный директор «Скала-р»
Подписание соглашения позволит компании «Скала-р» расширить спектр оборудования, используемого в составе модульной платформы.
«Возможность работать с лидерами рынка, делиться знаниями и опытом, создавать эффективные технологические решения, которые наиболее полно отвечают потребностям наших заказчиков – это один из ключевых стимулов работы Huawei, — отметил Сяо Хайцзюнь, генеральный директор Huawei Enterprise в регионе Евразия. — Уверен, что сотрудничество и разработка совместных с Скала-р решений позволит максимально полно реализовать научный и инженерный потенциал наших компаний и способствовать дальнейшей цифровизации российской экономики».
риски системы распознавания лиц и перспективы технологии
История разработки
Разработки в сфере искусственного интеллекта, распознающего лица, ведутся с 1960-х годов, первые эксперименты представил профессор Техасского университета в Остине Вуди Бледсо. В конце 1990-х годов Управление перспективных исследовательских проектов при Минобороне США и Национальный институт стандартов и технологий выпустили программу FERET с самой обширной базой лиц — более 14 тыс. изображений. Изначально ее использовали, чтобы находить и распознавать преступников по всему миру, но затем представили для открытого доступа.
С 2010 года Facebook начал использовать функцию распознавания лиц, чтобы находить пользователей на публикуемых фото и предлагать их отметить, а с 2014 года распознавание лиц используют в камерах смартфонов.
Самые масштабные разработки в области распознавания лиц — у Google, Apple, Facebook, Amazon и Microsoft (GAFAM).
Масштабы внедрения в России: школы, вузы, поликлиники
В России самыми крупными корпорациями на рынке распознавания лиц являются NTechLab, VisionLabs, Sensemaking Lab, Группа ЦРТ. Первая компания — разработчик приложения FindFace, которое использовали для поиска людей во «ВКонтакте» по фото. Сервис неоднократно оказывался в центре скандалов из-за нарушения приватности. Максимальная точность их алгоритмов для распознавания лиц — 99%. Компания также выступила подрядчиком для внедрения камер с распознаванием лиц в Москве, где в настоящий момент действует одна из крупнейших в мире сетей с распознаванием лиц.
Московскую систему видеонаблюдения использовали во время пандемии в 2020 году. С ее помощью выявили более 200 нарушителей карантина и самоизоляции, которым пришлось выплатить штрафы.
По словам гендиректора NtechLab Андрея Теленкова, система распознавания лиц уже внедрена или внедряется в настоящий момент в 20 регионах России, включая пилотные проекты. В частности, компания NtechLab тестирует в Самаре проект по распознаванию людей с оружием на подходах к школам.
«Что касается школ, то у нас появился проект в Кот-д’Ивуаре, где остро стоит проблема с похищением детей, и при этом дети могут добираться до школы достаточно долго. Наше решение будет автоматически присылать на мобильный телефон родителей уведомление, когда ребенок добрался до школы. Надо понимать, что видеоаналитика неизбежно будет становиться более массовой. Она уже сейчас гораздо точнее, чем человек, она допускает на порядок меньше ошибок», — сообщил гендиректор NtechLab.
Кроме этого, технологией заинтересовались в российских вузах: сервисы на базе распознавания лиц помогают во время онлайн-обучения: следят, чтобы ученик не отвлекался во время экзамена, не списывал и не пользовался устными подсказками. Также руководители учреждений планируют использовать ее для распознавания лиц и верификации личности студента на онлайн-экзаменах, а ряд регионов планирует ее использовать в поликлиниках для подсчета посетителей и детекции очередей.
«Проблемы очередей стоят остро, но объективной статистики нет. Сейчас мы с несколькими регионами говорим об этом. Я надеюсь, что в следующем году можно будет говорить о конкретных проектах. Интерес к видеоаналитике применительно к очередям огромный в розничной торговле», — отметил Теленков.
По данным инвестиционной компании J’son & Partners Consulting, к концу 2018 года доля технологий распознавания лиц в общем объеме российского биометрического рынка составила почти 50%.
Московский институт психоанализа внедрил решение по распознаванию лиц в систему обучения и тестирования студентов для удаленной идентификации. При использовании учебного портала студенты института получают доступ к материалам курса и к сдаче тестов и экзаменов, ранее это было невозможно из-за использования системой стандартного механизма доступа по паролю. По данным разработчика, около 5% студентов пытались использовать третьи лица для сдачи экзаменов, но система предотвратила все случаи мошенничества.
Законодательное регулирование
30 июня 2018 года в РФ вступили в силу изменения, внесенные в отдельные законодательные акты, позволяющие госорганам, банкам и иным организациям в предусмотренных законом случаях проводить удаленную идентификацию физлиц, основанную на использовании их биометрических персональных данных (Федеральный закон от 31 декабря 2017 г. № 482-ФЗ «О внесении изменений в отдельные законодательные акты Российской Федерации»). Форма согласия на обработку персональных данных и биометрических персональных данных утверждена Правительством РФ ( распоряжение Правительства РФ от 30 июня 2018 г. № 1322-р).
Кроме этого, России есть закон о защите персональных данных, он направлен, в первую очередь, на сохранность самих данных: их необходимо защищать, чтобы предотвратить утечки. Безопасность биометрических данных в частной сфере пока не регулируется, но у властей с 2019 года есть право использовать распознавание лиц без согласия граждан.
Мировой опыт
Европейская комиссия в начале 2020 года сообщала, что рассматривает запрет на использование распознавания лиц в общественных местах на срок до пяти лет, так как регулирующим органам необходимо время, чтобы решить, как предотвратить злоупотребление технологией. За этот период «может быть определена и разработана надежная методология оценки воздействия этой технологии и возможных мер по управлению рисками».
Комиссия изложила свои планы в документе, предполагающем, что будут введены новые правила, направленные на защиту конфиденциальности.
Противники распознавания лиц в Европе заявляют, что текущая технология часто совершает ошибки и нарушает право человека на неприкосновенность частной жизни. 5 октября 2021 года стало известно, что Европейский парламент поддержал мораторий на использование распознавания лиц в правоохранительных целях. Текст, одобренный депутатами Европарламента, призывает Европейскую комиссию ввести «запрет на любую обработку биометрических данных, включая изображения лиц, в правоохранительных целях, которая ведет к массовому слежению в общедоступных местах». Депутат Европарламента от Пиратской партии Германии Патрик Брейер приветствовал голосование как «исторический прорыв в предотвращении антиутопического будущего биометрического массового наблюдения в Европе в китайском стиле».
В Китае распознавание лиц используют повсеместно. Например, оно внедрено в аптеках Шанхая для людей, покупающих определенные лекарства, в частности, содержащие психотропные вещества. Таких покупателей просят подтвердить свою личность, отсканировав лицо. Кроме этого, биометрия является обязательной даже при регистрации телефонного номера.
В США нет федерального закона, который бы регулировал использование технологии. В некоторых штатах для полиции и других органов действуют ограничения на использование распознавания лиц — например, в Орегоне, Вашингтоне, Техасе, Иллинойсе, Массачусетсе, Вермонте.
В то же время в ряде штатов, включая Техас, Флориду и Иллинойс, ФБР разрешено использовать технологию распознавания лиц для сканирования фотографий водительских прав. Во многих аэропортах США Служба таможенного и пограничного контроля использует распознавание лиц для проверки пассажиров на международных рейсах. А в таких городах, как Балтимор, полиция использовала программное обеспечение для распознавания лиц, чтобы идентифицировать и арестовывать людей во время протестных акций.
Многие полицейские управления США стремятся использовать инструменты распознавания лиц, заявляя, что они могут помочь им более эффективно выявлять и арестовывать преступников. Например, в прошлом году полиция Мэриленда идентифицировать подозреваемого в нападении на редакцию газеты Capital Gazette, которое привело к жертвам. Министерство внутренней безопасности также утверждает, что эта технология может помочь правительству быстрее проверять путешественников и распознавать иммигрантов.
Более того, американское правительство намерено активизировать использование технологии распознавания лиц, несмотря на недовольство общественности. Так, Счетная палата США опубликовала отчет 24 августа 2021 года, в котором подробно описывается текущее и планируемое использование технологии распознавания лиц федеральными агентствами. Отчет был опубликован более чем через год после того, как Комитет по технологической политике США Ассоциации вычислительной техники призвал к немедленному прекращению практически любого государственного использования технологий распознавания лиц.
Экспертные оценки. Риски
Основным препятствием, тормозящим развитие технологии в России, являются проблемы безопасности и риски взлома системы: недостаточная точность, относительно высокая цена внедрения систем распознавания лиц, а также ощущение постоянной слежки у пользователей, отмечает проектный менеджер Кластера информационных технологий Фонда «Сколково» Дмитрий Стариков.
IT-эксперты обращают внимание на то, что система распознавания лиц часто ошибается. Так, 19 октября стало известно об инциденте с жестким задержанием режиссера и преподавателя русского языка Федора Ермошина в Москве по ошибке. Полицейские, опираясь на данные системы, перепутали его с вором, похитившим игровые приставки, и только доставив режиссера в отделение, выяснили, что алгоритмы системы обознались. Согласно их данным, Ермошин оказался на 70% похож на настоящего преступника.
«Мы же с вами не знаем, какой порог совпадений прописан в данной программе, какая там шкала. Например, система видеонаблюдения метро, я знаю, устанавливалась несколькими вендорами. Кроме того, есть много других факторов. Разное освещение, разное оборудование или качество „картинки“. Например, может быть и так, что степень похожести моего лица на свежем снимке и полгода назад будет оценена как раз на 70%», — рассказал гендиректор IT-компании «Наносемантика» Станислав Ашманов.
Более того, особое значение даже при цифровой идентификации, по мнению IT-специалистов, имеет человеческий фактор.
«Система проводит сверку, но при этом никогда не выносит конкретного решения. Она лишь выдает отчет, рекомендацию, сообщает, есть ли совпадение человека с входящего снимка с кем-то из базы. А вот что с этой информацией делать дальше, решает человек», — комментирует эксперт.
Руководитель компании VisionLabs Дмитрий Марков напомнил, что в системе можно настроить порог, после которого она будет идентифицировать человека на изображении с камеры и фотографию в базе данных. При этом всегда остается возможность «перекрутить» или «недокрутить» эту настройку.
«Настраиваемый порог схожести зависит от множества факторов. В нормальных, точнее идеальных, условиях рекомендуется ставить порог схожести не менее 95%. Однако нужно понимать, что в промышленной эксплуатации может быть множество нюансов, и тогда пороги необходимо настраивать индивидуально», — отметил Марков.
Что касается проекта по выявлению людей с оружием, то у его реализации могут возникнуть организационные сложности по части интеграции решения коммерческой компании в информационный контур МВД, считают эксперты.
«Технически же реализовать проект реально, хотя сложно. Необходимы камеры с высоким разрешением. К тому же нейросеть должна распознавать людей с оружием в плотном потоке горожан, а для этого она должна быть обучена на дата-сетах», — отмечает директор по продуктовой стратегии «Группы Т1» Сергей Иванов.
По мнению технического директора компании «Системы компьютерного зрения» Михаила Смирнова, процент срабатывания системы будет не очень высоким.
«Было бы правильнее выявлять людей, которые ведут себя нехарактерно: оборачиваются, нервничают, несут тяжелые сумки», — уверен эксперт.
Основная же сложность в том, что нужно распознавать не лицо человека, а оружие, которое, как правило, открыто не носят, говорит исполнительный директор Artezio Павел Адылин.
По словам эксперта Академии управления финансами и инвестициями Алексея Кричевского, несмотря на то что система распознавания лиц эффективно выявляет преступников и нарушителей карантина, она может быть использована и с целью мошенничества: накладные усы и борода, надвинутая на глаза шапка и большие очки, а также другие современные решения могут противодействовать системе распознавания лиц. Кроме того, ее часто ругают за вторжение в частную жизнь и получаемый доступ к приватной информации о человеке.
Между тем, по словам Кричевского, технологии постоянно совершенствуются, и уже в ближайшем будущем, возможно, помехи для распознавания лица будут устранены. Эксперт добавил, что прогресс всё равно возьмет верх, как бы инженеры ни пытались обойти современные высокотехнологичные разработки, а алгоритмы научатся обходить препятствия.
Безопасность и здоровье | 202-693-1999 |
Безопасность и здоровье — сельское хозяйство | 202-693-2100 |
Безопасность и здоровье — Строительство | 202-693-1707 |
Безопасность и здоровье — морское судоходство | 202-693-2100 |
Безопасность и здоровье — горнодобывающая промышленность | 202-693-2100 |
Правила техники безопасности и здоровья — проверки / цитаты / штрафы | 202-693-2100 |
Правила техники безопасности и гигиены труда — Ведение документации | 202-693-1702 |
Обучение технике безопасности и охране здоровья — обязательно | 202-693-2200 |
Обучение технике безопасности и гигиене труда — добровольное | 202-693-2200 |
Проблемы безопасности | 202-693-1999 |
Закон о возможностях от школы к работе | 202-401-6222 |
Мировые судьи | 202-693-7300 |
Кремнезем / силикоз | 202-693-2300 |
Малый бизнес | 202-693-7299 |
Статистика — Отсутствие на работе | 202-691-6378 |
| Статистика — Средний почасовой заработок | 202-691-6555 |
Статистика — преимущества | 202-691-6199 |
Статистика — Коллективные договоры | 202-691-6281 |
Статистика — компенсация | 202-691-6199 |
Статистика — условные работники | 202-691-6378 |
Статистика — разочарованные рабочие | 202-691-6378 |
Статистика — перемещенные рабочие | 202-691-6378 |
Статистика — уровень образования | 202-691-6378 |
| Статистика — Срок службы сотрудников | 202-691-6378 |
Статистика — текучесть кадров | 202-691-5870 |
Статистика — занятость и заработки | 202-691-6555 |
Статистика — Занятость и безработица | 202-691-6378 |
| Статистика — Число погибших | 202-691-6170 |
Статистика — гибкий график и посменная работа | 202-691-6378 |
| Статистика — Работа на дому | 202-691-6378 |
Статистика — Иммигрант | 202-691-6378 |
Статистика — Отрасли | 202-691-6555 |
Статистика — травмы и болезни | 202-691-6170 |
Статистика — Международная рабочая сила | 202-691-5654 |
Статистика — рабочая сила | 202-691-6378 |
| Статистика — Увольнения | 202-691-6392 |
Статистика — Минимальная заработная плата | 202-691-6378 |
Статистика — рабочие из меньшинств | 202-691-6378 |
Статистика — несколько владельцев вакансий | 202-691-6378 |
Статистика — Национальная занятость | 202-691-6555 |
Статистика — Профессии | 202-691-6569 |
| Статистика — Старшие работники | 202-691-6378 |
| Статистика — Работники, занятые неполный рабочий день | 202-691-6378 |
Статистика — личные потребительские расходы | 202-691-6900 |
Статистика — Производительность | 202-691-5606 |
Статистика — региональная занятость | 202-691-6559 |
Статистика — заработная плата | 202-691-6569 |
Статистика — Государственный | 202-691-6559 |
Статистика — субгосударство | 202-691-6392 |
| Статистика — Оборот | 202-691-5870 |
Статистика — Безработица | 202-691-6392 |
| Статистика — Ветераны | 202-691-6378 |
Статистика — заработная плата и пособия | 202-691-6199 |
Статистика — Работающие женщины | 202-691-6378 |
Статистика — Прекращение работы / забастовка | 202-691-6275 |
Статистика — Работающие бедные | 202-691-6378 |
Летняя работа | 202-693-3030 |
Есть вопрос? Как связаться с Uber
Служба поддержкиUber не из тех, кто заставляет часами ждать по телефону, слушая повторяющуюся музыку.Мы используем множество оптимизированных, удобных для пользователя функций поддержки, чтобы гарантировать, что райдеры могут получить необходимую им помощь, независимо от ситуации.
Сортировка с поддержкой в приложенииОдин из способов связаться с Uber — это раздел «Помощь» в вашем приложении, где вы найдете информацию и ответы по различным темам, связанным с пассажирами. Если вам нужно сообщить о проблеме с поездкой, проверить проблему с оплатой или изменить способ оплаты, вы можете решить эту проблему.
Раздел помощиUber в приложении также предлагает советы по различным темам для пассажиров: в нем рассказывается, как найти потерянный предмет, потому что у всех нас есть друг, который постоянно оставляет свой телефон или кошелек после поездки! Возможно, ваш вопрос касается поездок Uber в аэропорт и из аэропорта или открытия учетной записи Uber для вашего бизнеса. Возможно, вы даже захотите узнать, как чаевые работают с водителями Uber. Все ответы на эти вопросы доступны в центре поддержки приложения.
Обратитесь к водителю UberЕсли вы хотите обсудить детали поездки, места получения или потерянного предмета, легко позвоните водителю Uber через приложение Uber.Если вы только что запросили поездку, вы можете нажать на панель с информацией о водителе внизу экрана и выбрать «Связаться». Если вы связываетесь с водителем после поездки по поводу потерянного предмета, вы можете перейти в раздел «Ваши поездки», выбрать подходящую поездку и выбрать «Я потерял предмет», чтобы связаться с ним.
Чтобы защитить конфиденциальность водителей на нашей платформе, мы не указываем номера телефонов водителей напрямую, но приложение свяжется с вами. Помните, что водители могут не отвечать на звонки во время вождения, поэтому вы всегда можете отправить им текстовое сообщение для ответа.
Онлайн-помощьСправка также доступна на веб-сайте. Раздел онлайн-справки Uber содержит руководства и информацию по различным темам с отдельными разделами как для пассажиров, так и для водителей. Просто найдите категорию, которая соответствует вашей проблеме, или просто введите ключевое слово для поиска страницы справки. Веб-сайт Uber также предлагает ряд руководств о том, как работает Uber, с объяснениями, как использовать приложение и его многочисленные удобные функции.
Если вы оставили свой телефон или в другое время в поездке с водителем, вы также можете использовать веб-сайт, чтобы связаться с вашим водителем по поводу утерянной вещи.Для этого просто войдите в свою учетную запись и выберите «Проблемы с поездкой и возврат средств» в разделе справки (вы также можете сообщить о любых других проблемах с поездкой онлайн с этой страницы).
Позвоните намКонечно, вы всегда можете связаться с нами напрямую. У нас работает круглосуточная служба поддержки Uber для водителей и пассажиров. Просто откройте раздел «Справка» и выберите «Позвонить в службу поддержки», чтобы связаться с нашей службой поддержки через приложение. Вы также можете связаться с нами по старинке, просто позвонив по телефону +27800172956 — наша служба поддержки будет готова решить любую вашу проблему.
Итак, если у вас есть какие-то животрепещущие вопросы о наших услугах или вам нужно решить проблему, вы знаете, кому звонить. С Uber поддержка всегда под рукой, будь то приложение, веб-сайт или наша круглосуточная служба поддержки.
ORP1L-опосредованная передача сигналов PI (4) P при трехстороннем контакте ER-лизосома-митохондрия способствует делению митохондрий
ER, лизосомы и митохондрии образуют трехсторонний контакт, который участвует в делении митохондрий
Чтобы исследовать, является ли ER и лизосомы действуют согласованно во время деления митохондрий посредством образования трехстороннего контакта, мы сначала искали трехсторонние контакты между митохондриями, лизосомами и ER в клетках COS-7 в базальном состоянии с помощью визуализации в реальном времени с использованием суб- Система конфокальной микроскопии сверхвысокого разрешения.Пример трехстороннего контакта между этими органеллами, который показывает ER, обернутый вокруг лизосомы в прямом контакте с митохондрией, показан на рис. 1a. Эти трехсторонние контакты наблюдались во многих клеточных линиях (рис. 1b), что указывает на общность внутри клеток. Чтобы оценить частоту трехсторонних контактов ER-лизосома-митохондрии, мы контролировали присутствие ER в контактах лизосома-митохондрии, используя живую визуализацию, поскольку контакты лизосома-митохондрии были менее многочисленными и их легче обнаружить в клетках, чем контакты ER-митохондрии.Нашим критерием трехстороннего контакта было присутствие ER в контакте лизосома-митохондрия в течение не менее 10 с. Около 75% контактов лизосома-митохондрии были отмечены ER во всех исследованных клеточных линиях (рис. 1b, c), и многие из этих трехсторонних контактов были стабильными далеко за пределами 10-секундной временной точки (дополнительный рис. 1a, b) .
Рис. 1: Лизосомы, митохондрии и ЭР участвуют в трехстороннем контакте, который участвует в поздней стадии деления митохондрий.a Типичное изображение и трехмерная реконструкция трехстороннего контакта ER-лизосома-митохондрия в клетке COS-7.Масштабные линейки: 5 и 1 мкм (вставка). b ОС HeLa, COS-7 и U-2, экспрессирующие mito-BFP, GFP-KDEL и Lamp1-mCherry. На вставках показано увеличение области, обозначенной красным прямоугольником, где показаны контакты лизосома-митохондрии, отмеченные ER. Белая стрелка указывает на контакт лизосома-митохондрия. Масштабные линейки: 10 мкм и 1 мкм (вставка). c Количественная оценка процента контактов лизосома-митохондрии, которые отмечены ER в клетках HeLa, COS-7 и U-2 OS. График показывает среднее значение ± стандартная ошибка среднего.Клетки из трех независимых экспериментов. d Визуализация живых клеток клеток HeLa, экспрессирующих мито-BFP, GFP-KDEL и Lamp1-mCherry, в течение 10 с. Желтые стрелки указывают на сайт сужения митохондрий, опосредованный ER, а красные стрелки указывают на событие деления митохондрий. Шкала шкалы: 1 мкм. e Процент событий митохондриального деления (клетки из трех независимых экспериментов), отмеченных ER или лизосомами, и процент лизосом, отмеченных событиями деления, которые также были отмечены ER в клетках HeLa. f Последовательность привлечения ER и лизосом в сайте деления митохондрий для событий, которые были положительными как для ER, так и для лизосомы в e . г — i Визуализация живых клеток клеток HeLa, экспрессирующих GFP-Drp1, mito-BFP и Lamp1-mCherry ( г, ). Шкала шкалы: 1 мкм. ч Процент событий деления митохондрий, отмеченных Drp1 и лизосомами (клетки из двух независимых экспериментов). i Последовательность привлечения Drp1 и лизосом в сайт деления митохондрий для событий, которые были положительными как для Drp1, так и для лизосомы. j — l Визуализация живых клеток клеток HeLa, экспрессирующих mito-BFP, GFP-Arf1 и Lamp1-mCherry ( j ). Шкала шкалы: 1 мкм. k Процент событий деления митохондрий, отмеченных Arf1 и лизосомами (клетки из двух независимых экспериментов). l Последовательность привлечения Arf1 и лизосом в сайт деления митохондрий для событий, которые были положительными как для Arf1, так и для лизосомы. f , i , l Участки подразделения, которые уже были положительными по обоим маркерам в начале сбора, были исключены из анализа.
Чтобы проверить, участвуют ли трехсторонние контакты в делении митохондрий, мы визуализировали клетки HeLa, экспрессирующие митохондриальные, ER и лизосомные маркеры в течение 2 минут, и отслеживали результаты 100 случайно выбранных ранее существовавших трехсторонних контактов из 20 клетки. Большинство контактов не приводили к разделению, а вместо этого оставались привязанными (86/100 контактов) или оставались привязанными (11/100 контактов). Из визуализированных событий контакта небольшая часть из них привела к событию деления митохондрий (3/100 контактов) (дополнительный рис.1c), предполагая, что большинство трехсторонних контактов не участвуют в делении митохондрий. Затем мы количественно оценили долю событий деления митохондрий с ER или лизосомами или с обоими в месте деления до деления мембраны. Мы обнаружили, что ER отмечены все наблюдаемые события деления ( n = 73/73 события из 30 клеток) и лизосомы присутствуют более чем в половине из них ( n = 43/73 события) (Fig. 1d, e). В ~ 91% случаев деления с участием лизосом контакт ER-митохондрии предшествовал привлечению лизосом к месту деления (рис.1е). Эти находки предполагают, что лизосомы могут рекрутироваться в сайт деления с помощью ER и вносить вклад в деление митохондрий после начального сжатия митохондрий с помощью ER.
Чтобы определить, на какой стадии процесса деления митохондрий задействуются лизосомы, мы сравнили набор лизосом с таковым Drp1 и Arf1. Drp1 рекрутируется в сайт деления после начального сжатия ER для дальнейшего сжатия митохондриальных мембран 9,16 , в то время как везикулы Гольджи, содержащие Arf1, рекрутируются после Drp1 и участвуют в поздних этапах процесса деления по неопределенному механизму 6 .Мы обнаружили, что в большинстве событий деления лизосомы рекрутируются в сайты митохондриального деления после Drp1, но до пузырьков Гольджи (Fig. 1g-l). Взятые вместе, наши данные подтверждают, что трехсторонний контакт между лизосомами, ER и митохондриями формируется в месте деления митохондрий во время поздней стадии процесса деления после рекрутирования Drp1.
Rab7 опосредует образование подмножества трехсторонних контактов между лизосомами, митохондриями и ER
Rab7 участвует в сайтах контакта лизосом с ER и с митохондриями 7,13,17 .Совсем недавно было высказано предположение, что Rab7 также может участвовать в образовании трехсторонних контактов ER-лизосома-митохондрии 15 . Наши наблюдения, показывающие рекрутирование лизосом в сайт сужения митохондрий после ER (Fig. 1f), предполагают, что лизосомы могут рекрутироваться туда с помощью ER посредством образования сайтов контакта. Мы, следовательно, предположили, что Rab7 может обеспечивать контакт между лизосомами и ER в или рядом с сайтами контакта ER-митохондрий, чтобы установить трехсторонние контакты, которые особенно участвуют в делении митохондрий.Чтобы подтвердить эту гипотезу и количественно оценить роль Rab7 в формировании трехсторонних контактов, мы визуализировали Rab7, ER и митохондрии и обнаружили, что Rab7 положительные лизосомы присутствуют на контактах ER-лизосома-митохондрии (Fig. 2a). Кроме того, сверхэкспрессия Rab7 незначительно, но значительно увеличивала долю положительных структур Lamp1, обнаруженных в митохондриях и ER, по сравнению с контрольным вектором (рис. 2b) без какого-либо увеличения количества положительных структур Lamp1 (дополнительный рис.2а). Кроме того, истощение эндогенного Rab7 с использованием siRNA привело к уменьшению трехсторонних контактов (Fig. 2c, d), подтверждая, что Rab7 необходим для образования субнабора трехсторонних контактов между тремя органеллами.
Рис. 2: Rab7 регулирует субнабор трехсторонних контактов ER-лизосома-митохондрии.a Репрезентативное изображение Rab7-положительных контактов лизосомы-митохондрии, которые помечены ER в клетках HeLa, экспрессирующих mRFP-Rab7, GFP-KDEL и mito-BFP.Белые стрелки указывают на контакты лизосома-митохондрии. Линейный анализ относительных интенсивностей флуоресценции (слева направо) от красной линии, показанной в объединении. Шкала шкалы: 1 мкм. b Количественная оценка процента контактов лизосома-митохондрии, маркированных ER, в клетках HeLa, экспрессирующих Rab7 дикого типа или контрольный вектор, с mito-BFP, GFP-KDEL и Lamp1-mCherry. На графиках показано среднее значение ± SEM для клеток из трех независимых экспериментов. Двусторонний непарный т -тест. c Нормализованные уровни мРНК Rab7 в клетках, трансфицированных siRNA, специфически нацеленной на Rab7 или контрольную siRNA, измеренные с помощью RT-qPCR. На графиках показано среднее значение ± SEM для клеток из двух независимых экспериментов. d Количественная оценка процента контактов лизосома-митохондрии, отмеченных ER, когда уровень экспрессии Rab7 был подавлен с помощью siRNA, нацеленного на Rab7, по сравнению с контрольной siRNA в клетках, экспрессирующих Lamp1-mCherry, mito-BFP и GFP-KDEL. На графиках показано среднее значение ± SEM для клеток из трех независимых экспериментов.Двусторонний непарный т -тест. e Типичные изображения клеток HeLa, экспрессирующих mRFP-Rab7 дикого типа (WT), конститутивно активный (Q67L) или доминантно-отрицательный (T22N). Обратите внимание, что доминантно-отрицательный Rab7 (T22N) не локализуется в лизосомах, а является цитозольным. Шкала шкалы: 10 мкм. f Количественная оценка процента контактов лизосома-митохондрии, которые отмечены ER в клетках HeLa, экспрессирующих 3HA-Rab7 или его мутанты с Lamp1-mCherry, mito-BFP и GFP-KDEL.График показывает среднее значение ± SEM, клетки из трех независимых экспериментов. Односторонний дисперсионный анализ с множественным сравнительным тестом Даннета.
Чтобы проверить, активно ли Rab7 участвует в формировании трехсторонних контактов, мы использовали конститутивно активный мутант Rab7 Q67L, который заблокирован в лизосомах, и доминантно-отрицательный мутант Rab7 T22N, который устраняет локализацию Rab7 в лизосомах (рис. 2e). . Сверхэкспрессия 3HA-Rab7 Q67L не оказывала заметного влияния на долю трехсторонних контактов по сравнению с 3HA-Rab7 дикого типа, но сверхэкспрессия доминантно-негативного 3HA-Rab7 T22N приводила к значительному снижению количества лизосом-митохондрий. контакты, помеченные знаком ER (рис.2е). Таким образом, наши данные свидетельствуют о том, что Rab7, локализованный в лизосомах, активно способствует образованию трехсторонних контактов между лизосомами, митохондриями и ЭПР.
ORP1L опосредует Rab7-зависимый контакт ER-лизосомы с митохондриями
Белок, связанный с оксистерин-связывающим белком 1L (ORP1L), является белком-переносчиком липидов, который принадлежит к семейству белков, связанных с оксистерин-связывающим белком (OSBP) (ORP). ORP1L рекрутируется в лизосомы через его домены анкириновых повторов, которые связываются с Rab7 18 .Он также обладает мотивом FFAT — двумя фенилаланинами (FF) в кислотном тракте — что позволяет ему взаимодействовать с резидентными ER-белками VAPA и VAPB (далее называемыми VAP), помогая установить контакты ER-лизосом 12,19 . Интересно, что ORP1L был идентифицирован в митохондриальном протеомном анализе MitoCarta3.0 20 , а редкий генетический вариант OSBPL1A , кодирующий ORP1L, был связан с митохондриальной дисфункцией 21 , что указывает на возможную роль ORP1L в функции митохондрий.
Чтобы проверить, играет ли ORP1L роль в формировании трехстороннего контакта во время деления митохондрий, мы сначала исследовали субклеточную локализацию ORP1L-положительных лизосом по отношению к митохондриям и ER. В соответствии с предыдущими находками мы обнаружили, что ORP1L локализуется в субнаборе лизосом, помеченных Lamp1 (Supplementary Fig. 2b) или Rab7 (Supplementary Fig. 2c). Когда коэкспрессируется с доминантно-негативным Rab7 T22N, ORP1L остается цитозольным, подтверждая, что его рекрутирование в лизосомы зависит от Rab7 (дополнительный рис.2в). Мы проверили, локализуется ли ORP1L также на трехстороннем контакте ER-лизосома-митохондрия, и обнаружили, что GFP-ORP1L-положительные лизосомы появляются в контакте с митохондриями (рис. 3a) и локализуются в трехсторонних контактах с ER (рис. 3b). . Мы также обнаружили, что контакты между ORP1L-положительными лизосомами и митохондриями (Fig. 3c) обнаруживают повышенную стабильность по сравнению с Lamp1-положительными лизосомами в целом. Это привело к увеличению процента и продолжительности контактов ORP1L-положительных лизосом с митохондриями по сравнению с Lamp1-положительными лизосомами (рис.3d, e) предполагая, что избыточная экспрессия ORP1L может увеличивать частоту и продолжительность контактов лизосома-митохондрии.
Рис. 3: Rab7-взаимодействующий ORP1L регулирует образование трехсторонних контактов ER-лизосома-митохондрии в клетках Hela.a Репрезентативное изображение клетки, экспрессирующей GFP-ORP1L и mApple-TOM20, полученное с помощью SIM-микроскопии. Белые стрелки показывают ORP1L-положительные контакты лизосомы-митохондрии. Масштабные линейки: 10 мкм и 1 мкм (вставка). b Типичное изображение двух ORP1L-положительных контактов лизосома-митохондрия, обозначенных белыми стрелками, отмеченных ER.Показан линейный анализ относительных интенсивностей флуоресценции от желтой линии слияния. Шкала шкалы: 1 мкм. c Репрезентативное покадровое изображение ORP1L-положительных лизосом, образующих стабильный контакт с митохондриями, обозначено белыми стрелками на первом кадре. Шкала шкалы: 1 мкм. d , e Процент лизосом, положительных по Lamp1-mCherry и mCherry-ORP1L, контактирующих с митохондриями ( d ) и e минимальная продолжительность этих контактов в клетках, коэкспрессирующих mito-GFP.Клетки из трех независимых экспериментов. Двусторонний непарный т -тест. f, , г . Клетки из двух независимых экспериментов. Односторонний дисперсионный анализ с множественным сравнительным тестом Даннета. h — j Процент контактов лизосома-митохондрии, которые были отмечены ER: h , когда экспрессия ORP1 была подавлена.Клетки из трех независимых экспериментов, односторонний дисперсионный анализ с множественным сравнительным тестом Даннета; i в КО-клетках ORP1L и контрольных клетках. Клетки из трех независимых экспериментов, двусторонний непарный t -тест; и j , когда уровни экспрессии VAPA и VAPB были подавлены. Данные трех независимых экспериментов. Двусторонний непарный t -тест. k Цитозольный GAI-ΔANKORP1L может быть задействован в лизосомах GID1-Rab7 после обработки GA 3 -AM. l Типичное изображение клетки, экспрессирующей mTq2-GAI-ΔANKORP1L и iRFP-GID1-Rab7 до и после обработки GA 3 -AM (10 мкМ). Шкала шкалы: 10 мкм. m Нормализованная интенсивность флуоресценции mTq2-GAI-ΔANKORP1L WT и D478A, колокализующихся с лизосомами iRFP-GID1-Rab7 в указанные моменты времени до и после обработки GA 3 -AM. Клетки из четырех независимых экспериментов. n Относительная интенсивность флуоресценции ER в контактах лизосома-митохондрии в указанные моменты времени до и после обработки GA 3 -AM (заштрихованная область представляет область в пределах одного SEM).Клетки из четырех независимых экспериментов. Двусторонний дисперсионный анализ, критерий множественных сравнений Сидака. d — j , m , n Все графики показывают среднее значение ± SEM.
Затем мы спросили, зависит ли повышающая регуляция контакта лизосома-митохондрии в клетках, сверхэкспрессирующих ORP1L, от взаимодействия ORP1L с ER. Сначала мы сравнили формирование контактов лизосома-митохондрии в клетках, сверхэкспрессирующих GFP-ORP1L дикого типа или мутант по мотиву FFAT (D478A), который не может действовать как связующий элемент ER-лизосомы 22 , с клетками, сверхэкспрессирующими GFP.Здесь мы отслеживали контакты лизосома-митохондрии, используя Lamp1-mCherry в качестве лизосомального маркера. Сверхэкспрессия ORP1L, но не мутантного мотива FFAT, показала увеличение как доли, так и продолжительности контактов лизосома-митохондрии (Fig. 3f, g), подтверждая, что сверхэкспрессия ORP1L опосредует контакты лизосома-митохондрии ER-зависимым образом.
Затем мы спросили, необходим ли ORP1L для образования трехсторонних контактов ER-лизосома-митохондрии путем нарушения экспрессии ORP1L.В клетках HeLa, где экспрессия ORP1L была либо истощена (дополнительный рис. 2d), либо нокаутирована (дополнительный рис. 2e), мы наблюдали значительное снижение, но не отмену трехсторонних контактов (рис. 3h, i). Важно отметить, что нокдаун ORP1L не повлиял на долю лизосом, контактирующих с ER (дополнительный рис. 2f), или процент и продолжительность контактов лизосом с митохондриями (дополнительный рисунок 2g, h), что указывает на то, что сниженная доля ER-лизосом Контакты -митохондрии не были вызваны глобальным нарушением контактов ER-лизосома или лизосома-митохондрия.Кроме того, исследования siRNA также предполагают, что в базовых условиях ORP1L не является доминирующим связывающим белком для контакта лизосома-митохондрии. Затем мы проверили, нужны ли партнеры по связыванию ER ORP1L, VAP, для трехсторонних контактов. Нокдаун VAPs приводит к уменьшению трехсторонних контактов (Fig. 3j and Supplementary Fig. 2i), подтверждая, что взаимодействие ORP1L с VAPs играет важную роль в формировании ORP1L-зависимого трехстороннего контакта.
Чтобы подтвердить, что ORP1L непосредственно участвует в формировании подмножества трехсторонних контактов, мы искусственно индуцировали резкое привлечение ORP1L к лизосомам Rab7 в клетках HeLa и отслеживали ER в контактах лизосома-митохондрии как способ оценки трехсторонние контакты.Мы использовали систему димеризации GID1-GAI 23 , где GAI-ΔANKORP1L, конструкция ORP1L, слитая с GAI, лишенная доменов анкириновых повторов и, следовательно, цитозольная, была задействована в GID1-Rab7-положительных лизосомах после обработки гиббереллином (GA 3 -AM). это запускало димеризацию GID1 с GAI (Fig. 3k, l). GAI-ΔANKORP1L D478A, мутантная версия ORP1L по FFAT, использовалась в качестве отрицательного контроля. Схематическое резюме методологии, использованной для этого эксперимента, показано на дополнительном рис.2j. Обе конструкции GAI-ΔANKORP1L эффективно рекрутировались в лизосомы Rab7 после обработки гиббереллином (фиг. 3m), но образованию трехсторонних контактов способствовало только рекрутирование GAI-ΔANKORP1L дикого типа (фиг. 3n).
Наконец, чтобы подтвердить специфичность оси Rab7-ORP1L-VAP в формировании контактов ER-лизосома-митохондрии, мы истощили другой лизосомный липидный транспортный белок, STARD3, и отслеживали трехсторонние контакты. STARD3 также обеспечивает контакты ER-лизосомы посредством взаимодействия с VAP, но независимо от Rab7 24 , и было предложено вносить вклад в формирование контактов лизосома-митохондрии 25 .Мы обнаружили, что нокдаун STARD3 не повторяет потерю трехсторонних контактов, вызванную подавлением ORP1L или VAPs (Supplementary Fig. 2k, l). В совокупности эти данные подтверждают, что ось Rab7-ORP1L-VAPs регулирует формирование субнабора трехсторонних контактов между ER, лизосомами и митохондриями.
Ось Rab7-ORP1L-VAPs регулирует деление митохондрий
Далее мы проверили, необходимы ли трехсторонние контакты, опосредованные взаимодействием Rab7-ORP1L-VAP для деления митохондрий.Недавно было показано, что избыточная экспрессия конститутивно активного Rab7 Q67L нарушает деление митохондрий, указывая тем самым, что гидролиз Rab7 GTP вносит вклад в процесс деления 7 . Здесь мы обнаружили, что как избыточная экспрессия либо GTP-заблокированного мутанта Rab7 Q67L, так и доминантно-негативного мутанта Rab7 T22N, заблокированного GDP, снижает скорость деления митохондрий (рис. 4a). Снижение скорости деления митохондрий, особенно в клетках со сверхэкспрессией мутанта T22N, было связано с удлинением митохондрий, увеличением количества митохондриальных соединений и уменьшением количества митохондрий (дополнительный рис.3a – d), что указывает на более высокую степень слияния митохондриальной сети. Это указывает на то, что для деления митохондрий необходим не только гидролиз Rab7 GTP, но и что Rab7 д. Локализоваться в лизосомах. Подобное снижение скорости деления митохондрий наблюдалось также в клетках, лишенных VAP (рис. 4b). Вместе эти результаты подтверждают, что и Rab7, и VAPs необходимы для деления митохондрий.
Рис. 4. Взаимодействие Rab7-ORP1L-VAPs регулирует деление митохондрий.a , b Нормализованная скорость митохондриального деления (количество митохондриальных делений, нормализованное по времени и объему) в клетках HeLa ( a ), экспрессирующих 3HA-Rab7 дикого типа или мутанты.Клетки из трех независимых экспериментов. Односторонний дисперсионный анализ с тестом множественного сравнения Даннета; b , когда уровни экспрессии VAP снижались с использованием миРНК. Клетки из трех независимых экспериментов. Двусторонний непарный т -тест. На графиках показано среднее значение ± стандартная ошибка среднего. c Визуализация живых клеток клеток HeLa, экспрессирующих GFP-ORP1L и mApple-TOM20. Белые и желтые стрелки показывают ORP1L-положительный контакт лизосомы-митохондрии и событие деления митохондрий. Шкала шкалы: 1 мкм. d Процент событий деления митохондрий, которые были отмечены GFP-ORP1L (клетки из двух независимых экспериментов) в клетках HeLa. e Типичные изображения максимальной проекции морфологии митохондрий в клетках HeLa, обработанных указанными миРНК. Масштабные линейки: 10 мкм и 5 мкм (вставка). f — h Морфология митохондрий была определена количественно для f средней площади на митохондрии, g количества митохондрий на интересующую область (ROI) и h количества соединений на митохондрии.Клетки из трех независимых экспериментов. Односторонний дисперсионный анализ с множественным сравнительным тестом Даннета. На графиках показано среднее значение ± стандартная ошибка среднего. i , j Нормализованная скорость митохондриального деления клеток HeLa i , обработанных указанными миРНК. Клетки из трех независимых экспериментов. Односторонний дисперсионный анализ с использованием теста множественного сравнения Даннета и – ORP1L клеток HeLa WT и KO. Клетки из трех независимых экспериментов. Двусторонний непарный т -тест. На графиках показано среднее значение ± стандартная ошибка среднего. k использованных мутантов ORP1L и потеря функции, вызванная мутациями или делециями. l Нормализованная скорость деления митохондрий в клетках ORP1L KO HeLa, экспрессирующих конструкции GFP или GFP-ORP1L и mApple-TOM20. На графиках показано среднее значение ± SEM для клеток из трех независимых экспериментов. Односторонний дисперсионный анализ с множественным сравнительным тестом Даннета. m Нормализованная скорость деления митохондрий в клетках ORP1L KO HeLa, экспрессирующих mTq2-GAI-ΔANKORP1L, iRFP-GID1-Rab7 и mApple-TOM20, до и после обработки GA 3 -AM (10 мкМ).Клетки получали изображение через 5-20 мин после обработки GA 3 -AM. Клетки из трех независимых экспериментов. Двусторонний непарный т -тест. На графиках показано среднее значение ± стандартная ошибка среднего.
Чтобы проверить, требуется ли ORP1L также для деления митохондрий, мы сначала исследовали лизосомы, положительные по ORP1L, в месте деления. Мы обнаружили, что ORP1L-положительные лизосомы были задействованы в 58,1% ( n = 43/74 события из 24 клеток) событий митохондриального деления (рис. 4c, d), что аналогично доле событий деления, отмеченных лизосомами (рис. .1д). Фактически, мы обнаружили, что почти 90% лизосом, маркирующих деление митохондрий, обладают GFP-ORP1L (дополнительный рис. 3e). Когда клетки были истощены по ORP1L, сильное изменение морфологии митохондрий наблюдалось с более удлиненными и гипер слитыми митохондриями (рис. 4e-h), что было связано со сниженной скоростью деления и отсутствием разницы в скорости слияния по сравнению с клетками, обработанными контрольная миРНК (рис. 4i и дополнительный рис. 3f). Аналогичное снижение скорости деления наблюдалось и в клетках ORP1L KO HeLa (рис.4j). Эти изменения не были вызваны снижением уровней ключевых компонентов аппарата деления, таких как Drp1, так как его уровень белка в ORP1L KO клетках не изменился (дополнительный рис. 3g). Сходным образом истощение siRNA ORP1L не влияет на уровни мРНК Drp1 или его адаптера MFF (дополнительный рис. 3h, i). Более того, стимулированное Drp1-зависимое деление митохондрий, вызванное обработкой карбонилцианид-3-хлорфенилгидразоном (CCCP) или сверхэкспрессией митохондриальной заякоренной протеин-лигазы (MAPL) 26 , сильно снижалось в клетках, лишенных ORP1L (дополнительный рис.4а – з). В совокупности эти данные убедительно подтверждают, что взаимодействие Rab7-ORP1L-VAPs необходимо для эффективного деления митохондрий.
ORP1L Липидный транспортный домен необходим для митохондриального деления
Ключевым функциональным доменом ORP1L является его липидный транспортный домен, называемый OSBP-связанным доменом (ORD), который необходим для переноса холестерина 19 и PI (4) P 27 . Чтобы проверить, требуется ли активность переноса липидов ORP1L для деления митохондрий или он просто действует как связующее звено для трехстороннего контакта ER-лизосома-митохондрия, мы провели эксперименты по комплементации на клетках ORP1L KO HeLa путем повторного введения либо ORP1L дикого типа. или мутанты функционального домена и количественно оценили скорость деления митохондрий.Тремя разными мутантами ORP1L были: (i) конструкция ΔORD, в которой отсутствует домен переноса липидов, (ii) мутант HH / AA, который имеет две мутации в домене ORD, отменяющие его способность извлекать PI (4) P из мембран 27 , и (iii) мутант по мотиву FFAT D478A, который не может взаимодействовать с VAP 27 (фиг. 4k и дополнительная фиг. 5a). Важно отметить, что эти конструкции все еще локализуются в Rab7-положительных лизосомах 27 . Более поздний мутант служил отрицательным контролем, поскольку он не может взаимодействовать с ER, нарушая, таким образом, образование контактов ER-лизосома-митохондрии.И ΔORD, и конструкции HH / AA легко рекрутировались в сайты контакта лизосома-митохондрии на том же уровне, что и конструкции дикого типа (дополнительный рис. 5b, c). Мутант D478A показал значительное уменьшение контакта лизосома-митохондрии, что подтверждает необходимость VAP в формировании сайта контакта лизосома-митохондрии (дополнительный рис. 5c). Однако только ORP1L дикого типа смог улучшить скорость митохондриального деления в клетках ORP1L KO (рис. 4l), что позволяет предположить, что роль ORP1L как в образовании трехсторонних контактов, так и в переносе липидов важна для деления митохондрий. .
Чтобы проверить, участвует ли функция переноса липидов ORP1L непосредственно в делении, и исключить возможность косвенного эффекта потери функции ORP1L, мы быстро задействовали ORP1L в лизосомах в KO-клетках ORP1L с использованием системы GID1-GAI и контролировали скорость деления митохондрий. Рекрутирование GAI-ΔANKORP1L в лизосомы увеличивало скорость митохондриального деления в клетках ORP1L KO (рис. 4m), предполагая, что острого восстановления переноса липидов, опосредованного ORP1L, было достаточно для восстановления деления митохондрий.Вместе наши эксперименты по спасению показывают, что ORP1L необходим не только для образования трехстороннего контакта ER-лизосома-митохондрия в месте деления митохондрий, но также и что его домен переноса липидов необходим для деления митохондрий, что позволяет предположить, что ORP1L переносит липиды во время процесс деления митохондрий.
Лизосомный PI (4) P необходим для деления митохондрий
Ранее было показано, чтоORP1L опосредует перенос холестерина из лизосом в ER 19 и PI (4) P из фаголизосом в ER 27 .Интересно, что среди лизосом, маркирующих сайт митохондриального деления, 83,8% ( n = 26/31 событий из 22 клеток; дополнительный рис. 5d, e) были положительными для зонда холестерина D4H 28 и 82,1% ( n = 32/39 событий из 21 клетки ; (рис. 5a, b) были положительными для зонда PI (4) P 2xP4M 29 . Чтобы проверить, требуется ли перенос холестерина при делении митохондрий, мы истощили NPC1 — ключевой белок в выходе холестерина из лизосом 25 — с помощью миРНК (дополнительный рис.5f), поскольку было показано, что ORP1L требует NPC1 для транспортировки лизосомального холестерина к ER 19 . Мы обнаружили, что подавление NPC1 не влияет на морфологию митохондрий или скорость деления митохондрий (Supplementary Fig. 5g – k), указывая тем самым, что ORP1L не требуется для переноса холестерина из лизосом в место деления митохондрий.
Рис. 5: Лизосомный PI (4) P вносит вклад в деление митохондрий.a Репрезентативное изображение митохондриального деления, отмеченного положительной лизосомой GFP-2xP4M (желтая стрелка) в клетках HeLa, экспрессирующих указанные маркеры.Обработка ингибитором PI4KA GSK-A1 позволила лучше визуализировать PI (4) P в лизосомах. Шкала шкалы: 1 мкм. b Процент событий деления митохондрий, отмеченных лизосомами (клетки из двух независимых экспериментов), и лизосом, отмеченных GFP-2xP4M в событиях деления митохондрий. c В ORPSAC1 домен ORD ORP1L был заменен каталитическим доменом Sac1, позволяющим дефосфорилировать лизосомный PI (4) P. d Типичные изображения максимальной проекции морфологии митохондрий в клетках HeLa, сверхэкспрессирующих указанные конструкции.Масштабные линейки: 10 мкм и 5 мкм (вставка). e — g Морфология митохондрий была определена количественно для e средней площади на митохондрии, f количества митохондрий на интересующую область (ROI) и g количества соединений на митохондрии. Клетки из трех независимых экспериментов. Односторонний дисперсионный анализ с множественным сравнительным тестом Даннета. ч Нормализованная скорость деления митохондрий в клетках HeLa, сверхэкспрессирующих указанные конструкции. Клетки из трех независимых экспериментов.Односторонний дисперсионный анализ с множественным сравнительным тестом Даннета. i Цитозольный GAI-Sac1 может быть задействован в лизосомах GID1-Rab7 после обработки GA 3 -AM для специфического истощения лизосомного PI (4) P. j , k Типичные изображения клеток HeLa, экспрессирующих CFP-GAI-Sac1 или каталитически мертвый мутант C392S, iRFP-GID1-Rab7 и mCherry-2xP4M после обработки GA 3 -AM ( j ). Масштабные линейки: 10 мкм и 1 мкм (вставка). k Количественная оценка лизосомных уровней 2xP4M, нормализованных по уровням плазмалеммы.Клетки из трех независимых экспериментов. Двусторонний непарный т -тест. l Нормализованная скорость деления митохондрий до или после обработки GA 3 -AM в клетках HeLa, сверхэкспрессирующих iRFP-GID1-Rab7, и указанных конструкциях. Клетки из трех независимых экспериментов. Двусторонний дисперсионный анализ, критерий множественных сравнений Сидака. m Репрезентативное изображение клетки HeLa, экспрессирующей GFP-PI4K2B и Lamp1-mCherry, с увеличенной вставкой белого квадрата на панели слияния. Шкала шкалы: 10 мкм. n Нормализованная скорость деления митохондрий в клетках HeLa, обработанных указанными миРНК. Клетки из трех независимых экспериментов. Односторонний дисперсионный анализ с множественным сравнительным тестом Даннета. e — h , k , l , n Все графики показывают среднее значение ± SEM.
Как было недавно показано, продукция PI (4) P в Гольджи играет решающую роль в делении митохондрий 6 , и лизосомы, маркирующие события деления митохондрий, были положительными для зонда PI (4) P 2xP4M (рис.5а, б), мы предположили, что ORP1L может опосредовать перенос PI (4) P из лизосом в место деления митохондрий. Чтобы проверить это, мы использовали ранее проверенную химерную конструкцию ORPSAC1 27 , в которой домен ORD ORP1L был заменен каталитическим доменом Sac1, фосфатазы, которая дефосфорилирует PI (4) P. Это позволило нам проверить, нарушает ли специфическое истощение PI (4) P в цитозольном листке лизосомальной мембраны деление митохондрий (Fig. 5c). Сверхэкспрессия ORP1L дикого типа и ORPSAC1 привела к значительному снижению сигнала 2xP4M на ORP1L-положительных лизосомах по сравнению с избыточной экспрессией мутантного ORP1L HH / AA, который не может экстрагировать PI (4) P (дополнительный рис.6а, б). Эти результаты подтверждают, что ORPSAC1 способен истощать PI (4) P в лизосомах и что, как ранее сообщалось 27 , ORP1L регулирует уровни PI (4) P в лизосомах, вероятно, путем переноса его в другие компартменты. Затем мы исследовали морфологию митохондрий в клетках, сверхэкспрессирующих GFP-ORPSAC1, и обнаружили, что он был сильно удлиненным и гиперслитым (рис. 5d – g), и эти клетки показали значительно более низкую скорость деления митохондрий (рис. 5h) по сравнению с клетками. сверхэкспрессия GFP или GFP-ORP1L.ORPSAC1-положительные лизосомы контактировали с митохондриями с той же частотой и продолжительностью, что и ORP1L-положительные лизосомы дикого типа, что позволяет предположить, что его сверхэкспрессия не изменяет контакты лизосома-митохондрии (дополнительный рис. 6c, d) и не нарушает локализацию ORP1L в лизосомы (дополнительный рис. 6e). Кроме того, ORPSAC1-положительные лизосомы наблюдались в контакте с mApple-Drp1 puncta в сайтах сужения митохондрий (дополнительный рис. 6f), что указывает на то, что истощение PI (4) P не препятствовало рекрутированию лизосом в сайты сужения митохондрий.
Чтобы подтвердить необходимость лизосомального PI (4) P в делении митохондрий и исключить потенциальный эффект длительного истощения лизосомального PI (4) P, который может косвенно влиять на деление митохондрий, мы резко снизили уровень PI (4) P в Rab7-положительных лизосомах путем нацеливания цитозольного Sac1 на лизосомы с использованием системы GID1-GAI (фиг. 5i). Рекрутирование Sac1 дикого типа, но не каталитически мертвого мутанта C392S, привело к снижению уровней 2xP4M в лизосомах (рис. 5j, k), а также к снижению скорости деления митохондрий (рис.5l), демонстрируя, что острое истощение PI (4) P на лизосомальной мембране нарушает деление митохондрий. Наконец, мы проверили, подавляет ли ингибирование продукции PI (4) P в лизосоме деление митохондрий. Было высказано предположение, что лизосомный PI (4) P генерируется фосфатидилинозитол-4-киназами II типа (PI4K), такими как PI4K2A и PI4K2B 30,31,32 . GFP-меченный PI4K2B, локализованный в лизосомах (рис. 5m), и подавление PI4K2B (дополнительный рис. 7a) приводили к снижению уровней 2xP4M в лизосомах (дополнительный рис.7b), что согласуется с ролью PI4K2B в продукции лизосомного PI (4) P. Количественная оценка скорости деления митохондрий в клетках с нокдауном PI4K2B показала пониженную скорость деления и значительную гиперфузию митохондриальной морфологии (Fig. 5n и Supplementary Fig. 7c-f) по сравнению с клетками, обработанными контрольной siRNA. В совокупности наши результаты указывают на критическую роль лизосомального PI (4) P в делении митохондрий и предполагают, что ORP1L обеспечивает перенос PI (4) P во время этого процесса.
Восстановление переноса PI (4) P из лизосом восстанавливает морфологию митохондрий в клетках, истощенных по ORP1L
Чтобы подтвердить, что перенос лизосомного PI (4) P через трехсторонний контакт ER-лизосома-митохондрия необходим для деления митохондрий, мы истощили клетки HeLa ORP1L с помощью siRNA и проверили, может ли восстановление переноса PI (4) P из лизосом восстановить морфологию митохондрий, вызванную истощением ORP1L.Для этого мы создали химерный белок, который мы назвали ORPOSBP, в котором N-конец OSBP был заменен N-концом ORP1L, который содержит Rab7-связывающие анкириновые повторы (рис. 6a). OSBP — это хорошо зарекомендовавший себя белок-переносчик PI (4) P, который обеспечивает его перенос в сети транс-Гольджи — ER 33,34 и в сайтах контакта эндолизосомы-ER 35,36 .
Рис. 6. Нацеливание белка-переносчика PI (4) P OSBP на лизосомы устраняет изменения морфологии митохондрий, вызванные истощением ORP1L.a ORPOSBP — это химерный белок, состоящий из аминокислот 1–335 ORP1L, слитых с аминокислотами 184–809 OSBP из Oryctalogus cuniculus . Домены не масштабируются. b Типичное изображение клетки Hela, экспрессирующей GFP-ORPOSBP и mRFP-Rab7. Увеличенное изображение пунктирной рамки показано справа. Масштабные линейки: 10 мкм и 5 мкм (вставка). c Покадровые изображения клеток HeLa, экспрессирующих GFP-ORPOSBP и mApple-TOM20. Желтая стрелка показывает событие деления митохондрий, отмеченное GFP-ORPOSBP.Шкала шкалы: 1 мкм. d , e Типичные изображения клеток HeLa, экспрессирующих GFP-ORPOSBP дикого типа или мутант HH / AA с дефицитом связывания липидов с зондом PI (4) P mCherry-2xP4M ( d ). Масштабные линейки: 10 мкм и 1 мкм (вставка). e Количественная оценка лизосомных уровней 2xP4M, нормализованных по уровням плазмалеммы зонда. На графиках показано среднее значение ± SEM для клеток из трех независимых экспериментов. Двусторонний непарный т -тест. f Типичные изображения максимальной проекции морфологии митохондрий в клетках HeLa, обработанных siRNA, подавляющими ORP1L и сверхэкспрессирующими GFP, GFP-ORPOSBP или мутант HH / AA ORPOSBP и mApple-TOM20.Обратите внимание, что экспрессия ORPOSBP дикого типа, но не экспрессия мутанта HH / AA, спасает удлинение митохондрий и гиперфузию митохондриальной сети, вызванную истощением ORP1L. Масштабные линейки: 10 мкм и 5 мкм (вставка). г — i Морфология митохондрий была определена количественно для г средней площади на митохондрии, h количества митохондрий на интересующую область (ROI) и i количества соединений на митохондрии. Клетки из трех независимых экспериментов. Односторонний дисперсионный анализ с тестом множественного сравнения Даннета, статистически не значимый: g p = 0.6437, h p = 0,7205 и i p = 0,3046. На графиках показано среднее значение ± стандартная ошибка среднего. j — l Морфология митохондрий клеток Hela, экспрессирующих GFP или GFP-ORPOSBP, была количественно определена для j средней площади на митохондрии, k количества митохондрий на интересующую область (ROI) и l количества соединений на митохондрии. Клетки из трех независимых экспериментов. Двусторонний непарный t -тест, статистически недостоверный. j p = 0,8011, k p = 0,6381 и l p = 0,9266. На графиках показано среднее значение ± стандартная ошибка среднего.
При сверхэкспрессии в клетках ORPOSBP почти исключительно локализуется в Rab7-положительных лизосомах (фиг. 6b), которые обнаруживаются в сайтах деления митохондрий (фиг. 6c). Кроме того, клетки, экспрессирующие ORPOSBP, показали более низкие уровни 2xP4M в лизосомах по сравнению с мутантом HH / AA, который отменяет способность OSBP извлекать PI (4) P из мембран 37 (рис.6d, e), демонстрируя, что ORPOSBP способен способствовать переносу PI (4) P из лизосом. Важно отметить, что экспрессия ORPOSBP, но не мутанта HH / AA, была достаточной для восстановления изменений морфологии митохондрий, вызванных RNAi-опосредованным истощением ORP1L (Fig. 6f-i). Однако ORPOSBP не влиял на морфологию митохондрий в контрольных клетках (Fig. 6j-l), подобно сверхэкспрессии ORP1L (Fig. 5e-g). Таким образом, наши данные подтверждают, что ORP1L опосредует перенос PI (4) P из лизосом, чтобы способствовать делению митохондрий.
Рекрутирование PI (4) P фосфатазы Sac1 в митохондрии нарушает их деление
Далее мы исследовали, может ли сайт деления митохондрий быть реципиентом лизосомного PI (4) P во время митохондриального деления. Поскольку любой PI (4) P, переносимый в ER, быстро превращается в PI с помощью локализованного в ER SAC1 38 , мы пришли к выводу, что ORP1L, вероятно, переносит PI (4) P на митохондриальную мембрану во время деления митохондрий. Чтобы проверить эту гипотезу, мы сначала спросили, требуется ли PI (4) P для деления митохондрий путем истощения PI (4) P в сайте деления путем нацеливания на каталитический домен Sac1 с использованием системы димеризации GAI-GID1, где GID1 был слит. к белку внешней мембраны митохондрий MFF, который рекрутирует Drp1 в сайт деления 9 (рис.7а, б). Острое привлечение каталитического домена Sac1, но не каталитически мертвого мутанта C392S, в сайты деления митохондрий привело к заметному снижению скорости деления митохондрий (Fig. 7c). Более того, через 6 часов после нацеливания Sac1 на сайты митохондриального деления это привело к значительному увеличению элонгации митохондрий и гиперфузии митохондриальной сети (Supplementary Fig. 8a-d). Однако рекрутирование каталитически мертвого Sac1 C392S не влияет на морфологию митохондрий, указывая тем самым, что наблюдаемые эффекты зависят от каталитической активности Sac1.Чтобы дополнительно подтвердить необходимость PI (4) P в месте деления, мы экспрессировали слитый белок Sac1-MFF, чтобы закрепить каталитический домен Sac1 на внешней мембране митохондрий (Fig. 7d). Клетки, экспрессирующие GFP-Sac1-MFF, обнаруживают повышенное удлинение и гиперфузию митохондриальной сети (рис. 7e-h) по сравнению с контрольными клетками, сверхэкспрессирующими только GFP, каталитически мертвыми GFP-Sac1 C392S-MFF или GFP-MFF. Вместе эти результаты предполагают, что PI (4) P необходим в месте деления митохондрий и играет решающую роль в процессе деления.
Рис. 7. Привлечение PI (4) P фосфатазы Sac1 к митохондриям нарушает их деление.a Растворимый GAI-Sac1 может быть рекрутирован в сайт деления митохондрий с использованием GID1-MFF после обработки GA 3 -AM, что приводит к дефосфорилированию PI (4) P в сайте деления митохондрий. b Типичное изображение клетки HeLa, экспрессирующей CFP-GAI-Sac1, iRFP-GID1-MFF (без изображения) и mApple-TOM20 до и после обработки GA 3 -AM (10 мкМ).Шкала шкалы: 10 мкм. c Нормализованная скорость деления митохондрий до и после обработки GA 3 -AM (10 мкМ) в клетках HeLa, сверхэкспрессирующих CFP-GAI-Sac1 дикого типа или неактивный мутант C392S, iRFP-GID1-MFF и mApple-TOM20 . При обработке GA 3 клетки -AM (10 мкМ) отображали между 5 и 25 мин обработки. Клетки из трех независимых экспериментов. Двусторонний дисперсионный анализ, критерий множественных сравнений Сидака. d В GFP-Sac1-MFF, Sac1 был слит с MFF, чтобы закрепить его непосредственно на внешней митохондриальной мембране, что привело к дефосфорилированию PI (4) P в сайте деления митохондрий. e Типичные изображения максимальной проекции клеток HeLa, экспрессирующих GFP, GFP-MFF, GFP-Sac1-MFF или каталитически неактивные GFP-Sac1 C292S-MFF и mApple-TOM20. На вставке показана морфология митохондриальной сети. Масштабные линейки: 10 мкм и 5 мкм (вставка). f — h Морфология митохондрий была определена количественно для f средней площади на митохондрии, g количества митохондрий на интересующую область (ROI) и h количества соединений на митохондрии.Клетки из трех независимых экспериментов. Односторонний дисперсионный анализ с множественным сравнительным тестом Тьюки. i Типичные изображения клеток ORP1L KO HeLa, экспрессирующих указанные конструкции, до и после обработки GA 3 -AM (10 мкМ). Шкала шкалы: 10 мкм. j Нормализованная скорость митохондриального деления в клетках ORP1L KO HeLa, экспрессирующих цитозольный mTq 2 -GAI-ΔANKORP1L D478A, mApple-TOM20, GFP-ORP1LΔORD и iRFP-GID1-Rab7 до и после GA762 3 10 мкМ) обработки.Клетки из трех независимых экспериментов. Двусторонний непарный t-критерий. k Нормализованная скорость митохондриального деления в клетках ORP1L KO HeLa, экспрессирующих цитозольный mTq 2 -GAI-ΔANKORP1L D478A, mApple-TOM20 и iRFP-GID1-Rab7 до и после обработки GA 3 -AM (10 мкМ). Клетки из трех независимых экспериментов. Двусторонний непарный т -тест. c , f — h , j , k Все графики показывают среднее значение ± SEM.ns несущественно: f p = 0,7632, g p = 0,3592, h p = 0,7935 и k p = 0,5192.
Чтобы проверить, достаточно ли продукции PI (4) P в сайте деления митохондрий для ускорения деления, мы нацелили каталитический домен PI4KA (PI4KAc1001) на сайт деления (дополнительный рис. 8e) и контролировали скорость деления в обоих. контроль и в клетках ORP1L KO. Как было продемонстрировано ранее 39 , привлечение каталитического домена PI4KA (PI4KAc1001) в митохондрии приводит к продукции PI (4) P в митохондриях (дополнительный рис.8е, г). Однако это не влияет на скорость деления митохондрий в контроле или в клетках ORP1L KO (Supplementary Fig. 8h, i), указывая тем самым, что увеличения только PI (4) P в митохондриях недостаточно для стимулирования их деления. Этот результат указывает на то, что синхронизированное увеличение PI (4) P в месте деления митохондрий может быть критическим для управления делением митохондрий.
VAPs-независимый транспорт липидов ORP1L достаточен для восстановления митохондриального деления в ORP1L KO-клетках
Перенос липидов ORP1L между ER и лизосомой в Rab7-ORP1L-VAPs, опосредованном контактным сайтом ER-лизосомы, требует связывания ORP1L с VAP 19 .Однако Rab7 также участвует в формировании сайта контакта мембраны с митохондриями, поскольку его взаимодействие с митохондриальным локализованным белком TBC1D15 управляет его гидролизом GTP, чтобы развязать две органеллы 7 . Поскольку ORP1L связывается непосредственно с Rab7, мы предполагаем, что ORP1L может напрямую транспортировать лизосомный PI (4) P к митохондриям в контактах лизосома-митохондрии, индуцированных привлечением лизосом к участку митохондриального деления. Чтобы проверить эту гипотезу, мы исследовали, может ли ORP1L, локализованный в лизосоме, который не может связываться с VAP, но все еще способный связываться с Rab7, спасти деление митохондрий в клетках ORP1L KO.Поскольку взаимодействие ORP1L-VAPs необходимо для рекрутирования лизосом в сайт митохондриального деления, мы котрансфицировали клетки ORP1L KO как мутантом FFAT ORP1L D478A, так и мутантом ORD с делецией ORP1LΔORD. Обе конструкции не могут спасать клетки ORP1L KO по отдельности (фиг. 4l). Чтобы различить активность этих конструкций, мы нацелили мутант FFAT (GAI-ΔANKORP1L D478A) на лизосомы с использованием системы димеризации GID1-GAI. Мы обнаружили, что только клетки с обеими конструкциями в лизосомах показали повышенную скорость деления митохондрий в клетках ORP1L KO (рис.7i, j). Однако один только GAI-ΔANKORP1L D478A в лизосоме не способен восстанавливать деление митохондрий (фиг. 7k). Эти результаты предполагают, что ORP1L может переносить липиды без связывания с VAP, тем самым обеспечивая дополнительную поддержку ORP1L в качестве переносчика PI (4) P в контакте лизосома-митохондрия во время деления митохондрий.
Контактные телефоны / Департамент социальных служб Миннесоты
A | B | C | D | E | F | G | H | Я | J | K | L | M | N | O | P | Q | R | S | Т | U | V | W | X | Y | Z
А
Принятие, 651-431-4656
Дневной уход для взрослых
Приемная семья для взрослых
Психическое здоровье взрослых, 651-431-2225
Психиатрические услуги для взрослых
- Метро, 763-548-КРОВ
- Большая Миннесота, 866-966-BEDS
Служба защиты взрослых, 651-431-2609
Позитивное действие, 651-431-3040Услуги для пожилых людей и взрослых, 651-431-2600
Программы по СПИДу / ВИЧ, 651-431-2414
- Горячая линия программы, 800-657-3761
Отдел по борьбе со злоупотреблением алкоголем и наркотиками, 651-431-2460
Альтернативный уход (AC)
Апелляции и постановления, 651-431-3600
B
Возмещение пособий, 651-431-3100
- Бесплатная линия 800-657-3963
Льготы по специальному взысканию льгот, 651-431-3204
Совет по старению, 651-431-2500
Анализ бюджета, 651-431-2930
С
Central Pre-Admission (Прямая помощь и лечение), 651-431-5337
- Бесплатная линия для Большой Миннесоты: 866-966-BEDS (2337)
Химическое здоровье — см. Отдел по борьбе с алкоголем и наркотиками
Жестокое обращение с детьми / безнадзорность, 651-431-4661
Обследование детей и подростков, 651-431-5655
Алименты (общая информация), 651-431-4400
- Бесплатная линия (АТС), 800-657-3890
Центр выплаты алиментов — Выплаты алиментов
Услуги для детей и семьи, 651-431-3836
Услуги для детей, 651-431-4660
Психическое здоровье детей, 651-431-2321
Гражданские права, 651-431-3040
Офис комиссара, 651-431-2907
Сообщество жизнеобеспечения, 651-431-3809
Общественное партнерство, 651-431-3809
Служба поддержки сообщества, 651-431-2460
Программа компульсивных азартных игр, 651-431-2245
Consumer Support Grants (CSG), 651-431-4300
Постоянный уход за инвалидами, 651-431-2400
D
Отдел обслуживания глухих и слабослышащих, 800-657-3663, голосовая связь или предпочитаемая вами ретрансляционная служба, 651-964-1514 видеотелефон
Справочная служба DHS, 651-431-2000
Служба безопасности DHS, 651-431-3000
Центр инвалидов MN, 866-333-2466
Отдел обслуживания инвалидов, 651-431-4300 или по бесплатному телефону 866-267-7655
Дискриминация, 651-431-3040
Лекарства (помощь по рецептам), 800-333-2433 (Senior LinkAge Line)
E
Экономическая помощь, 651-431-4000;
Отказ от прав пожилых людей (EW)
Электронный перевод пособий (EBT), 888-997-2227
Электронный обмен данными, 651-431-2700
- Бесплатная линия, 800-366-5411
Равный доступ к программам или услугам (EOAA), 651-431-3040
Управление равных возможностей, 651-431-3040
F
Служба поддержки семьи и детей, 651-431-4660
Справедливое обращение, 651-431-3040
Финансовые операции, 651-431-3725
Продовольственная поддержка (ранее — продовольственные талоны), 651-431-4049
- Бесплатная линия, 800-657-3698
Продовольственная поддержка, трудоустройство и обучение (FSET), 651-431-4027
Формы, 651-431-3502
Приемная семья для детей, 651-431-4660
Горячая линия по борьбе с мошенничеством для поставщиков медицинских услуг и выставления счетов
- метро Twin Cities, 651-431-2650
- Бесплатная линия, 800-657-3750
Горячая линия для получателей по борьбе с мошенничеством
- метро Twin Cities, 651-431-3968
- Бесплатная линия, 800-627-9977
G
Горячая линия по проблемам азартных игр в Миннесоте, 800-333-HOPE
Программа компульсивных азартных игр, 651-431-2245
Групповое жилищное строительство, см. Службы поддержки жилищного строительства
H
Право на получение медицинских услуг и доступ к ним, 651-431-2283
- Бесплатная линия, 888-938-3224
Система проверки права на получение медицинской помощи
- Только провайдеры, 651-431-4399
- Бесплатная линия, 800-657-3613
- только для членов, 651-431-2670
- Бесплатная линия, 800-657-3739
Отделение здравоохранения, 651-431-3100
- Бесплатная линия, 800-657-3963
Программы здравоохранения, 651-431-2478
- Медицинская помощь (Medicaid), 651-431-2670
- Бесплатная линия, 800-657-3739
- MinnesotaCare, 651-297-3862
- Бесплатная линия, 800-657-3672
- Окружные и племенные отделения Служба поддержки участников
- , 651-431-2670
- Бесплатная линия, 800-657-3739
- Омбудсмен по программам государственного управления, 651-431-2660
- Бесплатная линия, 800-657-3729
Телефонный центр поставщика услуг - , 651-431-2700
- Бесплатная линия, 800-366-5411
Регистрация провайдера - , 651-431-2700
- Бесплатная линия, 800-366-5411
- Факс, 651-282-5100
Горячая линия по борьбе с мошенничеством с поставщиками медицинских услуг
- метро Twin Cities, 651-431-2650
- Бесплатная линия, 800-657-3750
Консультация по страхованию здоровья, 800-333-2433
Исследования и качество здравоохранения, 651-431-2629
Закон о переносимости и подотчетности медицинского страхования (HIPAA), 651-431-2700
Программы по ВИЧ / СПИДу, 651-431-2414
- Горячая линия программы, 800-657-3761
Housing Resources Toolbox, 651-297-1216
Служба жилищной поддержки, 651-431-3941
Отдел кадров, 651-431-2990
- Бесплатная линия, 800-657-3509
я
Indian Policy, Office of, 651-431-2910
Услуги индивидуальной образовательной программы (IEP) и программы здравоохранения Миннесоты, 651-431-2622
Младенцы и дети с ограниченными возможностями, 651-431-2400
Справочная, 651-431-2000
Информационные технологии, 651-431-2110
Служба внутреннего аудита, 651-431-3623
Переводчики для глухих и слабослышащих — услуги ретранслятора, 800-627-3529
Генеральный инспектор, Управление, см. Управление Генерального инспектора
Дж
К
L
Законодательный аудит, 651-431-2281
Лицензирование, 651-431-6500
LinkVet, 888-LINKVET или 888-546-5838
Консультация по долгосрочному уходу
M
Management Services, 651-431-3501
Медицинская помощь (Medicaid), 651-431-2670
Психическое здоровье — взрослые, 651-431-2225
MinnesotaCare, 651-297-3862
- Бесплатная линия, 800-657-3672
- Факс, 651-431-7500
Миннесотский центр сообщений о жестоком обращении со взрослыми, 844-880-1574 (круглосуточно, без выходных)
Миннесотский совет по вопросам старения, 651-431-2500
Программа семейных инвестиций Миннесоты (MFIP), 651-431-4000
Программа планирования семьи Миннесоты, 651-431-3480
- Бесплатная линия, 888-702-9968
Программа продовольственной помощи Миннесоты (MFAP), 651-431-4049
MinnesotaHelp.Информация
Миннесота SeniorCare Plus, 651-431-2517
Minnesota Senior Health Options (MSHO), 651-431-2517
Миннесотская программа для сексуальных преступников (MSOP), 651-431-5800
Государственные общественные службы Миннесоты (MSOCS), 651-776-4117
Minnesota Supplemental Aid (MSA), 651-431-4049
N
Тарифы и правила медицинского учреждения, 651-431-2281
O
Управление экономических возможностей, 651-431-3808
Управление индийской политики, 651-431-2910
Офис генерального инспектора, 651-431-6630
- Бесплатная линия, 855-277-5407
Офис омбудсмена по долгосрочному уходу, 651-431-2555
- Бесплатная линия, 800-657-3591
Омбудсмен по программам государственного управления здравоохранением, 651-431-2660
- Бесплатная линия, 800-657-3729
п.
Родительские сборы, 651-431-3806
- Бесплатная линия, 800-657-3751
Измерение частоты ошибок при оплате (PERM), 651-431-4279
Измерение эффективности и повышение качества (см. Исследования и качество здравоохранения)
Аптека — Программы здравоохранения Миннесоты (MHCP), 651-431-2504
Программа предварительного обследования, 651-431-2579
Оценка программы и целостность (PAID), 651-431-3936
Апелляции провайдера, 651-431-2700
Регистрация провайдера, 651-431-2700
- Бесплатная линия, 800-366-5411
- Факс, 651-431-7462
Информационный центр поставщика медицинских услуг (программы здравоохранения), 651-431-2700
- Бесплатная линия, 800-366-5411
Горячая линия поставщиков медицинских услуг и мошенничества при выставлении счетов (медицинская помощь), 651-431-2650
Закупки и предоставление услуг (здравоохранение), 651-431-2478
Q
R
S
Служба безопасности в DHS, 651-431-3000
Senior LinkAge Line, 800-333-2433
Горячая линия по надзору и проверке целостности (SIRS), 651-431-2650
- Бесплатная линия, 800-657-3750
Информационная система социальных служб, 651-431-4800
SOS Central Pre-Admission, 651-431-5337
- Бесплатная линия для Большой Миннесоты: 866-966-BEDS (2337)
Special Needs BasicCare (SNBC), 651-431-2516
Специальная секция восстановления, 651-431-3204
Специальный транспорт
- Информационный центр поставщика услуг, 651-431-2700
- Бесплатная линия, 800-366-5411
- Служба поддержки участников MHCP, 651-431-2670
- Бесплатная линия, 800-657-3739
Группа государственной медицинской экспертизы, 651-431-2493
Служба государственной службы поддержки, 651-431-3676
Т
План помощи по телефону(TAP), позвоните в местную телефонную компанию, чтобы подать заявку
- Бесплатная линия, 800-657-3663
- Видеотелефон, 651-964-1514 VP
Лечебные центры, областные, 651-431-3676
U
Недобросовестное обращение, 651-431-3040
В
- Дисквалификация за мошенничество, 651-431-3999
Линия связи для ветеранов, 888-LINKVET, 888-546-5838
Виртуальное присутствие, 651-431-2070
Вт
Горячая линия по борьбе с мошенничеством в сфере социального обеспечения
- метро Twin Cities, 651-431-3968
- Бесплатная линия, 800-627-9977
Х
Y
Z
Существует ли омический контакт p-типа в интерфейсах WSe2 – металл?
Формирование металлических контактов с низким сопротивлением — самая большая проблема, которая маскирует присущие исключительным электронным свойствам двумерные устройства WSe 2 .Мы представляем первое сравнительное исследование межфазных свойств между монослоем / бислоем (ML / BL) WSe 2 и контактами Sc, Al, Ag, Au, Pd и Pt с использованием ab initio расчетов энергетических зон с включением эффектов спин-орбитальной связи (SOC) и моделирования квантового переноса. Межслоевое взаимодействие имеет тенденцию уменьшать высоту как электронного, так и дырочного барьера Шоттки (SBH) и изменяет полярность контакта WSe 2 –Au, в то время как SOC в основном уменьшает дырочный SBH.В отсутствие SOC контакт Pd имеет наименьшее отверстие SBH. В значительной степени контакт Pt превосходит контакт Pd и становится омическим или квазиомическим контактом p-типа с включением SOC. Следовательно, омический или квазиомический контакт p-типа существует в интерфейсах WSe 2 –металл. Наше исследование обеспечивает теоретическую основу для выбора подходящих металлических электродов в устройствах ML / BL WSe 2 .
У вас есть доступ к этой статье
Подождите, пока мы загрузим ваш контент… Что-то пошло не так. Попробуйте снова?Свяжитесь с нами
Позвоните в службу поддержки клиентов NWS по телефону 301-427-9855 или напишите по электронной почте [email protected]
Сертифицированные данные о прошлой погоде для юридических целей доступны в Национальном центре климатических данных NOAA (NCDC). Служба поддержки клиентов NCDC доступна с понедельника по пятницу с 8:00 до 18:00. Восточное время, кроме федеральных праздников. Чтобы связаться со службой поддержки клиентов NCDC по погодным и климатическим данным и продукции:
Телефон: 1-828-271-4800, затем нажмите «2»
Факс: 1-828-271-4876 Телетайп: 1-828-271-4010
Электронная почта: [email protected]
https://www.ncdc.noaa.gov
Предварительные и, следовательно, неофициальные данные о климате местности и прошедшей погоде доступны по адресу https://www.weather.gov/climate.
Ряд образовательных ресурсов для преподавателей и студентов доступен по адресу https://www.weather.gov/education.
СтраницаОбразовательных ресурсов NOAA о погоде и атмосфере предназначена для того, чтобы помочь студентам, учителям, библиотекарям и широкой общественности получить доступ ко многим образовательным мероприятиям, публикациям и буклетам NOAA.
Дополнительные образовательные ресурсы также доступны в Американском метеорологическом обществе.
Большинство профессий в Национальной метеорологической службе предназначены либо для людей, имеющих подготовку в области метеорологии, атмосферных наук, климатологии, гидрологии или смежных областях. Вакансии, доступные в NWS, размещаются на сайте USAJobs.
Для получения более подробной информации о карьере в метеорологии и рекомендуемых курсовых работ в колледже посетите Центр карьеры Американского метеорологического общества.
- Начните с получения прогноза для вашего региона. Для этого введите свой город и штат или почтовый индекс в поле «Местный прогноз по городу, региону ST или почтовому индексу» на сайте https://www.weather.gov.
- В местном прогнозе название и ссылка на обслуживающий офис расположены над значками прогнозов.
Посещение местного офиса прогнозирования NWS не только разрешено, но и приветствуется. Чтобы договориться о посещении, обратитесь к метеорологу по координации предупреждений (WCM) или ответственному метеорологу (MIC) офиса, который вы хотите посетить.
- Если у кого-то из вашей группы есть особые потребности, пожалуйста, свяжитесь с нами заранее, чтобы мы могли лучше их удовлетворить.
- Сумки, пакеты или кошельки не разрешается проносить в наше здание.
- Бывают случаи, когда невозможно организовать посещение; особенно во время суровых погодных явлений.
- Экскурсии могут быть отменены в короткие сроки Национальной метеорологической службой из-за суровой погоды. Если это произойдет, мы изменим расписание вместе с вами.
- Экскурсии будут отменены, когда Национальная система предупреждения о терроризме выдаст предупреждение о повышенной или неизбежной угрозе, указывающее на то, что доступ общественности к государственным объектам должен быть ограничен.Экскурсии не будут перенесены до тех пор, пока угроза не истечет или не будет изменена, чтобы снова разрешить публичный доступ
Всегда проверяйте время и дату прогнозов. Некоторые виды продукции не выпускаются круглый год, например прогнозы для рекреационных мероприятий и прибрежных районов Великих озер. Время и дата выдачи указаны в разделе «Подробности прогноза».
Возможно, вы случайно вызываете данные из кэш-памяти вашего ПК.Используйте функцию перезагрузки / обновления (или SHIFT-перезагрузка / обновление) вашего браузера и / или попробуйте перезагрузить компьютер. Вы также можете очистить кеш / историю своего браузера, но делайте это только в том случае, если вы полностью знакомы с последствиями.
Национальная метеорологическая служба в настоящее время не предлагает специального мобильного приложения. Для получения информации о погоде и предупреждениях для мобильных устройств посетите http://mobile.weather.gov или установите одно из множества приложений для своего устройства, созданных на основе данных Национальной службы погоды.
Skywarn — это программа Национальной метеорологической службы (NWS), состоящая из обученных добровольцев, следящих за суровой погодой. Споттеры Skywarn поддерживают свое местное сообщество и правительство, предоставляя NWS и их местным менеджерам по чрезвычайным ситуациям своевременные и точные отчеты о суровой погоде. Эти отчеты, в сочетании с современной технологией NWS, используются для информирования сообществ о надлежащих действиях, которые следует предпринять в случае угрозы суровой погоды.Более подробную информацию о программе Skywarn можно найти по адресу: https://www.skywarn.org/
.Вы можете найти местоположение и частоту ближайшего к вам погодного радиопередатчика NOAA, используя указатель, расположенный на http://www.nws.noaa.gov/nwr/nwrbro.htm.
Вы, скорее всего, слушаете голос, синтезированный компьютером.
Усиленные голоса обычно были лучше приняты публикой, чем первый компьютеризированный голос «Пол». Улучшена возможность точной настройки произношения слов и фраз вместе с элементами управления для регулировки громкости и скорости речи. Все это помогает сделать голоса более понятными, когда это действительно важно — в предупреждающих ситуациях.
Предпринимаются усилия как по расширению зоны покрытия сети погодного радио NOAA, так и по улучшению качества звука.Если вы слышите в трансляции слова, для которых необходимо отрегулировать произношение, отправьте свои комментарии в соответствующий прогнозный офис NWS, чтобы они могли попытаться улучшить произношение.
Наблюдение за сильной грозой обозначает территорию, где условия благоприятны для организованного приступа града диаметром 1 дюйм или более и / или ожидаются разрушительные грозовые ветры в течение периода от трех до восьми часов.
Tornado Watch включает аналогичные угрозы сильного града и разрушительного ветра, а также возможность возникновения множественных торнадо. Типичные часы покрывают площадь около 25 000 квадратных миль, или примерно половину площади Айовы.
Видео по теме: Что такое часы?
Часы означают, что условия благоприятны для суровой погоды в течение следующих 6-8 часов.Слежение за сильной грозой или слежение за торнадо выдается, когда в районе дежурства и рядом с ним возможны сильные грозы и торнадо. Это не значит, что они произойдут. Это только означает, что они возможны. Это дает возможность менеджерам по чрезвычайным ситуациям, средствам массовой информации и широкой общественности определить, где находится наибольшая зона для суровых погодных условий.
Вам не всегда нужны часы до появления предупреждения о сильной грозе или предупреждении о торнадо. Многие сильные грозы или торнадо воздействуют только на небольшую территорию в течение короткого периода времени, что делает часы непрактичными.Часы выдаются в первую очередь для районов, где возможна хорошо организованная или сильная суровая погода, или где ожидается, что суровая погодная угроза будет сохраняться в течение многих часов.
Предупреждение о сильной грозе или предупреждении о торнадо выдается, когда в зоне предупреждения возникают или неизбежны сильные грозы или торнадо.
Местные офисы прогнозов NWS должны расчистить или держать округа в пределах дежурства, и, когда позволяет время, уведомляется Центр прогнозирования штормов.Кроме того, только местные офисы NWS могут отменить часы.
Дерехо — исключительно долгоживущая, широко распространенная, сильная, конвективная ветровая волна. Хотя дерехо может вызвать разрушение, подобное разрушению торнадо, повреждение обычно происходит в одном направлении по относительно прямому пути. В результате, термин «прямолинейное ветровое повреждение» иногда используется для описания повреждений, вызванных дерехо.По определению, если полоса ветрового разрушения простирается более чем на 240 миль (около 400 километров), включает в себя порывы ветра со скоростью не менее 58 миль в час (93 км / ч) на большей части ее длины и несколько, хорошо разделенных 75 миль в час ( 121 км / ч) или более сильные порывы, то событие можно классифицировать как дерехо.
Дерехо, производящие штормовые системы, также могут содержать торнадо, но они состоят в основном из (и определяются) разрушительного неторнадического ветра. Иногда дерехо приводит к сотням сильных ветров, и отчеты о повреждениях распространяются по полосе, охватывающей несколько штатов, со смертельным исходом, травмами и многими миллионами долларов убытков.За дополнительной информацией и некоторыми историческими примерами обращайтесь к часто задаваемым вопросам derecho в Центре прогнозирования штормов.
Прогноз ультрафиолетового индекса можно найти на http://www.nws.noaa.gov/view/national.php?prodtype=ultraviolet
Дополнительную информацию об УФ-индексе можно получить в Агентстве по охране окружающей среды (EPA).
Морские прогнозы можно получить из Weather.gov так же, как и прогнозы погоды на суше. Для этого введите желаемую широту и долготу в поле Местный прогноз по городу, региональному региону или почтовому индексу на сайте https://www.weather.gov.
Морские прогнозы также можно получить, выбрав морской район на национальной карте на главной странице Weather.gov.
Если вам интересно, вы можете заполнить наш веб-сайт опрос об удовлетворенности клиентов.
Свяжитесь с нами | Мерримак Колледж
Поиск по отделу
AllAcademic Affairs / ProvostAcademic Success CentreОтдел бухгалтерского учета и финансовПлатежные счетаАдминистрацияПриемная комиссияАтлетический отделКнижный магазинКнижный магазинКабинетный кабинетКампус LifeCampus Ministry Школа ОбразованияДекан Студенческого УправленияРазработка и отношения с выпускникамиРазнообразное образованиеОтдел экономикиОбразованиеОтдел электрооборудования и компьютерной инженерииАнглийский департаментУправление зачислениемУслугиСенат факультетаОфис по финансовой помощиФискальные вопросыГенеральный советникОтдел глобального образованияПрием в аспирантуруОтдел послевузовского образованияДепартамент здравоохранения Департамента здравоохраненияФорма здравоохранения Ion Technology ServicesИнституциональные исследования и планированиеМеждународная студенческая группаПоддержка иностранных студентовИудейские / христианские / мусульманские отношения, Центр по обучениюJumpstartMACK Card OfficeMACK Print CentreОтдел управленияМаркетинговый департаментМатематический отделБиблиотека McQuadeМеханический инженерный отделМиссионерские и студенческие вопросыОфис по вопросам политики и развития карьерыПолитика по вопросам заработной платы и Департамент политософииОтдел по политологии Управление рискамиПрофессиональное обучение и непрерывное обучение, Отдел психологии, Офис регистратора, Религиозные и теологические исследования, Офис Жизни, Центр искусств Роджерса, Кампусный центр Саковича, Департамент социологии, Sodexo, Спортивная медицина, Учебный центр Службы Стивенса, Вовлечение студентов, Телекоммуникации, Репетиторство и Математика, Центр изучения гендерных вопросов, Центр прикладного обучения и математики, Центр визуальных и математических исследований 9
| Имя | Телефон Эл. Почта | Должность Департамент Офис и здание | |||
|---|---|---|---|---|---|
| Abbott, Sarah | abbotts | Помощник лектора Бухгалтерский учет и финансы Crowe Hall ms | 978-837-5422 abramsl | Старший бухгалтер Фискальные вопросы Комната 309, Остин Холл | |
| Абрего Санчес, Карлос | 978-837-5144 | , офис , офис | |||
| Abreu, Amanda | 978-837-5112 abreua | Консультант по временной финансовой помощи Офис финансовой помощи Room 15B, Austin Hall | |||
| Abreu, Katty 9000 Kitchen7 | Кампус-центр Саковича | ||||
| Ackerson, Samantha | 978-837-5555 ac kersons | Сержант Полицейское управление Комната BMT, Моникан Центр | |||
| Адамс, Джон | 978-837-5363 adamsj | Доцент Электротехнический и компьютерный отдел Зал Зал | |||
| Адамс, Сюзанна | 978-837-5373 Адамссу | Помощник вице-президента по коммуникациям Коммуникации Комната 106, Остин Холл | |||
| Адкинс-Шариф, Джамел | 6 | Философский факультет||||
| Агара, Рэйчел | agharar | Адъюнкт-лектор Департамент медицинских наук О’Рейли Холл | |||
| Агирре, Мирный завод | 6 | ||||
| Ahn, Taesoo | 978-837-3574 ahnt | Доцент Департамент менеджмента Кабинет 320, Crowe Hall | |||
| Aiello, Brittnie | 978-837-3520 aiellob | ||||
| Akin Olcum, Gokce | 978-837-5437 olcumg | Адъюнкт-лектор Экономический факультет Комната 103A, Cushing Hall | |||
| Albehacy Сотрудник полиции по вызову Отделение полиции Центр Моникан | |||||
| Alberti, Traci | 978-837-5221 albertit | Заведующий отделением медсестер и младший декан отдела медицинских наук Отделение медицинских наук Кабинет 210 медсестер | |||
| Альберто, Джеймс | 978-837-5864 Альбертой | Старший советник по приему Приемная комиссия Room 202, 510 Turnpike Street | |||
| Alcox, Amanda | 978-837-5494 alcoxa | New Teacher Support Specialist Education Department Room 204 | Hall Aldrich, Rachael | 978-837-5175 aldrichr | Исполнительный помощник Участие студентов Комната 310, кампусный центр Sakowich |
| Alexander, Cassandra | alexanderc ‘Reilly Hall | ||||
| Alizada, Khatera | 978-837-3450 alizadak | Адъюнкт-лектор Департамент политологии и общественной политики Комната 17A, Cushing Hall | |||
| Allen, | Allen 837-5370 Помощник по административным вопросам Psycho logy Department Room 108, O’Reilly Hall | ||||
| Allen, Michael | 978-837-5099 allenm | Помощник тренера по мужскому футболу Атлетический отдел Room VOL, Volpe Complex | |||
| Allen, | Мишель | allenmi | Адъюнкт-лектор Data Science & Analytics O’Reilly Hall | ||
| Allman, Mark | 978-837-3508 allmanm | Вице-проректор, бакалавриат. |