Приложение узнать гостей в вк: Как посмотреть гостей В Контакте

В отличие от социальной платформы Одноклассники, в соцсети Вконтакте невозможно посмотреть, кто заходил на вашу страницу – так было задумано изначально. Но если в этом есть особая необходимость, то установленные администрацией правила можно обойти. Эти методы не связаны с чем-то противозаконным, при этом не требуется закачивать на свой ПК сторонние, вызывающие подозрения приложения. Очень часто пользователи задаются вопросом, как посмотреть, кто заходил на мою страницу Вконтакте. Что же, рассмотрим его подробно.

Причин того, что человек хочет узнать, какие гости посещают его профиль, достаточно. Многие занимаются предпринимательством и им важно быть в курсе, кто интересуется их страницей. Ведь таким образом, можно предложить участникам сети свой товар, услуги. Может статься, что в числе посетителей есть будущий потенциальный клиент или даже партнёр. В конце концов это может быть просто симпатичная женщина, и тогда с ней можно будет наладить связь.

Есть несколько способов, как посмотреть, кто заходил:

Так постепенно есть возможность выяснить полный список гостей. Способ этот опробован не единожды, и с помощью него многим удалось получить нужную информацию.

Второй способ предусматривает специальное приложение «Следопыт» . Нужно зайти в программу, получить закодированную комбинацию в виде адреса, а затем расположить её на своей странице. Обычно такую ссылку оставляют в разделе своей информации. Через некоторое время тот, кто заинтересован, обязательно кликнет по адресу, а пользователь получит сообщение об этом действии. По сути, так незнакомцы и раскрываются.

Третий способ . Есть ещё одна полезная программа «Мои поклонники и гости» , с ним и следует работать, когда нужны сведения о тайных посетителях. При открытии приложения можно увидеть три основных раздела, такие как «Поклонники», «Статистика», «Гости ВК». Последовательно пройдя по ним всем, несложно выяснить, кто вами интересуется.

Четвертый способ. «Гости и друзья» – это название хорошо известного многим софта. Плюсами программы является то, что она выявляет всех, кто когда-либо ставил вам лайки или делал перепост записей. Недостаток состоит в том, что если гость никак себя не проявил в вашем профиле, то и следов его отыскать не удастся.

Если сравнивать все имеющиеся методы, конечно, лучше воспользоваться приложениями, которые имеют больше инструментов для того, чтобы отследить данную информацию. Особенно удобно, что выявляются все проделанные гостями действия – комментарии, сердечки, перепосты. С помощью так называемого удаления таких результатов не добиться, в лучшем случае удастся выявить двух или трёх незнакомцев. В принципе, многие считают, что всегда полезно посмотреть, кто заходил на мою страницу Вконтакте, а уж цели человека можно выяснить позже.

Другие способы

Интересуясь, видно ли Вконтакте, кто заходил, многие используют анализ пабликов и страницы групп. Статистические данные по возрасту, месту проживания, полу могут подсказать, кто из участников сети посещал ваш профиль. Однако этот метод не даст конкретных фамилий и имён.

Что для этого надо? В своём сообществе придётся нажать на настройки в виде трёх точек в правой части, выбрать «Статистику». Благодаря этому откроются разделы сообщений, посещений, охвата и активности. Логическим методом можно вывести, какие люди посещают ваш ресурс.

Также можно отслеживать визиты посетителей с помощью страниц своих друзей. Зайдя на их личный сайт достаточно заглянуть в раздел «Мои друзья». Там участники расположены в убывающем порядке по количеству посещений. В верхней части расположены наиболее популярные профили. Но этот вариант возможен лишь при условии, если вы имеете доступ к аккаунту друга.

Видео о том, как узнать, кто заходил на вашу страницу Вконтакте:

Как не попасть на мошенников

Получается, что самым удобным способом является несколько программ, но, конечно же, только официальных. Несмотря на это в интернете огромное количество других софтов, которые якобы способны сделать анализ посещений профиля с полной информацией по гостям – знакомым и незнакомым.

Доверять таким предложениям не стоит, тем более что эти приложения платные. Заплатив деньги, а иногда и немалые, пользователь рискует купить «кота в мешке». Это просто очередной развод доверчивых участников, хорошо ещё, если программа просто не будет работать.

Может быть и по-другому – программа бесплатная, а схема чрезвычайно проста – на таком ресурсе предлагается загрузить архив, а при его распаковке нужно отправить смс, чтобы узнать секретный код для допуска. В результате со счёта сразу или в течение нескольких дней списывается круглая сумма.

Гораздо хуже, если это похищение личной информации или в приложении содержится опасный вирус, из-за которого потом придётся полностью чистить или даже переустанавливать операционную систему. Не стоит вестись на разные заманчивые предложения, если даже под ними стоит немало лестных комментариев. Скорее всего, они написаны одним человеком, преследующим свои цели. Примером таких софтов является приложение»my guests», но есть и другие опасные программы, предлагаемые мошенниками.

Если очень надо посмотреть, кто заходил на мою страницу Вконтакте, лучше загружать любые файлы лишь с официальных ресурсов или воспользоваться перечисленными способами, которые могут быть довольно эффективны, и, к тому же, безопасны. Лучше довериться обычной статистике, чем ввязываться в рискованные предприятия.

Изначально довольно важно сделать оговорку на то, что процесс просмотра хроники переходов по ВКонтакте напрямую связан с базовым функционалом используемого интернет-обозревателя. По ходу статьи мы затронем исключительно популярные браузеры, так как именно ими пользуется подавляющее большинство людей.

Обратите внимание на то, что в рамках статьи мы коснемся также еще одной темы связанной, со специальным функционалом «Истории ВКонтакте» .

Просмотр посещений VK в Google Chrome

Вдобавок к сказанному, обратите внимание, что если вы авторизованы через аккаунты Гугл и у вас активирована синхронизация, то копия хроники посещений будет автоматически сохраняться на серверах. При этом не забывайте о том, что данные в разделе могут быть удалены.

Просмотр посещений VK в Opera

В случае интернет-обозревателя процесс просмотра хроники активности происходит несколько иным методом, но по тому же принципу, что и в Хроме. Кроме того, данные в Опере также без проблем синхронизируются с серверами.

На этом можно завершить процесс просмотра последних действий на сайте ВКонтакте с использованием браузера Опера.

Просмотр посещений VK в Яндекс.Браузере

Если по каким-либо причинам вам потребуется очистить всю хронику обозревателя, воспользуйтесь соответствующей статьей.

Просмотр посещений VK в Mozilla Firefox

На этом с поиском хроники в интернет-обозревателях можно закончить.

Просмотр «Историй друзей»

Рассматриваемая часть функционала ВКонтакте является сравнительно новой, будучи введенной администрацией лишь в 2016 году. Предназначен это материал для запечатления каких-либо моментов с последующей публикацией в специальном блоке на сайте. Еще не все пользователи сайта знают, как посмотреть «Истории» ВК, поэтому в этой статье мы рассмотрим этот процесс подробнее.

«Истории друзей» в полной версии сайта

Данная возможность доступна для использования исключительно пользователям мобильного приложения за исключением процесса просмотра.

«Историй» может быть сразу несколько, идущих в хронологическом порядке в одном и том же разделе.

Как видно, поиск и просмотр нужного материал не может вызвать осложнений.

«Истории друзей» в мобильном приложении

В официальном приложении ВКонтакте пользователям предоставляется дополнительная возможность создавать новые «Истории» . При этом контент, размещенный другими людьми, также доступен для просмотра в специально отведенных местах сайта.

Учтите, что рассматриваемый материал находится в соответствующем блоке только первые 24 часа с момента публикации, после чего автоматически удаляется.

Надеемся, у вас не возникло трудностей с процессом просмотра «Историй друзей» .

Завершая данную статью, нельзя не упомянуть о том, что администрация ВКонтакте в числе стандартных возможностей предоставляет владельцу аккаунта такой функционал, как «Активные сеансы» . Более подробно мы рассматривали эту часть интерфейса в специальной статье.

Как посмотреть гостей В Контакте

Почти все пользователи Вконтакте тайно или явно желают узнать Как посмотреть гостей В Контакте. Перспектива заманчивая – сразу же можно узнать кто был на вашей странице и представить что этот человек хотел. Стоит отметить, что в других социальных сетях легко можно узнать кто заходил в гости помимо друзей, а вот посмотреть гостей Вконтакте почему-то нельзя.

Если вы заинтересовались тем, что происходит на вашей страничке, тогда вам наверняка не всё равно что на ней происходит. Многие люди ищут в сети информацию о том, как накрутить подписчиков в контакте. Тенденция эта вполне объяснима – имея немало подписчиков можно заработать большие деньги Вконтакте за счёт популярности и хорошей поисковой выдачи. К сожалению, на гостей вк ориентироваться нельзя, ведь узнать откуда эти люди и когда они заходили – невозможно.

Официальных сервисов для просмотра гостей Вконтакте не существует. Тем не менее, многие утверждают, что таковые есть. Попробуем разобраться – что же делать, если вам очень хочется узнать кто заходит на вашу страницу.

Проверенным и одобренным пользователями способом является установка приложения Вконтакте «Мои Гости и Поклонники».

1. Перейдите по следующей ссылке Мои Гости и Поклонники и запустите приложение:

2. Изучите открывшуюся вкладку «Мои Гости». Там вы увидите зашедших пользователей Вконтакте:

Помните, что данное приложение не является чем-то специфическим. Оно лишь облегчает жизнь популярным пользователям. Поясним – в группу «гости» попадают лишь те пользователи, которые ставят лайки или пишут комментарии. Те же из них, которые просто читают ваши записи нигде не отображаются.

Конечно же, есть интересная вещь, такая как просмотр статистики вашей страницы. Однако у вас их должно быть не меньше сотни и к тому же статистика не даст личных данных пользователей, что в данном случае делает её довольно скучной. Лучше уж всё-такие узнать как посмотреть гостей Вконтакте.

Ловушка гостей В Контакте

Занятным ответом на вопрос как посмотреть гостей В Контакте является установка ловушки для гостей, а вернее – полученная ей информация.

1. Запустите установленное приложение, о котором говорилось выше, вы зайдёте сразу во вкладку с гостями. Нужно перейти на главную страничку:

2. Вам следует перейти по ссылки в меню, носящей название «Хочешь ещё больше гостей?» и выбрать куда поместить ссылку на ловушку:

3. Нажмите на ссылку понравившегося вам способа. Они разные, но рекомендуется разместить ссылку на ловушку в разделе с адресом вашего сайта. Можно разместить и на стене, сделав заголовок ссылки интересным для пользователей.

4. Заходите иногда посмотреть что за люди перешли по вашей ссылке. Их найти можно будет во вкладке «Гости».

Приложение ловушка В Контакте

Ещё одной интересной вещью является приложение «Ловушка гостей». Она, конечно, не позволит читать чужие сообщения В Контакте и гостей отображает отнюдь не всех, но работать с ней интересно.

1. Найдите данное приложение Вконтакте и установив его, запустите. Отличить его от прочих можно по самому высокому рейтингу:

2. Вы увидите специальное окошко, которое оповестит вас о том, что приложение будет работать с вашими данными. Нажмите на кнопку «Разрешить».

3. Зайдите во вкладку «настройки» и скопируйте выданную приложением ссылку:

4. Разместите ссылку на видном месте своей странички. После останется лишь проверять список зашедших к вам людей во вкладке «Пойманные гости»:

Попавшийся пользователь увидит уведомление:

Программа для просмотра гостей Вконтакте

Следует помнить, что программ для просмотра гостей от сторонних разработчиков нет. Есть программы, которые будут рассылать спам вконтакте и, возможно, помогут взломать страницу Вконтакте какому-то ленивому хакеру, но гостей для вас они искать не будут.

Как узнать чьи страницы вконтакте посещал человек. Как узнать, кто заходил на мою страницу вконтакте

Если вы являетесь пользователем социальной сети вконтакте, у вас может возникнуть желание узнать, кто посещает вашу персональную страничку. Это поможет понять, кто проявляет к вам интерес, часто комментирует (см. ), ставит лайки (см. ) и проявляет активность (см. ).

Как можно посмотреть, кто заходил на мою страничку вконтакте ? Очень просто — сейчас я покажу вам два способа.

Для чего это нужно?

Как я уже отметил — основная цель, выявить пользователей, которые проявляют активность и интерес к вашей страничке. А вот дальше варианты могут быть следующие.

Можно выйти на связь с человеком (см. ), пообщаться, добавить его в друзья (см. ) и тд. Почему бы и нет. Тем более если это красивая девушка.

Другой вариант — если вы, допустим, используйте ВК в продвижении своего бизнеса или товара. Проявившим интерес людям, вы можете предложить свои услуги (см. ).

В любом случае, неплохо будет посмотреть, кого же мы заинтересовали.

Удаляем страницу, и видим, кто к нам заходил

Это будет первый способ. Он довольно оригинальный. Суть заключается в следующем.

При попытке удалить свою страницу (см. ), вас попросят указать причину, и выдаст список пользователей, которые будет сильно расстроены, что больше не смогут общаться с вами. В этом списке и будут те, кто чаще всего заходит к вам.

Давайте попробуем посмотреть, как это работает, на примере моего аккаунта.

Идем в меню «Мои настройки» .

Обратите внимание. Внешний вид обновлен — теперь доступ к настройкам находится в меню, в правом верхнем углу страницы.

Прокручиваем страницу в самый низ. Здесь нам нужно найти ссылку «Удалить свою страницу» . Нажимаем ее.

У вас откроется окно, где необходимо указать причину удаления. Сейчас внимание — вам обязательно нужно выбрать пункт «Мою страницу не комментируют» . Чуть ниже в окне автоматически сформируется следующий текст «Меня окружает стена невнимания…» . И дальше будут указаны имена двух пользователей, которые чаще всего заходят к вам на страницу.

А теперь давайте посмотрим второй способ.

Посмотреть кто заходил на мою страницу вконтакте, с помощью приложения

Этот способ тоже очень простой. Мы запустим приложение, и оно сформирует нам список самых активных наших посетителей. Кстати, я уже делал обзор нескольких подобных приложений. Можете посмотреть:

Но вернемся к нашей теме. Идем в раздел «Приложения» , и в поиске набираем «гости» .

Стоит отметить, что принцип работы каждого из них схож — они собирают статистику по вашим гостям. Поэтому выбирать среди найденных приложений, я буду методом тыка.

И в работе мы проверить «Я шпион, мои гости» .

Щелкаем по его иконке. Откроется окно с описанием. Здесь нажимаем кнопку «Запустить приложение» .

После этого откроется список пользователей, которые заходили к нам за последнее время. Вы сможете посмотреть их, и перейти к ним на страницу.

Вот в принципе и все. Способ довольно простой. С помощью аналогичных приложений, вы всегда сможете увидеть, кто заходил к вам в гости.

Обновление: новый способ поиска гостей, с помощью социальной сети Одноклассники

Смысл такой. В отличии от Контакта, в Одноклассниках механизм поиска гостей реализован. Достаточно зайти на соответствующую вкладку, и вы сразу увидите всех посетителей своей страницы. Но зачем нам гости в одноклассниках, спросите вы? Особо не зачем. Но если бы мы смогли перенаправить нашего тайного посетителя из ВК туда, то смогли бы его опознать. В этом и заключается способ — мы публикуем ссылку на свой профиль в ОД, и ждем, пока по ней перейдут.

Но есть условие — у нас, и у нашего гостя, должны быть страницы в одноклассниках. Иначе, как мы его увидим?

Теперь возвращаемся на нашу страницу Вконтакте, и публикуем эту ссылку в записи на стене.

Для этого в поле создания поста вставляем ссылку (см. ). Можете выбрать и загрузить красочную фотографию, и добавить мотивированное название. Чтобы гости, с большей вероятностью, перешли по ссылке. Для редактирования используйте соответствующие кнопки. Для публикации жмем «Отправить» .

Не забудьте , чтобы она оставалась наверху списка.

В социальной сети «ВКонтакте» зарегистрированы миллионы пользователей, существует огромное количество групп, встреч, приложений, на странички которых мы заходим со своего аккаунта. Совершенно логично, что всем стало интересно узнать, кто часто посещает его страницу в контакте, и какие самые посещаемые страницы в контакте есть у него. Все это можно узнать, причем довольно легко!

Кто посещает мою страницу

Отдельной функции гостей в контакте не существует. Знать, кто посещал мою страницу в контакте, приятно. Но совсем не хочется, чтобы другие пользователи видели, как часто Вы заходите к ним.

Можно посмотреть, кто больше и чаще всего заходит на вашу страницу из числа друзей и гостей, с помощью приложения «Мои гости и Поклонники». Посмотреть гостей с помощью этого приложения можно через графу «Мои гости». Однако в ней отразятся только те гости, которые оставили свой «след» на Вашей странице: поставили лайк, прокомментировали запись и т.д. Те же, кто заходил на вашу страницу в контакте просто для просмотра вашего профиля, не отобразятся в данном списке. Если хотите поймать побольше гостей, можно установить ловушку на свою страницу в контакте или на свой личный сайт. Для этого необходимо скопировать ссылку на приложение и вставить ее в удобное место на своей странице или на другом сайте. Любопытные обязательно посмотрят, а следовательно, попадут в список гостей в этом приложении. Предупреждаем, что в последнее время в приложении могут возникать неполадки относительно всего того, что касается гостей. Поэтому получить точную информацию о них удастся не всегда.

Гораздо проще и интереснее просматривать через это приложение своих поклонников и поклонниц. Что это такое? Из числа имеющихся у Вас друзей строится пирамида наиболее заинтересованных Вами в контакте и Вашей страницей. Самые активные будут находиться на трех первых местах, менее активные — в низу пирамиды. С помощью приложения Вы можете отдельно посмотреть как поклонников, так и поклонниц за 1 месяц, 3 месяца или за все время. Также можно посмотреть поклонников и поклонниц вместе по тем же временным меткам.

Приложение «Друзья. Все Ваши ГОСТИ!» действует по сходному принципу. С помощью него Вы узнаете все необходимое и уже не будете спрашивать: «Кто посещал мою страницу в контакте?». Чтобы поймать гостей, также необходимо разместить ссылку-ловушку у себя на странице. С помощью этого приложения Вы сможете проследить, кто наиболее общителен с Вами через функцию «Поклонники». Правда, в этом приложении нельзя разделить друзей и отдельно посмотреть поклонников и поклонниц.

Часто посещаемые страницы в контакте

Если Вам хочется узнать, какие страницы в контакте Вы чаще всего посещаете, то можно просто внимательно изучить, как строится Ваша страница. Например, теперь Ваши друзья выставлены в очередности от самых активных (тех, с кем Вы чаще контактируете, и тех, кто с вами чаще контактирует) до самых неактивных. Таким образом, страницы тех друзей, которые находятся в начале, Вы посещаете чаще всего, и больше всего общаетесь именно с этими людьми. Если это не так, то Вы чаще всего просматриваете материалы, ссылки, заметки и т. д. именно этих людей.

Вы можете открыть свой список групп. Те группы, которые будут выше в списке, Вы посещаете чаще остальных. Также чем больше участников у группы, тем она более популярна и посещаема.

Через вкладку «Приложения» Вы сможете увидеть самые популярные приложения среди участников сайта «ВКонтакте».

Список посещаемых страниц в контакте

В последнее время на сайте появилась новая функция «Список посещаемых страниц». Это очень удобно для тех, у кого много друзей, пабликов и групп, но чаще необходимы лишь немногие из них. Этот список позволяет в небольшом окошке показать те страницы, которые Вы посещаете чаще всего или в которых наиболее нуждаетесь. Для этого необходимо переместить курсор в поле «Поиск» в верхней части сайта. Вы увидите выпадающий список друзей, в начале которого будут те, кто наиболее интересен для Вас. Начиная вводить название группы, паблика или определенного человека, Вы автоматически будете получать наиболее подходящие для Вас результаты. Список очень удобен в применении, а научиться им пользоваться не составляет особого труда.

Дорогие читатели, всех приветствую! В этой статье будет описано, как увидеть, кто заходил на мою страницу вконтакте. В настоящее время социальные сети набирают всё больше пик популярности. Кто-то пользуется Одноклассниками, кто-то Вконтакте. Но, тем не менее, во всех соцсетях можно общаться.

Если в «Одноклассниках» имеется функция просмотра гостей, то «Вконтакте» этой функций нет. Руководство портала заявило, что такой функции никогда не было и не будет. Однако есть пару способов обойти это ограничение и узнать, кто посещал вашу страничку. Я раскрою вам секреты!

Кто заходил на мою страницу вконтакте — 4 способа

Этот способ является самым эффективным и надежным. Однако необходимо знать, что можно увидеть только тех пользователей, которые заходят часто на вашу страничку. В списке не отображаются пользователи, которые изредка посещают вашу страничку.

Зайдите к себе на страничку и отыщите раздел «Мои настройки», расположенный в левой стороне экрана, затем — «Удалить страницу». Спуститесь в самый низ, до пункта «Мою страницу не комментируют». Далее высветится перечень пользователей, которые посещают вашу страничку больше всех.

Есть приложение Следопыт , в котором вы сможете получить код в виде ссылки. Эту ссылку нужно вставить в любое место своей страницы. Например, в строку «веб-сайта». Теперь остается лишь дождаться, пока кто-нибудь не нажмет на эту ссылку.

Социальная сеть «Вконтакте» — одна из наиболее популярных в России. По статистике, ежедневно её посещают более 80 миллионов человек, а общая аудитория составляет сотни миллионов пользователей. При всём многообразии возможностей, «Вконтакте» не позволяет отслеживать гостей пользовательской страницы, что вынуждает пользователей искать альтернативные пути получения подобной статистики. В этом материале я расскажу, как узнать кто заходил на мою страницу Вконтакте, какие методы и инструменты для этого существуют, и как ими воспользоваться.

Итак, если вас интересует, кто заходит к вам на страницу Вконтакте, то, прежде всего, прошу учесть, что декларируемая невозможность отслеживания гостей – это официальная политика администрации «Вконтакте». Что я понял из общения из :

Учитывая вышеперечисленное, отследить посещение гостей Вконтакте с помощью возможностей самой страницы невозможно из-за отсутствия соответствующих средств. Тем не менее, имеются инструменты, позволяющие тем или иным способом обойти данный недостаток и отследить посетителей вашего профиля. Также полезным для пользователей социальной сети будет краткая инструкция — .

Лучшие способы узнать, кто заходил на мою страницу Вконтакте

Способ 1. Мнимое удаление страницы позволит посмотреть гостей вашего профиля

Первый из способов покажет вам несколько наиболее активных посетителей вашей страницы. Он считается одним из самых проверенных, при этом его возможности довольно скромны – вы не увидите ни частоты посещений, ни всех ваших гостей. Всё, что вам будет доступно – это имена и фамилии несколько человек, наиболее активно посещающих вашу страничку в «VK».

1. Чтобы воспользоваться этим способом перейдите в настройки вашей страницы «Вконтакте»;
2. Выберите раздел «Общее», и прокрутите страничку в самый низ;
3. Найдите там опцию «Вы можете удалить свою страницу и кликните на неё» (бояться не стоит, из-за данного клика она удалена не будет).

Возникнет окно, в котором система спросит вас о причинах удаления страницы. Поставьте галочку рядом с опцией «Мою страницу не комментируют» и вы увидите имена и фамилии двух человек, которые посещают вашу страницу наиболее часто.

Теперь нажмите на «Отмена» и вернитесь в «Настройки». Вновь кликните на «Удалить страницу» и снова нажмите на «Мою страницу не комментируют». Вы получите имена ещё двух людей. Повторив этот способ несколько раз, вы получите имена и фамилии людей, кто заходил на страницу вконтакте (вашу) наиболее часто.

Способ 2. Список друзей вашего друга даст понять, кто и когда заходил

Второй способ узнать о гостях Вконтакте – это зайти в список друзей вашего друга с его аккаунта. Таким образом можно отследить, насколько часто он посещает вашу страницу по сравнению со страницами других людей, и насколько активно ваш друг интересуется вашей страничкой на VK (наиболее регулярно посещаемые страницы будут отображаться сверху вниз).

Недостатком этого способа является то, что большинство ваших друзей вряд ли захотят просто так предоставить вам доступ к своему аккаунту в VK. Но как одну из альтернатив отслеживания тех, кто заходил на мою страницу Вконтакте, этот способ учитывать стоит.

Способ 3. Приложения Вконтакте

Существуют несколько популярных приложений, позволяющих отследить гостей в контакте (или, по крайней мере, декларирующих это). Наиболее популярные – это «Мои Поклонники и Гости», «Мои Гости» и другие, подобные им, цифровые продукты. Достаточно зайти в «Приложения» вашей страницы, вбить в строке поиска «Мои гости» (или набрать эти названия в общей строке поиска VK на вашей странице), как данные приложения будут найдены, вы сможете установить их, запустить, а затем и отследить людей, бывавших на протяжении последних дней или месяцев (а то и лет) на вашей странице.

При всей лёгкости получения и просмотра подобной статистики её валидность довольно сомнительна. В большинстве случаев подобные сервисы отслеживают не людей, посетивших вашу страницу, а людей, поставивших вашим материалам лайки. В случае же, когда человек просто молча зашёл на вашу страничку, прочёл ваши посты и посмотрел фото (без лайков), в статистике подобных программ он (в большинстве случаев) отображаться не будет.

Способ 4. Публикуем ссылку-ловушку в ВК

Ещё одним способом позволяющим дать ответ на вопрос о том, как отследить гостей моей страницы вконтакте, является демонстрация псевдо ссылки на ваш (якобы) личный сайт в данных вашей страницы. Наиболее любопытные из гостей кликают на данную ссылку, и, при переходе на неё, сразу же фиксируются каким-либо приложением «Вконтакте» (вроде ранее популярного «

Как узнать, кто был в гостях. Как узнать, кто заходил на мою страницу ВКонтакте? (гости в ВК)

Ездить в гости, встречать друзей и знакомых дома — давняя традиция. В обоих случаях мы надеемся получить от общения положительные эмоции. Но бывает, что после следующего такого визита остается не очень приятное «послевкусие». Может все дело в том, что мы просто не умеем вести себя на вечеринке?

Строгое соблюдение правил этикета было привито нашим предкам с раннего детства и было практически «в крови».Нужны ли все эти обряды современному человеку? Или все же умение правильно себя вести — залог достойной репутации и хороших отношений вне времени?

Каждый раз имеет свой этикет

Конечно, примитивные обряды в наше время неуместны, но даже сейчас, собираясь в гости, необходимо знать правила этикета. Особенно, если вы едете не к близким родственникам или друзьям, а к незнакомым людям. Естественно, вы хотите произвести на них хорошее впечатление, а не попасть в неловкую ситуацию в чужом доме.Чтобы чувствовать себя увереннее, нужно уметь вести себя на вечеринке. Не помешает иметь представление о том, как принимать гостей самостоятельно.

Но, к сожалению, в наше время не принято уделять много внимания этикету, да и не каждый современный человек знаком с существующими правилами. Мы постараемся восполнить этот пробел.

Как пригласить?

Прежде всего, нужно знать, что принято приглашать людей в гости не позднее, чем за неделю до приема.Это не просто требование этикета: у ваших потенциальных гостей могут быть другие планы, которые им придется скорректировать, чтобы положительно откликнуться на приглашение. В скором времени они не успеют это сделать.

Если вы пригласили человека, который не сочувствует или находится в конфликте с другим вашим другом или родственником, то ему в этот раз звонить не следует.

Неэтично приглашать гостя в присутствии другого друга, которого вы не планируете звать в гости.

Собираетесь ли вы пригласить людей, с которыми ничего не знаете об отношениях? Тогда стоит проинформировать каждого из них о другом. Таким образом, ситуация «разрешится» сама собой. Лучше пригласить на одного гостя меньше, чем настроение всех остальных.

Гости уже на пороге. Как вести себя с хозяевами?

Не забывайте, что именно владелец несет ответственность за то, чтобы каждому гостю было комфортно у себя дома. Поэтому разговор должен быть направлен так, чтобы темы разговора были близки и понятны каждому из гостей, чтобы каждый мог принять в нем участие, высказать собственное мнение.Но заставлять поддерживать разговор помимо воли приглашенного тоже не стоит.

Если хозяин вдруг замечает, что между гостями назревает опасность спора, нужно тактично перевести разговор в другое русло. Как это сделать, подскажет интуиция. Возможно, поможет своевременная шутка или отвлекающее замечание.

Хозяева-супруги у гостей должны вести себя друг с другом ровно, избегая ни споров, ни излишней демонстрации любви.

Без приглашения в гости — нет, нет!

Люди с хорошими манерами ходят только по приглашениям.Не стоит буквально понимать слова о том, что вам всегда рады, и что вы всегда желанный гость. И даже если они действительно искренни, невежливо «ввалиться» в дом, предварительно не согласовав этот визит с хозяевами. И только в отношении самых близких друзей и родственников иногда можно сделать исключение. Но даже их лучше заранее предупредить о грядущей радости встречи.

Если вас пригласили в гости, вы не можете брать с собой друзей, знакомых или детей, не уведомив заранее хозяев.

Собираясь в гости, образованные люди оставляют своих четвероногих питомцев дома. Хозяева также должны следить за тем, чтобы их домашние животные не беспокоили гостей.

Что взять с собой в гости?

Когда гостей приглашают на день рождения, свадьбу, новоселье или другую знаменательную дату, они обязательно купят подарок виновнику торжества. А если встреча не связана ни с одной датой, не приходите ли с пустыми руками? Что лучше привезти? Вы точно не ошибетесь, если подарите хозяйке дома цветы.Уместно принести торт, сладости или другие сладости. Если в доме есть маленькие дети, вы можете принести им небольшую игрушку.

А главное — хорошее настроение берите с собой. Ведь самое главное в посещении — это не обильное угощение, а интересная оживленная беседа, дружба и человеческое тепло.

Как вести себя на вечеринке? Правила этикета

Нужно приходить вовремя. Если вы приедете раньше положенного срока, хозяйка может быть еще не готова, либо она не успеет привести себя в порядок, чтобы принять гостей.Вы опоздаете — приготовленные блюда могут остыть, а хозяева и гости, прибывшие вовремя, начнут нервничать.

Зайдя в дом, в первую очередь нужно поприветствовать хозяев и других гостей. Демонстративно бестактно осмотрите все вокруг. Но похвалить хозяев за созданный в их доме уют не помешает — они будут счастливы.

Не разрешается выражать шумные эмоции по поводу встречи со старым знакомым или другом. Радость встречи лучше показать улыбкой и спокойным вежливым приветствием.Помните уроки хороших манер.

Если, наоборот, вас что-то расстроило или кто-то вас обидел, и не стоит этого показывать окружающим, чтобы не испортить им настроение.

Элементарные правила поведения на вечеринке гласят, что мужчинам следует присматривать за женщинами. Представители сильного пола помогают зашедшим в комнату дамам снять верхнюю одежду, за столом кладут еду на тарелку сидящей рядом женщины, разливают ей напитки. Но он слишком открыт, чтобы выразить сочувствие, не говоря уже о том, чтобы развести руки — он крайне нецивилизован.Если красивая незнакомка так понравилась, что возникло желание наладить с ней отношения, лучше взять ее номер телефона.

Уходя, стоит попрощаться со всеми присутствующими или хотя бы с хозяевами. Если вам нужно уехать пораньше, следует предупредить об этом хозяев, объяснив причину.

Основные правила застольного этикета

Несмотря на то, что мы ходим в гости не для того, чтобы вкусно поесть, ни одна такая поездка не обходится без застолья.Поэтому будет не лишним вспомнить, как вести себя за столом.

Первое, что нужно сделать, садясь за стол, — это положить на колени салфетку. Помните, что он предназначен для защиты вашей одежды, и вы не должны вытирать им руки или губы. Когда вам нужно встать из-за стола, вы можете оставить салфетку на стуле или слева от тарелки.

Перед тем, как приступить к трапезе, дождитесь, пока это сделает хозяин дома. Перед тем, как распивать напиток, необходимо тщательно пережевывать и проглатывать пищу и протирать губы салфеткой.Человек, знакомый с правилами этикета, никогда не запьет пищу во рту. И еще один небольшой нюанс — прежде чем налить напиток в стакан, предложите его соседу по столу. После трапезы не забудьте поблагодарить хозяев и похвалить выбор блюд.

Как пользоваться столовыми приборами?

Есть простое правило использования столовых приборов: в первую очередь нужно взять тот, который находится дальше всего от тарелки, а потом ближайший к нему.

Вилку предполагается держать в левой руке зубцами вниз, а нож — в правой.

Рукоятку вилки необходимо держать так, чтобы средний и большой палец держали основание, а указательный палец находился сверху.

Обычные столовые приборы используются только для того, чтобы положить в тарелку еду из общей, но посылать в рот обычную ложку или вилку категорически запрещено!

При коротком перерыве в еде столовые приборы укладывают, пересекая их перпендикулярно: нож вправо, вилка — влево. Чтобы показать, что вы закончили трапезу, просто положите эти устройства на тарелку параллельно.

Десятка «НЕ» В ​​гостях

Не забывай о том, как нельзя вести себя на вечеринке. Правила хорошего тона включают следующее «НЕ»:

• не входите в спальню или кухню без разрешения владельцев;
• не класть локти на стол, не махать руками;
• не разговаривайте за столом по мобильному телефону;
• нельзя жевать с открытым ртом;
• не чемпион;
• не злоупотребляют алкоголем; не позволяйте себе опьянеть;
• не заставляйте других употреблять алкоголь;
• не заставляйте гостей произносить тосты;
• не выражайте недовольства угощениями или компанией;
• не задерживайтесь, на ночь не просите.

Правила посещения для детей

Гостей посещают не только взрослые, но и дети. Если вы возьмете с собой любимого ребенка, вы сможете контролировать его поведение. Правда, важно помнить, что не стоит воспитывать его как гостя, а при необходимости комментарии следует делать тихим голосом.

Но если ребенок собирается в гости к сверстнику без сопровождения взрослых, родители должны напомнить ему, как вести себя на вечеринке.

Посещение только по приглашениям.

Если ребенок был приглашен один, не следует брать с собой братьев, сестер или друзей.

Вы не можете пойти в гости без разрешения ваших родителей и родителей друга, к которому идет ребенок.

Важно быть пунктуальным, чтобы не опоздать. Допускается приходить позже не более чем на 15 минут. Если вы не приедете вовремя, необходимо заранее предупредить хозяев и принести извинения.

Придя в гости, ребенок должен поприветствовать друга и поздороваться с его родителями.

При входе в квартиру необходимо снять обувь.

Ребенок должен предупредить родителей друга, в какое время он планирует уехать и как вернется домой.

На вопрос, хочет ли ребенок что-нибудь выпить или съесть, он должен отвечать не кивком или покачиванием головы, а фразами: «Да, пожалуйста» или «Нет, спасибо».

Просить хозяина открыть подарки некрасиво, даже если ребенок очень хочет увидеть, что принесли другие гости.

В гостях нельзя громко кричать, грубить категорически недопустимо.Говорить нужно спокойно.

Детям не стоит заставлять себя ждать, если хозяева пригласят их к столу или предложат поиграть, посмотрите фото. По этикету полагается соглашаться, даже если вы не хотите этого делать.

Нельзя прыгать на диване, валять дурака, бросать подушки.

Забираться в кресло на ногах — дурной тон.

Уходя в гости, нужно поблагодарить хозяев за гостеприимство и пообещать спросить их родителей, когда можно будет пригласить друга к себе.

Поблагодарите за вечеринку хотя бы дважды. Первый — перед отъездом домой, второй — по телефону на следующий день.

Было бы неплохо перенять эти уроки хороших манер и у взрослых.

Зная и соблюдая правила этикета, касающиеся поведения гостей, вы оставите о себе только приятные впечатления и вам всегда будут рады в любом доме.

Вряд ли он хотя бы человек, активный пользователь ВК, которому неинтересно, кто заходит на его страницу.И если в Одноклассниках, например, такой функционал реализован, то в этой социальной сети его нет. Возможно, пока, но факт остается фактом: гостевой сервис в ВК отсутствует.
Но есть пользователи, которые уверяют, что такая функциональность существует, правда, только на уровне приложений. То есть, установив специальное приложение, каждый может увидеть, кто заходит на его страницу. Правда, это домыслы или попытки нажиться на доверчивости пользователей, особенно молодых, попробуем разобраться.

Как посмотреть гостей в контакте

По функционалу эти два приложения ВКонтакте практически идентичны. Для сравнения сделайте следующее:

Если на вашу страницу в сети подписано более 100 социальных пользователей, вы можете использовать дополнительную опцию: посмотреть, кто и сколько раз просматривал вашу учетную запись. Ну а о том, как заставить реальных пользователей активно подписываться на вашу страницу, вы можете прочитать в нашей отдельной статье про читерство.

Два описанных приложения, Мои друзья и Мои гости и Поклонники, позволяют ловить неуловимых посетителей вашего аккаунта с помощью специальной ловушки.

Guest Trap In Contact

• Шаг первый. Запустите приложение и перейдите из вкладки «Гости» в «Дом».

• Шаг второй Щелкните «Хотите больше гостей?» и выберите один из способов размещения.

• Шаг третий Щелкните выбранный вариант.

  Как сделать лучше :

  Приложение ловушки ВКонтакте

  Вы можете использовать специальное приложение «»:

  И вставьте, где ловушка приложения будет работать, например, с закрепленной записью с броским заголовком или в колонке «сайт».

  Ловушка уже работает и показывает всех пойманных гостей в отдельной вкладке с таким же именем.

  Гость привлек к вам чрезмерное внимание и на вашей странице появится сообщение:

  Программа для просмотра гостей Вконтакте

  Невозможно просмотреть гостей Контакта сторонними программами, так как они не являются развитый.Есть только злоумышленники, которые таким образом воруют чужие страницы.

Пользователи социальной сети «Одноклассники» могут видеть, кто из посетителей заходил на их страницу. Невозможно раскрыть только невидимость. Но эта услуга платная, и ею пользуется лишь небольшая часть пользователей ОК. С момента основания в социальной сети ВКонтакте было невозможно узнать, кто к вам приходит. Так хотел Павел Дуров. Даже после продажи сайта узнать, кто посещает вашу страницу, было невозможно.Администрация ВКонтакте уважает конфиденциальную информацию, поэтому просмотр гостей не является частью внутренней функции социальной сети. Не каждого пользователя мучает любопытство по поводу возможности просматривать своих гостей. Кто-то настроен совершенно скептически. А некоторым это очень нужно. Но не все так страшно: есть несколько способов обойти правило. Рассмотрим их подробнее.

Замечу, что эта статья написана для того, чтобы уберечь пользователя от установки подозрительных программ и познакомить его только с проверенными методами.

Это самый действенный способ из всех представленных. Но вы должны знать, что вы можете видеть только тех пользователей, которые часто посещают ваш профиль. Люди, которые очень редко заходят на вашу страницу, не будут отображаться в списке.

Второй вариант более популярен. Вашему вниманию на сайте предлагается архив с программой, которая будет отслеживать тайных гостей. Непосвященные пользователи загружают программное обеспечение, не предполагая, что оно содержит вирус, который может нанести значительный вред его оборудованию.Хороший антивирус вовремя предотвратит заражение. В случае отсутствия одной или плохой антивирусной программы следующим шагом будет распаковка архива. Появится окно, в котором будет предложение отправить смс на номер телефона, чтобы получить код доступа к архиву. Часто злоумышленники заявляют, что СМС абсолютно бесплатны. Но это обман. Как только сообщение будет отправлено, с вашего счета будет списана крупная сумма денег. Второй вариант: деньги идут не сразу, а через день, либо каждый день по частям.Сумма, уходящая с баланса пользователя, может быть настолько маленькой, что он даже не заметит, как пропадают его деньги.

Если вы отправили такое SMS, вам следует немедленно позвонить своему оператору мобильной связи, чтобы вернуть деньги, которые были вам незаконно возвращены. Или напишите заявление в любом магазине мобильной связи. Деньги всегда возвращаются.

Хуже, если при распаковке на ваш компьютер попадает вредоносная программа. Обычно это опасные вирусы за короткое время, нарушающие жизнь вашего компьютера.Или шпионское ПО, крадущее ваши пароли с почты, социальных страниц. сети, системы денежных переводов, банковские карты и т. д. Здесь нужно быть очень серьезным, ведь потерянные деньги возврату не подлежат!

Часто под описанием мошеннической программы можно увидеть отзывы типа «Супер, сработало, спасибо разработчикам». Некоторые пользователи клюют такие комментарии. Помните, что эти отзывы написаны самими мошенниками, чтобы повысить доверие некомпетентного пользователя.

Заключение

Ни в коем случае не скачивайте сторонние программы.Они принесут вам вирус и украдут личную информацию. Также не следует отправлять деньги за подозрительную услугу. Есть только 4 из перечисленных выше безопасных методов. Все они работают по методу сбора статистики посещений вашего профиля. Верить им или нет — дело пользователя.

Фантазия современных злоумышленников не знает границ. В ловушку попадают даже опытные пользователи. А все потому, что предлагаемые программы находятся в топе результатов поиска, из-за чего есть доверие к ресурсу.Хорошо, если при переходе по ссылке антивирус сразу блокирует сайт.

Многие пользователи социальных сетей задаются вопросом о популярности их страницы среди друзей. Если в «Моем мире» и «Одноклассниках» вы видите список людей, которые без проблем заходили на страницу, то «Вконтакте» эта функция не настроена.

Можно посмотреть, кто заходил на мою страницу в ВК

Ответ на этот вопрос вы можете получить на сайте социальной сети «Вконтакте» в разделе «Помощь».Он находится на панели управления в верхнем углу страницы.

Одноименный подпункт находится в разделе «Страница» открывшегося диалогового окна.

Информация по запросу откроется в окне. Вы должны прочитать это или проголосовать вместе с ним.

Для сбора информации обо всех посещениях всех страниц необходимы хранилища и организованная система поиска данных. Собирать и обрабатывать эту информацию «на всякий случай» непрактично и дорого.Получить такую ​​информацию в обход сайта не получится.

Хотя ВК не предоставляет возможности просмотра Гостей страницы, но пользователи не оставляют попыток получить эту информацию с помощью сторонних приложений и обходных путей. О самых популярных способах просмотра Гостей в ВК мы поговорим в этой статье.

Как видеть гостей Вконтакте

В социальной сети есть функция «Статистика профиля». Пользователи, у которых более 100 подписчиков, могут видеть среднюю посещаемость страницы и распределять ее по городам.Однако все это косвенные индикаторы.

Удаление учетной записи

Как это ни парадоксально звучит, но перед удалением учетной записи система выдает список людей, которые будут огорчены, если учетная запись будет удалена. Это посетители страницы. Как просмотреть этот список?

В правом углу страницы на панели управления выберите «Настройки».

В открывшемся меню нужно прокрутить вниз до точки удаления страницы.

На этом этапе система попросит вас указать причину удаления страницы.Вам нужно выбрать «Не комментировать мою страницу».

Сервис отобразит список из двух человек, которые наиболее часто посещают страницу пользователя.

Стоит отметить, что точность расчетов данным методом вызывает сомнения.

Приложения и программы для просмотра гостей

Сегодня существует множество приложений, предназначенных для просмотра количества посещений страниц. Все они работают по одному принципу. Они собирают информацию об активности других пользователей на странице (лайками, сообщениями, граффити).Однако эти программы не предоставляют информацию о тех пользователях, которые просто просмотрели страницу. Рассмотрим самые популярные сервисы.

Все приложения находятся в разделе «Игры» в строке меню справа.

В строке поиска введите ключевые слова «Мои гости».

Система отобразит список доступных приложений. Они формируются по рейтингу популярности. Вы должны нажать на любое из приложений и перейти к процессу установки.

Специальные приложения для распознавания гостей Вконтакте

Таких программ много. Самые популярные из них мы рассмотрим в статье ниже.

«Мои гости» в ВК

В списке доступных приложений несколько программ с одинаковым названием. Самый популярный из них — «Мои гости», которым пользуются более 1 миллиона пользователей.

Приложение состоит из двух основных разделов. В меню «Гости» отображается информация обо всех посетителях страницы.На вкладке «Все о друзьях» можно просмотреть активность только друзей пользователя. Система собирает информацию не только о пользователях, но и о частоте их активности на странице. Итак, рейтинг «Болельщиков» сформирован.

Стоит отметить, что подписчики приложения могут подписываться друг на друга. Чтобы анонимно отслеживать действия других пользователей, вам придется заплатить деньги. Подробную информацию о тарифах можно найти в разделе «Мой профиль».

«Guest Trap» — еще одно приложение для просмотра списка посетителей страницы.

Для работы приложению потребуется доступ к личным данным пользователя: уведомлениям и списку друзей. Когда вы заходите в меню «Настройки», система отображает ссылку на страницу в социальной сети. Его необходимо вставить в столбец «Персональный сайт» в личных параметрах пользователя или опубликовать на его стене. По отзывам пользователей, публикация ссылки на сайте дает больший эффект. Если выбран вариант размещения надписи на стене, то рядом со ссылкой появится «кричащая надпись», например, «Задайте мне вопрос.Приложение будет собирать информацию о пользователях, перешедших по ссылке во вкладке «Пойманные гости».

Еще один способ узнать список посетителей страницы — воспользоваться «Ловушкой для гостей». Это одноименная функция в приложении «Мои гости». Он работает по точно такому же алгоритму.

Как увидеть гостей в контакте с помощью приложения «Мои гости»

Все приложения находятся в разделе «Приложения» на сайте Вконтакте. Для поиска программы введите ключевые слова «Мои гости» в поле поиска.Система отображает список приложений, соответствующих запросу. Вам нужно выбрать первый предложенный вариант.

В новом окне отображается краткая информация о возможностях программы. Он также отражает информацию о том, к каким данным программа получит доступ. Для установки программы нужно нажать на кнопку «Запустить приложение».

Откроется панель задач. Вам нужно нажать на кнопку «Включить».

Разрешить приложению доступ к данным (их список был представлен в первом абзаце).

Теперь программа готова к работе.

После установки пользователь переходит на вкладку «Мои гости». В нем отображается информация обо всех посетителях страницы, а не только о друзьях. Для регулярного просмотра информации неудобно каждый раз открывать приложение. Ссылку на эту страницу статистики можно сохранить в меню.

Для анонимного просмотра информации о действиях друзей необходимо активировать функцию «Невидимость».По отзывам пользователей, подключать его не всегда целесообразно, ведь ваши друзья могут использовать сторонние приложения для просмотра той же статистики. Они просто не будут отображаться в списке посетителей страницы.

Как видеть гостей в контакте с телефона

Для просмотра статистики посещения страницы на смартфоне лучше скачать «Мои поклонники и мои гости». Вся информация об активности посетителей будет отражена на странице «Мои поклонники». Данные можно фильтровать по времени (день, неделя, месяц) и полу.Чтобы узнать информацию о сторонних пользователях, посетивших страницу, вам необходимо перейти в раздел «Мои гости». Ежедневно приложение будет отображать значки профилей посетителей страницы. Нажав на аватар, пользователь попадет на гостевую страницу.

Еще одно приложение «Мои гости: ТОП 15 + Аналитика» работает по тому же принципу, что и все предыдущие приложения.

Покупатели VIP-аккаунта получают больше преимуществ:

• они могут узнать, кто из подписчиков этого приложения «подписан» на них;
• отдельно отображает список недавних посетителей страницы;
• отображается рейтинг 15 пользователей, которые чаще всего заходят на страницу пользователя;
• Список пользователей может быть отфильтрован по семейному положению и городу проживания.

Предупреждение! В ТОПе платных приложений для iPhone три программы для просмотра посетителями страницы: «Версия для ВКонтакте», «Редакция для ВКонтакте» и Гости из ВКонтакте. Разработчики этих приложений взимают комиссию от 15 до 50 рублей за предоставление статистики просмотров страниц, которую пользователи уже могут видеть бесплатно. Перед скачиванием программы внимательно ознакомьтесь с отзывами.

Альтернативный способ

Следующий способ подходит тем пользователям, у которых есть профиль в Одноклассниках или Моем Мире.Суть метода — сделать красивую надпись на стене, а затем отследить количество переходов по ссылке.

Кратко рассмотрим алгоритм:

1. Вам нужно выбрать самую красивую фотографию или создать ее с помощью фильтров в Photoshop.

2. Необходимо создать пост на стене ВКонтакте. Скрыть ссылку на свой профиль в Одноклассниках под фото.

3. Автоматически загружать фото профиля социальной сети.Его нужно заменить на созданное фото в фотошопе. Для этого на фото используются стрелки.

Видео: как посмотреть активность страницы и трафик

Что сделать ВКонтакте пропавшими друзьями. Кто удалил меня из друзей ВКонтакте. Почему посетители удаляются из друзей

ВКонтакте активно расширяет свои сети, вводя огромное количество посетителей в социальный пул. Проведя время в самой популярной социальной сети ВКонтакте, мы приглашаем в друзья как своих друзей, так и тех пользователей, с которыми нам хотелось бы познакомиться.Часто мы просто не замечаем, как люди удаляются из друзей или не подтверждаем заявку на приглашение в друзья. Но, вы должны знать, что на самом деле определить, кто удалился из друзей ВК, довольно просто. В этом обзоре вы найдете инструкции и узнаете, как это можно сделать.

Быстрая навигация:

Почему посетители удаляются из друзей

Люди создают свои страницы, начинают общаться друг с другом и приглашают в друзья особо понравившихся новых или уже известных товарищей из реальной жизни.Некоторые люди пополняют свой Дружественный список незнакомых личностей в количественных или деловых целях.

Так или иначе, практически каждый пользователь хоть раз за все время использования ВКонтакте сталкивался с потерей человека в списке своих контактов. После обнаружения исчезновения знакомого друга у пользователя, впервые столкнувшегося с этой проблемой, появляется вопрос, как узнать, кто именно удалился из друзей из своего аккаунта Вконтакте или кто удалил из своих друзей со своей страницы.И это не должно удивлять, ведь на первый взгляд люди не всегда узнают, кого именно из друзей не хватает: большое количество людей или не очень отличная память могут не позволить запомнить абсолютно всех и вся. Но конкретная цифра 30 или, скажем, 256 — можно сохранить в уме, поэтому другие данные, например, 27 или 234 вместо исходных данных вызывают недоумение.

Не менее интересно узнать и причину, по которой друзья удаляются со страницы в ВКонтакте.И не столько когда Дружественный лист уходит от незнакомца, с которым у пользователя не было тесного общения, но когда он приближается, становится не только такое действие становится непонятным, но в некоторых случаях немного оскорбительным. Важных причин такого исхода может быть несколько.

Первый как: Вполне возможно, человек на другой стороне экрана просто решил «очистить» и удалить все лишние личности из своих контактов, чтобы в друзьях оставалось только самое-самое, т.е.е. те, кого он или на самом деле понимает, или с кем часто разговаривает и намерен «дружить» в последующем. Когда вы заметили, что вас удалили, не спешите расстраиваться: зайдите на страницу человека и посмотрите, сколько подписчиков на данный момент. Когда остается меньше, если вы не забываете, сколько там было, даже про это, значит, он, скорее всего, действительно провел «уборку». Правда, возможен и другой вариант.

Причина вторая: Возможно, пользователь удалил из друзей много людей, так что подписчиков у него стало больше.Особенно это касается тех, кто давно всем подряд прибавляет «по количеству». Некоторые современные жители искренне считают, что чем больше подписчиков, тем круче они выглядят. К счастью, либо раскаяние, это не всегда так, но прецедент остается фактом: люди хотят выглядеть солиднее и популярнее и добавлять себе как можно больше пользователей, а через какое-то время их удаляют. Если вы понятия не имеете, что этот человек делает в ваших приятелях, похоже, именно из этой серии «добавлял-молчал-удалял».Узнать об этом можно с помощью приложения ВКонтакте, чтобы узнать, кто удалил из друзей в ВК.

Что делать, если вас удалили из друзей VK

Теперь у вас есть представление о том, как узнать, кто удалился из друзей во ВКонтакте, но есть вероятность, что у вас родился вопрос: «Что делать?»

Прежде всего, если вы надеетесь, что пользователь удалил вас из контактов по первопричине, с ним, с ним хорошо контактирует с ним, имеет смысл написать ему через личное сообщение вопрос о том, намеренно ли он удалил вас от друзей.Если вам ответят, что «да» — что делать, если нет — вас могут снова добавить в список друзей. Также в том случае, если вы не часто общались с человеком и не имеете тесной связи в реальной жизни, у вас есть возможность либо остаться в подписчиках, либо уйти оттуда, нажав на «отменить заявку и отказаться от подписки».

Даже если вас удалили из друзей без причины, вы можете найти новых друзей в любой момент, поэтому не стоит расстраиваться.

Как узнать, кто удалил меня из друзей в ВК

Итак, настал самый ответственный момент, когда можно поговорить о том, как узнать, кто удалился, по друзьям Вконтакте.Для этого перейдите в раздел «Мои друзья». Там вы найдете 3 пункта: «Все друзья», «Друзья в сети» и «Приложения в друзья». Нас интересует именно третий вариант. Заходите. Что мы видим: В зависимости от того, есть у вас подписчики или нет, вариантов развития следующих событий может быть два:

1. Перед вами расположены вкладки «Все подписчики» и «Исходящие приложения». Хотя, по крайней мере, это нам важны непосредственно исходящие приложения.
2. Текст «Вы подали заявку и подписались на N человек», где n следует считать количеством удаленных друзей.Вот вы их и видите. Кроме того, отличным вариантом для отслеживания людей, вышедших на пенсию, является специальное приложение для сайта «Мои гости». Вот и все, чтобы вы знали, как узнать, кто удалил из друзей в вашем аккаунте ВКонтакте, ведь этот пользователь или эти люди осмелились подсчитать, что вам не нужно оставаться в его Списке друзей.

Хорошо видно.

Как узнать, кто меня добавил в экстренных случаях (черный список ВК)

Кроме того, бывают обидные случаи, когда вы удаляете собственных друзей, также могут встречаться ситуации, когда вы попадаете в черный список.

Если вы хотели написать одному из пользователей сообщение, и случайно заметили, что вы не можете его отправить, значит, вы попали в черный список. Кроме того, есть еще один способ заранее узнать, кто вас занес в черный список. Вы можете видеть по телефону CT или проверять с компьютера и узнавать обо всех, кто может ограничить доступ к общению.

В этом разделе мы рассматриваем именно эту проблему и пытаемся разобраться в причинах и последствиях попадания в черный список.

Проверить свою страницу в черном списке достаточно просто — с помощью приложения Blacklist & Hidden Friends.Чтобы перейти в это приложение, просто наберите его название в поисковике и вы откроете желаемый сайт.

После того, как вы найдете веб-сайт, приложение нужно будет запустить.

С помощью этого приложения вы можете в любой момент просмотреть список тех людей, которые добавили вас в черный список, а также есть возможность увидеть скрытых друзей от любого пользователя.

Во-первых, давайте посмотрим, кто добавил вас в черный список. Для этого вставьте ссылку на свою страницу в соответствующее окно и нажмите кнопку «Просмотр».

Таким образом, сканирование начнется. Важно понимать, что это приложение в первую очередь ищут только среди ваших друзей. Процесс проверки занимает около минуты.

Теперь можно поговорить о причинах, по которым пользователи популярной сети добавляют друг друга в черный список.

Основная причина этого действия — нежелание общаться. Некоторые пользователи ВК умеют оскорблять друг друга, описанная функция здесь отлично работает. Также черный список полезен для досадных сбоев рекламы, сообщения которой могут действовать в неподходящий для вас момент, например, посреди ночи.

Таким образом, следует сделать вывод, что эта функция очень полезна. Также очень полезно знать, кто удален из друзей.

По вашему запросу в списке может быть абсолютно любой пользователь известной сети. Если отметить человека в черном списке «в контакте» пользователя, то:

• Вам не придут от него никаких сообщений;
• он не сможет избежать просмотра вашей страницы;
• защитишь себя от негатива.

Как поставить пользовательский черный список

Итак, как можно занести в черный список «В контакте» неприятного вам человека? Для этого перейдите на свою страницу и выберите слева из списка функцию «Мои настройки» — перед вами будет сформирована страница с опциями.Четвертая вкладка (вверху страницы) будет той, которая нам нужна: «Черный список / Изолятор / Литой» — в зависимости от языка, который вы используете «в контакте». После входа во вкладку формируется меню черного списка. Если у вас там нет пользователей, то поле будет пустым. Вверху будет окно, в правой части которого расположена активная кнопка с надписью: «Добавить в черный список». Вы можете вносить в него пользователей по двум параметрам: фамилия и имя и / или адрес аккаунта. Если вы используете имя и фамилию пользователя, то после внесения этой информации в колонку вам будут видны все люди, которые на странице введены параметры.В случае, если ссылка сделана, ее владелец автоматически попадает в список.

Можно ли как-то поставить пользователя в черный список «в контакте»? Допустим использовать меню прямо на своей странице. Для этого зайдите в личность интересующего вас человека и посмотрите меню, расположенное после списка пользовательских аудиозаписей. Будет несколько записей, одна из которых нам нужна: «В черный список».

Вы должны знать, что этот процесс доступен только тем пользователям, которых не хватает в ваших друзьях.Удалить людей, занесенных в черный список «в контакте», тоже можно абсолютно легко. При этом эта процедура реализована только в настройках аккаунта. Для этого напротив каждого человека (справа) есть функция «Удалить из списка». И знайте, что никто не должен мешать вашему присутствию в сети собственными бестактными и некрасивыми действиями: ни спамперы, ни специалисты по сетевому маркетингу, ни простенькие бестактные люди.

Если бы вы попали в черный список, вы не выйдете из него сами.Как вариант, можно запустить второй аккаунт и попросить человека снять ограничение на общение. Или попросите кого-нибудь из общих друзей спросить его об этом.

Вконтакте один из самых посещаемых сайтов русскоязычного Интернета. Благодаря Вконтакте все ваши друзья, коллеги, соседи всегда будут с вами. Сегодня у этого сервиса 110686719 зарегистрированных пользователей, и это число постоянно растет.

Что использовать ВКонтакте:

— Найдите своих старых друзей, с которыми я вас давно не видел, тех, с которыми вы когда-либо учились, работали, отдыхали;
— завести новых друзей;
— Всегда будь на связи со всеми, кто тебе близок и дорог.

Почему при работе во ВКонтакте — пропали друзья

Пользователи Вконтакте иногда сталкиваются с такой проблемой. В определенный промежуток времени из ВКонтакте пропадают друзья. Попробуем разобраться с этой проблемой. Почему пропало друзей ВКонтакте? Причин может быть несколько:
— В некоторых случаях до исчезновения друзей некоторые из них приходили в спам-сообщения с просьбой прочитать чужое SMS-сообщение. Возможно, спам-боты и заблокируют такие аккаунты;
— Это также может произойти из-за сбоя на сервере;
— Причина может заключаться в том, что спам-боты взламывают вашу страницу или просто рассылают спам;
— Есть еще одна причина, по которой пропало Друзей .Это может быть связано с тем, что какой-то хакер их просто удалил. Если да, то вам нужно срочно сменить пароль. Пароль усложняется не просто «123456», а кроме цифр, используйте буквы. Только не забывай это сам
— Не переходите по ссылкам сомнительного содержания;
— Возможно Paved версия программы VKSaver;
— В этих случаях принято писать в техподдержку. Как бы то ни было, а у техподдержки всегда больше информации, чем у нас и у вас;
— Если это произошло, скорее всего, это вирус, который заразил ваш компьютер, когда вы прошли через ссылки на спам.В этом случае вам нужно открыть файл Hosts, и удалить из него все, что связано с ВКонтакте. Ищите этот файл в папке: \ Windows \ System32 \ Drivers \ ETC \ HOSTS. Для его открытия можно использовать обычную записную книжку;
— И, наконец, проверьте подключение к Интернету. Ознакомьтесь с другими приложениями, использующими подключение к Интернету.

Часто бывает, что пользователь, зайдя на свою страницу ВКонтакте, обнаруживает меньшее количество друзей, чем на момент последнего посещения.Конечно, причина этого кроется в удалении вас из друзей с тем или иным человеком.

Причину удаления в друзьях вы можете узнать исключительно сами. Однако узнать, кто конкретно вас удалил из друзей, можно сразу несколькими способами. В некоторых случаях крайне важно вовремя узнать о действиях подобного рода и выяснить из-за удаления или отмены подписки пользователя успешно.

Узнать, кто недавно вышел из списка друзей, довольно просто.Для этого вы можете прибегнуть к двум наиболее комфортным методикам, в зависимости от ваших личных предпочтений. Каждый метод одинаково эффективен и имеет свои особенности.

Если ваш друг исчез из списка друзей, возможно, причиной этого стало удаление его страницы из этой социальной сети.

Чтобы узнать, кто выбыл из списка, не нужно использовать какие-либо специальные программы или расширения. В частности, это касается случаев, когда вам необходимо ввести свои регистрационные данные на стороннем ресурсе или в программе, которая, по большей части, является мошенничеством с целью взлома.

Способ 1. Воспользуйтесь приложением ВКонтакте

В этой социальной сети многие приложения способны не только развлечь практически любого пользователя, но и могут предоставить дополнительный функционал. Одно из этих дополнений во «ВКонтакте» может помочь вам узнать, кто удалился из списка ваших друзей.

Если вас не устраивает предложенное приложение, вы можете использовать аналогичное. Однако в любом случае обратите внимание на его популярность среди пользователей — она ​​должна быть высокой.

Этот метод работает полностью независимо от вашего браузера.Главное, чтобы приложения VK.COM корректно отображались в интернет-браузере.

1. Откройте веб-браузер, войдите на сайт социальной сети. Сети ВКонтакте под своим логином и паролем и перейти в раздел через главное меню.
2. Прокрутите страницу с приложениями до строки «Поиск игр» .
3. В качестве поискового запроса введите название приложения .
4. Запускаем приложение «Мои гости» .Обратите внимание, что количество пользователей должно быть как можно большим.
5. После запуска добавления вы найдете очень привлекательный интерфейс с вкладками для разговора и элементами управления.
6. Перейдите на вкладку «Все о друзьях» .
7. Здесь нужно перейти на вкладку. «Изменения в друзьях» .
8. Будет отображен следующий список друзей из вашего списка друзей.
9. Чтобы оставить только хорошо снимаем галочку «Показывать дополнения друзьям» .

Основное преимущество приложения:

• полное отсутствие надоедливой рекламы;
• удобный интерфейс;
• автоматическое уведомление о действиях друзей.

К минусам можно отнести лишь некоторую неточность в работе, характерную для подобного рода.

Если вы впервые запустили приложение, неточные данные у пользователей, удаление которых произошло сравнительно недавно.

Теперь вы легко можете перейти на страницу людей, которые узнали, и узнать, почему это произошло.В этом приложении любые ошибки, связанные с неточностью предоставленных данных, сведены к минимуму. Это, кстати, свидетельствует о большой аудитории пользователей, которые рады использовать приложение «Мои гости» .

Метод 2: Элементы управления ВКонтакте

Данная методика выявления проблемных друзей применима только к тем людям, которые оставили вас в подписчике. То есть, если человек не просто удалил вас, но и добавил в свой черный список, этого пользователя нельзя будет распознать таким образом.

Чтобы воспользоваться этим методом, вам понадобится абсолютно любой веб-браузер, в том числе и мобильное приложение ВКонтакте. Особо сильной разницы нет, так как vk.com в любом виде имеет стандартные разделы, которые мы будем использовать.

Важно отметить, что ваши текущие приложения и удаленные из друзей легко отличить друг от друга. В первом случае будет отображаться кнопка под именем человека «Отменить заявку» , а во втором «Отказаться от подписки» .

Обратите внимание, что кнопка «Отписаться» Также будет, если ваш запрос не одобрен ни одним пользователем.

Судя по общему правилу, этот способ ничего от вас не требует — достаточно перейти в специальный раздел ВКонтакте. Это определенно положительное качество. Однако, кроме того, никаких преимуществ этот прием не несет из-за высокой степени неточности, особенно если вы не знаете список своих друзей.

Как выявить проблемных друзей — используйте приложение или стандартные методы — чтобы решить вас.Удачи!

Обновлено: 12.05.2021

103583

Если вы заметили ошибку, выделите фрагмент текста и нажмите Ctrl + Enter

границ | Универсальные CRISPR-эффекторы типа V и перспективы их применения

Введение

Система CRISPR (сгруппированные через регулярные промежутки между короткими палиндромными повторами) –Cas (CRISPR-ассоциированный белок) — это приобретенный иммунный механизм, который в основном встречается у бактерий и архей в качестве защиты от мобильных генетических элементов (MGE), таких как фаги, плазмиды, и транспозоны (Sorek et al., 2013; Кунин и др., 2017). Система CRISPR была разделена на класс I и класс II в соответствии с существующим методом классификации, а их эффекторные нуклеазные модули состоят из нескольких субъединиц или отдельных белков, соответственно (Макарова и др., 2015). Класс II подразделяется на тип II и тип V с активностью интерференции ДНК, а также тип VI с активностью интерференции РНК (Hajizadeh Dastjerdi et al., 2019).

Как и другие системы CRISPR – Cas, система типа V состоит из трех частей: i.е., модуль эффекторного белка, модуль сбора данных и массив CRISPR (Sorek et al., 2013). Когда MGE из окружающей среды вторгаются в клетку-хозяина, Cas1 и Cas2 в модуле сбора образуют комплекс для перехвата короткого сегмента вторгающейся генетической информации, называемого протоспейсером, рядом с коротким мотивом, называемым мотивом, примыкающим к протоспейсеру (PAM), и вставьте его в цепочку повторяющихся последовательностей в массиве CRISPR (Yosef et al., 2012; Nunez et al., 2015). Затем массив CRISPR транскрибируется для получения пре-CRISPR РНК (пре-crRNA), которая в дальнейшем обрабатывается РНКазой III или эффекторными белками в своей собственной системе CRISPR с образованием зрелой РНК CRISPR (crRNA).Некоторые системы CRISPR также транскрибируют трансактивирующую crRNA (tracrRNA), которая в основном комплементарна последовательностям повторов в массиве CRISPR. Зрелая crRNA сливается с tracrRNA, или crRNA сама по себе действует как направляющая РНК (gRNA) и объединяется с эффекторной нуклеазой в эффекторном модуле, который затем соответствует вторгающейся последовательности и проявляет целенаправленную активность расщепления (Murugan et al., 2017).

Эффекторные белки семейства V-типа разнообразны на N-конце, но сохраняют единый RuvC-подобный домен эндонуклеазы (RuvC) на C-конце, происходящий из белка TnpB, кодируемого автономными или неавтономными транспозонами (Shmakov et al. al., 2017). Согласно разным эффекторам CRISPR, система типа V подразделяется на множество подтипов, включая типы от VA до VI, тип VK, тип VU и CRISPR – CasΦ (Hajizadeh Dastjerdi et al., 2019; Pausch et al., 2020) . В этих подтипных системах соответствующие эффекторные белки продемонстрировали множество функций, при этом некоторые из них могут действовать не только на двухцепочечную ДНК (дцДНК), но также и на одноцепочечную ДНК (оцДНК) и одноцепочечную РНК (оцРНК). Эта многофункциональность поставила систему CRISPR – Cas типа V в центр внимания недавних исследований.Однако до сих пор нет обзора, который систематически суммировал бы эти различные системы CRISPR типа V. Общая сортировка способствует применению систем типа V и глубокому пониманию систем CRISPR, чему мы хотим способствовать в этом обзоре.

История семейства Type V

Тип V-A, который был идентифицирован как первая известная система типа V в патогенной бактерии человека Francisella tularensis в 2013 году, имеет сигнатурный эффекторный белок Cas12a (ранее обозначенный как Cpf1) (Schunder et al., 2013). Под управлением гРНК Cas12a последовательно расщепляет некомплементарные и комплементарные цепи целевого сегмента ДНК с использованием одного домена нуклеазы RuvC (Jeon et al., 2018). Это значительно отличается от фермента CRISPR типа II Cas9, который использует домен HNH-нуклеазы и домен RuvC-подобной нуклеазы для разрезания двух цепей целевого сегмента ДНК, соответственно (Sternberg et al., 2015). С-конец только с одним эндонуклеазным доменом RuvC является определяющей характеристикой системы CRISPR типа V (Макарова и др., 2015).

Чтобы исследовать больше неизвестных систем типа V, исследователи разработали сложный подход к анализу in silico с использованием белка Cas1, который широко распространен и высококонсервативен среди систем CRISPR-Cas, в качестве «затравки» для запроса информации о последовательности в доступная база данных терабазного масштаба. С помощью этого метода Шмаков и др. идентифицировали тип V-B и тип V-C в 2015 г. (Shmakov et al., 2015), Harrington et al. идентифицировали тип V-F в 2018 году (Harrington et al., 2018), а также Ян и др. идентифицировали тип V-G, тип V-H и тип V-I в 2019 году (Yan et al., 2019). Путем опроса некультивируемых бактерий в пробах подземных вод и донных отложений с помощью метагеномики с разрешенным геномом Бурштейн и его коллеги идентифицировали тип V-D и тип V-E в 2017 году (Burstein et al., 2017).

Другой способ идентифицировать системы CRISPR – Cas, включая системы типа V-U и систему CRISPR – CasΦ, заключается в использовании массивов CRISPR с фиксированным структурным шаблоном в качестве «привязки». Рядом с этим локусом CRISPR отсутствует модуль сбора, что указывает на то, что эти системы не могут быть идентифицированы с помощью Cas1, а также указывает на то, что существует новый механизм, отличный от Cas1 и Cas2, в фазе адаптации этих систем CRISPR.Шмаков и др. открыл серию систем нового типа V-U, включая V-U1, V-U2, V-U3, V-U4 и V-U5 (Шмаков и др., 2017). Спейсер в массиве CRISPR соответствует некоторым фаговым мотивам, что свидетельствует об активности этого локуса CRISPR. В другом исследовании исследователи были удивлены, обнаружив, что система типа V-U5 тесно связана с Tn7-подобным транспозоном (Faure et al., 2019). Эта необычная характеристика отличает тип V-U5 от типа V-U, и он был реклассифицирован как независимый подтип V-K.В огромных фагах, существующих в различных экосистемах, Al-Shayeb et al. идентифицировали тип II, тип V-I, тип V-U и тип V-F, которые никогда не обнаруживаются у фагов, а также систему CRISPR-CasΦ, о которой не сообщается у бактерий и архей. В этих системах их спейсеры нацелены на хромосому хозяина или другие конкурентные фаги, что облегчает инвазию фагов (Al-Shayeb et al., 2020).

Как описано во введении, эти различные подтипы типа V могут взаимодействовать с тремя разными типами субстратов (дцДНК, оцДНК и оцРНК).Кроме того, разные подтипы также демонстрируют разные характеристики с одним и тем же субстратом (таблица 1). В следующем разделе мы классифицируем подтипы в соответствии с различными целевыми субстратами и обсуждаем возможности применения различных подтипов типа V (рисунок 1).

Таблица 1 . Свойства эффекторов семейства V типа.

Рисунок 1 . Вещество распознавания эффекторных белков каждого подтипа семейства V типа. Среди них было подтверждено, что Cas12a, Cas12b, Cas12c, Cas12d, Cas12h, Cas12i и Cas12j обладают способностью взаимодействовать как с дцДНК, так и с оцДНК.Cas14 обладает способностью действовать только на оцДНК. Cas12g может распознавать оцРНК. Когда одноцепочечная молекула нуклеиновой кислоты используется в качестве вещества, связывание белка Cas не ограничивается PAM.

Нацеливание на дцДНК семейством типа V

На сегодняшний день большинство систем CRISPR, идентифицированных как принадлежащие к семейству типа V, продемонстрировали направленную РНК-управляемую активность расщепления дцДНК. Cas12a (тип V-A), Cas12b (тип V-B) и Cas12e (тип V-E) были подробно изучены, и их структурные и функциональные характеристики относительно ясны.После того, как эффекторный белок связывает гРНК с образованием бинарного комплекса, он специфически распознает 5′-Т-богатый ПАМ и способствует раскручиванию целевой ДНК, что определяется спариванием оснований Уотсона-Крика с направляющей последовательностью crРНК (Stella et al., 2017) . В то же время нецелевая цепь (NTS) целевой последовательности смещается, образуя так называемую структуру «R-петли». Домен RuvC разрезает NTS и цепь-мишень (TS) последовательно в PAM-удаленных сайтах, образуя ступенчатый разрез с 5′-выступами 5, 7 или 10 нуклеотидов (Yang et al., 2016; Лю Дж. Дж. И др., 2019). Примечательно, что это отличается от Cas9, который действует на PAM-проксимальную связь, давая тупой конец (Jinek et al., 2014). Cas12c, Cas12d, Cas12h, Cas12i, Cas12k и Cas12Φ также принадлежат к семейству типа V, но менее известны. Кроме того, некоторые из этих белков Cas типа V обладают двойной нуклеазной активностью, например Cas12a, Cas12c (Harrington et al., 2020), Cas12i (Yan et al., 2019) и Cas12j (Pausch et al., 2020). . Они могут обрабатывать пре-crRNA сами по себе, что делает их уникальными для многоканальных манипуляций (Fonfara et al., 2016; Zetsche et al., 2017; Zhang et al., 2017). Хотя Cas9 также может изменять несколько генов одновременно, необходимы либо несколько отдельных единиц sgRNA (включая промотор, gRNA и терминатор), либо сложные модификации массива CRISPR, что делает процесс громоздким и неудобным (Nissim et al., 2014 ; Sakuma et al., 2014).

Организация доменов Cas12a, Cas12b и Cas12e и расхождение

Все три белка имеют двулопастные структуры, состоящие из доли α-спирального распознавания (REC) и доли нуклеазы (NUC).Две доли соединены мотивом мостиковой спирали (BH) (рис. 2А). Доля REC содержит два REC домена (REC1 и REC2), которые в основном помогают вмещать и стабилизировать гибрид crRNA-целевой ДНК после формирования «R-петли» (Gao et al., 2016). В доле NUC Cas12a содержит домен RuvC, идентичный домен PAM (PI), домен связывания олигонуклеотидов (OB) и домен NUC. Домен NUC ранее считался еще одним нуклеазным доменом ферментов семейства V, но недавно исследователи предложили переименовать его в домен TSL (нагрузка целевой цепи), чтобы лучше отразить его фактическую роль (Liu J.J. et al., 2019). OB-домен Cas12a объединяется со вторичной структурой на 5′-конце гРНК с образованием бинарного комплекса, а начальные 5 нуклеотидов crRNA в PAM-проксимальном участке имеют конформацию, подобную A-форме (Dong et al., 2016 ; Свартс, Джинек, 2019). Эти несколько предварительно упорядоченных нуклеотидов определяются как «затравочная последовательность». Когда домен PI распознает PAM и распаковывает целевую дцДНК, затравочная последовательность немедленно взаимодействует с целевыми цепями, закладывая основу для удлинения R-петли (Stella et al., 2017). Следовательно, несовпадения в области посевной последовательности часто оказываются разрушительными для целевой функции белка Cas. Cas12b не имеет независимого домена PI. После объединения с гРНК с образованием бинарного комплекса домен OB и REC-I образуют предварительно организованную дуплексную щель PAM, где спирали α5 и α6 и гибкая петля между α4 и α5 в REC-I занимают положение, аналогичное положению домена PI в Cas12a и идентифицируют PAM (Yang et al., 2016; Wu et al., 2017). Cas12e также содержит уникальный домен связывания нецелевой цепи (NTSB), который необходим для раскручивания целевой ДНК.Этот дополнительный домен предполагает, что комплекс Cas12e-gRNA распознает последовательность-мишень и объединяется с ней с образованием тройного комплекса через по механизму, отличному от механизмов других ферментов CRISPR (Liu J. J. et al., 2019).

Рисунок 2 . Разнообразие доменов Cas12a, Cas12b и Cas12e и локусов CRISPR типа V-K. (A) Доли REC Cas12a, Cas12b и Cas12e содержат два домена REC. Есть некоторые различия в доле NUC, включая присутствие домена PI и дополнительного домена NTSB Cas12e. (B) Связанные с транспозоном гены и элементы CRISPR расположены на обоих концах транспозона.

Другие белки Cas, распознающие дцДНК

Некоторые недавно открытые белки Cas из семейства V также обладают активностью расщепления дцДНК, хотя это доказано только биохимическим экспериментом, включая Cas12c, Cas12d, Cas12h, Cas12i и Cas12j (Chen LX et al., 2019; Yan et al., 2019 ; Pausch et al., 2020). Стоит отметить, что хотя Cas12i индуцирует двухцепочечные разрывы (DSB), эффективность разрезания различна для каждой цепи целевой ДНК, с сильным расщеплением некомплементарных цепей, но очень низкой эффективностью расщепления для комплементарных цепей.Следовательно, DSB производятся только на очень ограниченных частотах (Yan et al., 2019). Эта функция позволяет использовать Cas12i в качестве никазы за счет использования пары gRNA для снижения скорости отклонения от цели и достижения крупномасштабных манипуляций с фрагментами гена, как и nCas9 (Ran et al., 2013a; Standage-Beier et al., 2015).

Помимо нацеливания на дцДНК для расщепления, система типа V-K может нацеливаться на дцДНК для транспозиции. Как упоминалось выше, локус CRISPR типа V-K связан с Tn7-подобными транспозонами (Faure et al., 2019). Диапазон, обрамленный концевыми последовательностями транспозона (LE и RE), кодирует фермент Cas12k с естественно инактивированным доменом RuvC и тремя связанными с транспозицией генами tnsB, tnsC и tniQ (рис. 2B). Предыдущие исследования показали, что канонические транспозоны Tn7 интегрируют ген карго между LE и RE в конкретном сайте прикрепления Tn7 ( attTn7 ) с более высокими частотами или случайным образом интегрируются посредством другого взаимоисключающего механизма (Peters, 2014).Однако сайт вставки системы CRISPR, кодируемой транспозоном, расположен на фиксированном расстоянии ниже PAM целевого локуса. Cas12k, который потерял свою активность ДНКазы, не просто играет роль распознавания, направляемого РНК. Когда Cas12k был заменен на Cas9, не было явления транспозиции, что указывает на то, что Cas12k и комплекс транспозазы обладают эффектом активации связывания (Strecker et al., 2019b). Хотя Cas12k не разрушает сайт-мишень после связывания с ДНК-мишенью, он обладает таким же целевым иммунным эффектом, что и каноническая транспозаза Tn7, предотвращая множественные вставки.Следовательно, система типа V-K будет вставлять ген груза только один раз в определенной ориентации в то же самое положение (Stellwagen and Craig, 1997; Skelding et al., 2003).

Приложения, основанные на распознавании дцДНК

Редактирование генома

Как РНК-зависимая нуклеаза, специфичная для последовательности, белок Cas был разработан в качестве инструмента для редактирования генов в начале исследований в этой области (Ran et al., 2013b). Одна или несколько плазмид экспрессируют эффекторный белок и искусственную гРНК, индуцируют DSB определенным пользователем способом и восстанавливают повреждение ДНК посредством негомологичного соединения концов (NHEJ) или гомологически-направленной рекомбинации (HDR) (Pawelczak et al., 2018). В отсутствие матрицы ДНК неточная репарация на основе NHEJ будет вводить случайные инделки нескольких нуклеотидов в сайт расщепления. Возникающие в результате мутации сдвига рамки считывания обычно приводят к инактивации гена. В присутствии гомологичных матриц HDR может обеспечить замену, вставку, делецию генов и другие бесследные генетические манипуляции (рис. 3A). На сегодняшний день набор инструментов для генетических манипуляций на основе Cas12a и Cas12b из семейства типа V успешно применяется у млекопитающих, растений и бактерий (Таблица 2).

Рисунок 3 . Редактирование генов и регуляция транскрипции. (A) Белок Cas в указанном пользователем сайте заставляет DSB обеспечивать бесперебойную работу в заданном месте через NHEJ или HDR. (B) Левая часть изображения представляет собой опосредованную CRISPR активацию транскрипции (CRISPRa), а правая часть — опосредованную CRISPR репрессию транскрипции (CRISPRi). Транскрипция контрольного гена осуществляется за счет увеличения и потери РНК-полимеразы соответственно.

Таблица 2 .Сводка организмов, чьи геномы были успешно отредактированы с помощью Cas12a и Cas12b.

Они, как добавки к Cas9, применялись во многих организмах, несовместимых с Cas9 (Ungerer and Pakrasi, 2016; Jiang et al., 2017). Упомянутые выше белки Cas, которые были подтверждены только биохимией с возможностью нацеленного на дцДНК расщепления, также могут действовать как альтернативы. Эти белки Cas типа V распознают совершенно отличный от Cas9 PAM, расширяя диапазон нацеливания, а липкие концы, образующиеся в PAM-дистальном положении, способствуют эффективности восстановления HDR (Fagerlund et al., 2015; Морено-Матеос и др., 2017). Кроме того, по сравнению с Cas9, Cas12a показывает более низкую частоту нецелевых событий (Kim D. et al., 2016; McMahon and Rahdar, 2021).

Система CRISPR-Cas более удобна для редактирования генов по сравнению с двумя предыдущими поколениями технологии целевого редактирования генов, нуклеазами «цинковые пальцы» (ZFN) и эффекторными нуклеазами, подобными активаторам транскрипции (TALEN), но она не лишена собственные ограничения. DSB, индуцированные нуклеазами, специфичными для последовательности, в сайтах-мишенях, фатальны для организмов без эффективных NHEJ или HDR (Xu et al., 2015). Чтобы преодолеть это ограничение, исследователи попытались соединить различные транспозазы с каталитически инактивированным dCas9 (сайт-специфические мутации были введены в домены HNH и RuvC, чтобы отменить активность расщепления, не влияя на целевой эффект связывания), чтобы получить серию слитых белков dCas9-транспозаза. [например, dCas9- Himar1 (Chen and Wang, 2019), dCas9- piggyBac (Hew et al., 2019) и dCas9- Sleeping Beauty (Kovač et al., 2020)].Эти слияния ограничивают случайную вставку транспозазы, так что транспозиция происходит только рядом с точкой, на которую нацелен dCas9. Хотя реакция транспозиции не зависит от способности хозяина к репарации DSB, ограничения слитого белка за счет PAM dCas9 и горячей точки вставки транспозазы делают этот инструмент менее гибким. Например, dCas9-Himar1 требует динуклеотида ТА в пределах 15 п.н. позади 5′-конца гРНК (Chen and Wang, 2019).

Сайт встраивания системы CRISPR типа V-K связан только с целевым положением гРНК, и предпочтение в горячих точках отсутствует (Strecker et al., 2019b). Это делает рабочий диапазон этой системы более обширным, и система типа V-K уже успешно использовалась в качестве программируемого инструмента редактирования генов в Escherichia coli . Путем биохимических экспериментов было обнаружено, что фермент Cas12k этой ассоциированной с транспозоном системы CRISPR типа V предпочтительно распознает 5′-GTN PAM. Гены-карго вставляются однонаправленно в положениях 60–66 ниже PAM, и эффективность встраивания гена карго размером 2 т.п.н. может достигать 80% без скрининга на антибиотики.Хотя система типа VK, которая может интегрировать экзогенные гены в определенное положение, полагается на самодостаточный механизм, как LE / RE, так и повторяющаяся последовательность из 5 п.н., генерируемая путем транспозиции, неизбежно встраиваются вместе, что приводит к избыточности в геноме ( Strecker et al., 2019b). Это главное препятствие для широкого применения типа V-K и цель будущей оптимизации.

Регламент транскрипции

Мутация остатков активного сайта в нуклеазном домене RuvC нуклеаз Cas семейства V может быть использована для получения деактивированных белков Cas (dCas).Управляемый gRNA белок dCas связывается только с целевым сайтом и не проявляет нуклеазной активности. Когда dCas нацелен на промоторную область или кодирующую область структурного гена, он ингибирует транскрипцию гена, конкурируя с РНК-полимеразой за связывание промотора или блокируя миграцию полимеразы. Полученный в результате метод репрессии генов известен как CRISPR-интерференция (CRISPRi) (рис. 3B) (Kim et al., 2017; Zhang et al., 2017). Кроме того, белки dCas можно использовать в качестве нацеливающих групп для доставки функционального белка в определенные локусы, включая факторы транскрипции, активаторы транскрипции и субъединицы РНК-полимеразы.Когда слитый белок направлен на надлежащее расстояние от сайта начала транскрипции гена (TSS), экспрессия гена может быть улучшена за счет взаимодействия между этими функциональными белками и РНК-полимеразой. Этот инструмент активации транскрипции, основанный на системе CRISPR – Cas, называется CRISPRa (рис. 3B). Появление CRISPRi и CRISPRa предоставляет удобные инструменты для характеристики функций генов и регуляции метаболизма (Liu W. et al., 2019; Martella et al., 2019).

Как упоминалось выше, активность РНКазы Cas12a может обрабатывать настроенный массив CRISPR.Zhang et al. сконструировали массив CRISPR для нацеливания на четыре локуса, и dCas12a успешно ингибировал несколько генов одновременно. Более того, эффективность одновременной репрессии четырех генов была аналогична эффективности репрессии выделенного гена (Zhang et al., 2017). Zhang J. L. et al. (2018) использовали три crRNA для согласованного нацеливания на один и тот же ген, что увеличило эффективность репрессии в 6,7 раза. Кроме того, Cas12a был разработан в многоцелевой инструмент. Например, Adithya et al. обнаружили, что когда длина crRNA <16 п.н., Cas12a может связываться с целевым сайтом без расщепления.Исходя из этого, редактирование генов и CRISPRi могут быть реализованы одновременно путем последовательного переноса crРНК разной длины (Ramesh et al., 2020). Wu et al. достигли репрессии и активации нескольких генов одновременно. Когда dCas12a-RemA (разновидность фактора транскрипции) связывается с crRNA, нацеленной на гены, он успешно подавляет гены. Когда dCas12a-RemA связывается с crRNA, нацеленной выше TSS, он успешно повышает экспрессию гена (Wu Y. et al., 2020).

Базовое редактирование

Применение технологии CRISPR привело к огромному прогрессу в генной инженерии, но точное редактирование отдельных нуклеотидов все еще остается проблемой. Для достижения этой цели крысиные цитозиндезаминазы APOBEC и ингибитор урацил-ДНК-гликозилазы (UDG) (UGI) были соответственно слиты с N- и C-концом dCas12a. После связывания dCas12a с сайтом-мишенью образуется R-петля, и некомплементарная цепь оцДНК обеспечивает каталитический субстрат для APOBEC.Следовательно, цитозин (C) в положении 8-13 нуклеотидов ниже PAM дезаминировался до урацила (U), и предыдущая пара оснований C – G была успешно заменена на пару оснований A – T после репликации ДНК. В то же время C-концевой UGI может ингибировать эксцизионную репарацию оснований с помощью UDG и увеличивать скорость мутаций (рис. 4A) (Banno et al., 2018). Та же стратегия была применена к dCas9, но исследователи обнаружили, что опосредованная dCas12a BE имеет более высокую эффективность редактирования и более низкую частоту отклонений от цели (Li X. et al., 2018). Хотя он может повысить эффективность BE для замены dCas9 на nCas9, никазная активность nCas9 приводит к ответу на повреждение ДНК (DDR) (Wang et al., 2020a). Целевые хромосомные одноосновные мутации, выполнимые с помощью этого редактора баз на основе CRISPR, имеют большое прикладное значение в белковой инженерии и генной терапии.

Рисунок 4 . Схема редактирования базы и принцип обнаружения нуклеиновых кислот. (A) Когда UGI используется для ингибирования эксцизионной репарации основания хозяина, APOBEC катализирует превращение C в U с более высокой эффективностью, а после репликации ДНК пара оснований G – C заменяется на основание A – U (T). пара. (B) Нуклеиновая кислота-мишень подвергается предварительной амплификации для увеличения ее концентрации и расщепляется белком Cas для активации активности транс-расщепления белка Cas и разлагает зонд для высвобождения сигнала обнаружения.

Нацеливание на оцДНК семейством типа V

Специфическая активность расщепления оцДНК

Многие из эффекторных белков CRISPR, нацеленных на dsDNA, принадлежащих к классу II, показали одновременное расщепление in vivo и in vitro in vitro (Ma et al., 2015). Эта активность расщепления оцДНК не ограничивается PAM. Пока целевой субстрат комплементарен направляющей последовательности крРНК, он будет работать. Недавно идентифицированная система типа VF встречается почти только в группе архей, характеризующихся небольшими размерами клеток и генома, и сигнатурный белок Cas14 этой системы также очень компактен, около 400-700 аминокислот, что составляет половину размера эффектора. белки в других системах типа V. Зрелые tracrRNA и crRNA были получены посредством анализа мета-транскриптомной последовательности окружающей среды.Когда эти гены экспрессировались в гетерологичном хозяине, хотя Cas14 мог успешно связывать гРНК с образованием бинарного комплекса, не наблюдали каталитической активности ни с одно-, ни с двухцепочечной ДНК, ни с РНК in vivo . Однако, когда очищенный бинарный комплекс Cas14-sgRNA инкубировали с комплементарной ssDNA in vitro , наблюдалась активность расщепления (Harrington et al., 2018; Savage, 2019). Хотя каталитическая активность in vivo Cas14 пока не обнаружена, это может быть связано с отсутствием некоторых ключевых факторов, содержащихся в естественном хозяине Cas14, что заслуживает дальнейшего изучения.Это также означает, что целевое расщепление оцДНК является широко распространенной и, возможно, наследственной функцией.

Неспецифическая активность расщепления оцДНК

типа V обладают уникальной неспецифической активностью расщепления оцДНК (таблица 1). После того, как эффекторный белок расщепляет целевое вещество дцДНК, PAM-дистальный продукт высвобождается, но Cas-белок все еще связан с PAM-проксимальной цепью. На этом этапе домен RuvC все еще может получать доступ к субстратам оцДНК и выполнять неспецифическое расщепление, которое также известно как беспорядочное расщепление коллатеральной оцДНК или транс-расщепление (Li et al., 2018а; Лю Дж. Дж. И др., 2019; Свартс и Джинек, 2019).

Приложения, основанные на активности расщепления оцДНК

Платформа обнаружения нуклеиновых кислот

Транс-действующая активность ДНКазы, индуцированная ДНК-специфическим распознаванием, была развита в платформе обнаружения ДНК с использованием гашеной флуоресцентной оцДНК в качестве зонда. Когда родственная мишень присутствует в системе, Cas12a разделяет объекты-мишени для активации активности транс-расщепления, тем самым также расщепляя окружающие зонды, чтобы высвободить детектируемую флуоресцентную молекулу (рис. 4B).Предварительная амплификация целевой последовательности с помощью изотермической рекомбиназо-полимеразной амплификации (RPA) или петлевой изотермической амплификации (LAMP) может улучшить чувствительность, а предел обнаружения желаемой ДНК или РНК может быть всего лишь 10 мкМ (аттомолярный) (Li et al., 2018b). После постоянной оптимизации этой системы обнаружения и повышения специфичности распознавания система широко использовалась для распознавания однонуклеотидных полиморфизмов (Teng et al., 2019a) и генотипирования (Harrington et al., 2018) и обнаружение вирусов, таких как коронавирус 2 тяжелого острого респираторного синдрома (SARS-CoV-2) (Broughton et al., 2020; Wang et al., 2020b).

Платформа для обнаружения малых молекул

Liang et al. объединили чувствительность аллостерических факторов транскрипции (aTF) к малым молекулам с неспецифической активностью расщепления оцДНК Cas12a, чтобы разработать платформу для обнаружения малых молекул, названную CaT-SMelor (CRISPR-Cas12a и детектор малых молекул, опосредованный aTF). Хорошо известно, что aTF имеют эффектор-связывающий домен и ДНК-связывающий домен.После предварительной сборки хорошо сконструированной дцДНК, которая может распознаваться Cas12a с помощью aTF, целевая малая молекула может связываться с aTF, который затем высвобождает дцДНК. Cas12a, в свою очередь, связывается с высвобожденной дцДНК и активирует транс-активность, чтобы разрезать близлежащую гашеную флуоресцентно меченую оцДНК и генерировать флуоресцентный сигнал обнаружения. Эта система может успешно отличать наномолярные уровни целевых молекул от структурно подобного аналога (Liang et al., 2019).

Нацеливание на оцРНК семейством типа V

Тип V-G — это недавно идентифицированная система CRISPR с небольшим сигнатурным белком Cas12g, который имеет интактный RuvC-подобный эндонуклеазный домен на С-конце (Yan et al., 2019). Однако активность расщепления оцДНК или дцДНК не была обнаружена ни in vivo, , ни in vitro , когда Cas12g инкубировали с crRNA и tracrRNA. Неожиданно, когда субстраты были заменены родственной ssRNA, Cas12 проявлял целенаправленную активность расщепления без ограничения последовательности PAM. Более того, после связывания с целевой РНК активность транс-расщепления активировалась для неспецифического расщепления окружающей оцРНК. Инактивация домена RuvC определила, что активность расщепления РНК Cas12g зависит от интактного домена RuvC, опровергая предыдущую теорию о том, что домен RuvC может действовать только на субстраты ДНК.Хотя эффекторный белок Cas13 системы CRISPR типа VI также обладает активностью расщепления, направленной на РНК, он разрезает РНК через двух доменов HEPN (Liu et al., 2017).

Приложения, основанные на распознавании оцРНК

Cas12g имеет аналогичные функции с Cas13, включая РНК-управляемое нацеливание на РНК и активность трансколебания. При дальнейшем изучении Cas13 был разработан ряд инструментов, специфичных для РНК. Cas12g также имеет полный соответствующий потенциал развития, и его размер составляет всего 700 а.о.Более того, его происхождение из метагенома горячих источников придает ему высокую термическую стабильность.

Платформа для обнаружения нуклеиновых кислот на основе РНК

Gootenberg et al. разработали платформу для обнаружения нуклеиновых кислот на основе фермента CRISPR типа VI Cas13. Система основана на предварительной амплификации образцов ДНК или РНК с помощью RPA или RT-RPA, транскрипции РНК-полимеразы Т7 амплифицированной ДНК в РНК и обнаружении с помощью Cas13 посредством коллатерального расщепления зонда оцРНК (Gootenberg et al., 2017). Хотя Cas13 и Cas12a могут использовать только РНК и ДНК в качестве матриц распознавания, соответственно, из-за этапов амплификации и гибкого использования транскрипции и обратной транскрипции, эти две платформы обнаружения могут обнаруживать образцы, исходными субстратами которых являются ДНК или РНК.Следовательно, если образец не может быть амплифицирован и трансформирован или цель обнаружения не позволяет выполнить этап предварительной амплификации, обнаружение ДНК или РНК требует разделения двух платформ. Например, Chen et al. использовали платформу обнаружения нуклеиновых кислот для мониторинга степени метилирования РНК. Поскольку метилированные нуклеотиды не комплементарны crRNA, интенсивность флуоресцентного сигнала отражает степень метилирования РНК (Chen Y. et al., 2019). Для этой цели платформа обнаружения нуклеиновых кислот РНК на основе Cas13 является единственным вариантом, доступным на сегодняшний день.Если Cas12g вместо Cas13 будет разработан как портативный набор для обнаружения РНК in vitro , термическая стабильность является потенциальным преимуществом (Chen et al., 2020).

Редактирование одного основания РНК

Аденозиндезаминаза, действующая на РНК типа 2 (ADAR2), имеет N-концевой дцРНК-связывающий домен и С-концевой домен каталитического дезаминирования, который можно комбинировать с дцРНК для достижения превращения аденозина в инозин посредством гидролитического дезаминирования. Кроме того, домен дезаминазы ADAR2 (ASAR2 _DD ) может функционировать независимо без других кофакторов.Cox et al. привязали гиперактивирующий мутант ADAR2 _DD к каталитически неактивному Cas13b (dCas13b) и сконструировали гРНК для введения несоответствий A: C в желаемый сайт (характеристики ADAR2, более высокая каталитическая активность для сайтов несовпадения A: C на дцРНК) для достижения точного редактирования от A до I у млекопитающих (Cox et al., 2017). Путем нескольких раундов эволюции ADAR2 _DD , команда получила цитозиндезаминазу со способностью преобразовывать цитозин в урацил и слила эту развитую цитидиндезаминазу с dCas13, чтобы разработать программируемый инструмент редактирования РНК для специфического обмена C на U (Abudayyeh et al. ., 2019; Акино-Жаркин, 2020). Было показано, что Cas13b свободен от ограничений PFS (сайт, фланкирующий протоспейсер, параллельный PAM в классе II) в клетках млекопитающих, по сравнению с редакторами оснований ДНК, где сайт-мишень ограничен PAM. Редактор баз РНК на основе Cas13 более гибкий и расширяет диапазон мишеней в генной терапии, но по-прежнему сталкивается с проблемами доставки вирусов. Cas12g не только не имеет ограничений PAM, но и минимизация системы с помощью Cas12g является потенциальной возможностью оптимизации.

Заключение и прогноз

Среди разнообразных систем CRISPR – Cas класс 2 находит наиболее широкое применение, поскольку в нем имеется только один эффекторный белок. Система CRISPR – Cas типа V стала яркой звездой благодаря растущему семейству типов V и разнообразию ее функций. Тем не менее, в практических приложениях использовались только самые ранние Cas12a и Cas12b. В этом обзоре мы суммируем все системы семейства V типа, обнаруженные к настоящему времени, и обсуждаем их характеристики в таксономической манере.Некоторые из этих недавно открытых Cas-белков семейства V могут быть использованы в качестве кандидатов в новых стратегиях применения, которые разрабатываются в настоящее время. Некоторые из их уникальных свойств, такие как высокая чувствительность к рассогласованию, малый размер и термическая стабильность, могут способствовать дальнейшей оптимизации этих инструментов.

За исключением Cas12a, Cas12b и Cas12e, N-концевой домен и кристаллические структуры других Cas-белков семейства V не были разрешены. Посредством сравнения Cas12a, Cas12b и Cas12e нетрудно понять, что разнообразие N-концевого домена белка Cas отражает различия в механизме действия и эффекте расщепления.Дальнейший анализ структуры этих белков Cas дополнительно выявит взаимосвязь между структурой и функцией, что будет способствовать дальнейшему развитию и оптимизации системы CRISPR – Cas.

Помимо типа V-U5, неизвестны функции нескольких других подтипов семейства типов V-U (типы V-U1, V-U2, V-U3, V-U4). За необычным может родиться удивление. Кроме того, эффекторные белки в этих семействах очень похожи на TnpB, поэтому дальнейшие исследования семейства типов V-U помогут объяснить, как эффекторы CRISPR-Cas произошли от TnpB.

Авторские взносы

BT написал рукопись и провел все необходимые литературные поиски. HD, YC и PJ провели необходимый поиск литературы. ZJ отредактировал рукопись и дал ценные предложения. DZ разработал рецензию, рассмотрел ее и утвердил представленную рукопись.

Финансирование

Это исследование финансировалось Национальной программой ключевых исследований и разработок Китая в рамках гранта № 2018YFA0

0, Национальным фондом естественных наук Китая в рамках гранта №№.31670604, 31970324 и 31800086, Фонд естественных наук провинции Ляонин, Китай, грант № 201

58, Проект повышения инновационного потенциала в области синтетической биотехнологии в Тяньцзине, грант № TSBICIP-KJGG-004-03, Тяньцзиньский научный фонд для выдающихся молодых ученых в рамках гранта № 17JCJQJC45300 и научно-технического проекта департамента образования провинции Ляонин в рамках гранта № 81

Конфликт интересов

Авторы заявляют, что исследование проводилось при отсутствии каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могут быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

Список литературы

Abudayyeh, O.O., Gootenberg, J. S., Franklin, B., Koob, J., Kellner, M.J., Ladha, A., et al. (2019). Цитозиндезаминаза для программируемого редактирования одноосновной РНК. Science 365, 382–386. DOI: 10.1126 / science.aax7063

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Аль-Шайеб Б., Сачдева Р., Чен Л. X., Уорд Ф., Мунк П., Девото А. и др. (2020). Клады огромных фагов со всех экосистем Земли. Природа 578, 425–431. DOI: 10.1038 / s41586-020-2007-4

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Банно С., Нисида К., Аразоэ Т., Мицунобу Х. и Кондо А. (2018). Мультиплексное редактирование генома, опосредованное дезаминазой, в Escherichia coli . Nat. Microbiol. 3, 423–429. DOI: 10.1038 / s41564-017-0102-6

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Бротон, Дж. П., Дэн, Х., Ю, Г., Фашинг, К.Л., Сервеллита В., Сингх Дж. И др. (2020). Обнаружение SARS-CoV-2 на основе CRISPR-Cas12. Nat. Biotechnol. 38, 870–874. DOI: 10.1038 / s41587-020-0513-4

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Бурштейн, Д., Харрингтон, Л. Б., Струт, С. К., Пробст, А. Дж., Анантараман, К., Томас, Б. С., и др. (2017). Новые системы CRISPR-Cas от некультивируемых микробов. Природа 542, 237–241. DOI: 10.1038 / nature21059

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Чен, Л.X., Аль-Шайеб, Б., Мехеуст, Р., Ли, У. Дж., Дудна, Дж. А., и Банфилд, Дж. Ф. (2019). Кандидаты в филы радиационных roizmanbacteria из горячих источников обладают новыми и неожиданно многочисленными системами CRISPR-Cas. Фронт. Microbiol. 10: 928. DOI: 10.3389 / fmicb.2019.00928

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Чен, К. Л. Р., Львов, П., Ли, Х., Хуанг, Д., Хэ, П., и Чжан, Ю. (2020). Быстрое обнаружение следов нанофлуоресценции специфического фрагмента нуклеиновой кислоты на основе CRISPR-Cas12g включает e.г. использование специфических фрагментов нуклеиновых кислот в биологических образцах в качестве объекта исследования для подготовки мишеней нуклеиновых кислот и тушение. Патент Китая № CN111378722-A . Пекин: Национальное управление интеллектуальной собственности Китая.

Чен С. П. и Ван Х. Х. (2019). Сконструированная система Cas-транспозонов для программируемых и сайт-направленных транспозиций ДНК. CRISPR J. 2, 376–394. DOI: 10.1089 / crispr.2019.0030

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Чен, Ю., Ян, С., Пэн, С., Ли, В., Ву, Ф., Яо, К. и др. (2019). Обнаружение N1-метиладенозина с помощью CRISPR-Cas13a / C2c2. Chem. Sci. 10, 2975–2979. DOI: 10.1039 / C8SC03408G

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Cox, D. B. T., Gootenberg, J. S., Abudayye, O. O., Franklin, B., Kellner, M. J., Joung, J., et al. (2017). Редактирование РНК с помощью CRISPR-Cas13. Наука 358, 1019–1027. DOI: 10.1126 / science.aaq0180

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Донг, Д., Ren, K., Qiu, X., Zheng, J., Guo, M., Guan, X., et al. (2016). Кристаллическая структура Cpf1 в комплексе с CRISPR РНК. Природа 532, 522–526. DOI: 10.1038 / природа17944

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Фор, Г., Шмаков, С. А., Ян, В. X., Ченг, Д. Р., Скотт, Д. А., Петерс, Дж. Э. и др. (2019). CRISPR-Cas в мобильных генетических элементах: контрзащита и не только. Nat. Rev. Microbiol. 17, 513–525. DOI: 10.1038 / s41579-019-0204-7

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ференци, А., Пётт, Д. Э., Шипнитоу, А., Мольнар, А. (2017). Эффективное целевое редактирование и замена ДНК в Chlamydomonas reinhardtii с использованием рибонуклеопротеидов Cpf1 и одноцепочечной ДНК. Proc. Natl. Акад. Sci. США 114, 13567–13572. DOI: 10.1073 / pnas.1710597114

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Фернандес, Дж. П., Вейнар, К. Э., Хиралдес, А. Дж., Руэ, Р., и Морено-Матеос, М. А. (2018). Оптимизированная система CRISPR-Cpf1 для редактирования генома у рыбок данио. Методы 150, 11–18. DOI: 10.1016 / j.ymeth.2018.06.014

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Фонфара И., Рихтер Х., Братович М., Ле Рун А. и Шарпантье Э. (2016). Связанный с CRISPR ДНК-расщепляющий фермент Cpf1 также обрабатывает предшественник CRISPR РНК. Природа 532, 517–521. DOI: 10.1038 / природа17945

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Гао, П., Ян, Х., Раджашанкар, К. Р., Хуанг, З., и Патель, Д. Дж. (2016). Эндонуклеаза CRISPR-Cas Cpf1 типа V использует уникальный механизм распознавания целевой ДНК, опосредованного crРНК. Cell Res. 26, 901–913. DOI: 10.1038 / cr.2016.88

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Gootenberg, J. S., Abudayye, O. O., Lee, J. W., Essletzbichler, P., Dy, A.J., Joung, J., et al. (2017). Обнаружение нуклеиновых кислот с помощью CRISPR-Cas13a / C2c2. Наука 356, 438–442. DOI: 10.1126 / science.aam9321

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Гаджизаде Дастджерди, А., Ньюман, А., Берджио, Г. (2019). Расширяющийся набор инструментов CRISPR класса 2: разнообразие, применимость и недостатки адресности. BioDrugs 33, 503–513. DOI: 10.1007 / s40259-019-00369-y

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Харрингтон, Л. Б., Бурштейн, Д., Чен, Дж. С., Паез-Эспино, Д., Ма, Э., Витте, И. П. и др. (2018). Запрограммированное разрушение ДНК миниатюрными ферментами CRISPR-Cas14. Наука 362, 839–842. DOI: 10.1126 / science.aav4294

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Харрингтон, Л.Б., Ма, Э., Чен, Дж. С., Витте, И. П., Герц, Д., Паез-Эспино, Д. и др. (2020). Для некоторых систем CRISPR-Cas типа V требуется scoutRNA. Мол. Ячейка 79, 416–424 e415. DOI: 10.1016 / j.molcel.2020.06.022

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Хонг, В., Чжан, Дж., Цуй, Г., Ван, Л., и Ван, Ю. (2018). Мультиплексное редактирование генома с помощью CRISPR-Cpf1 в Clostridium difficile в направлении понимания патогенеза C.difficile . ACS Synth. Биол. 7, 1588–1600. DOI: 10.1021 / acssynbio.8b00087

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Jeon, Y., Choi, Y.H., Jang, Y., Yu, J., Goo, J., Lee, G., et al. (2018). Прямое наблюдение за поиском и расщеплением ДНК-мишени с помощью CRISPR-Cas12a. Nat. Commun. 9: 2777. DOI: 10.1038 / s41467-018-05245-x

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Цзян Ю., Цянь Ф., Янг, Дж., Лю, Ю., Донг, Ф., Сюй, К., и др. (2017). CRISPR-Cpf1 способствовал редактированию генома Corynebacterium glutamicum . Nat. Commun. 8: 15179. DOI: 10.1038 / ncomms15179

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст

Jinek, M., Jiang, F., Taylor, D. W., Sternberg, S.H., Kaya, E., Ma, E., et al. (2014). Структуры эндонуклеаз Cas9 обнаруживают РНК-опосредованную конформационную активацию. Наука 343: 1247997. DOI: 10.1126 / science.1247997

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ким, Д., Ким, Дж., Хур, Дж. К., Бен, К. В., Юн, С. Х. и Ким, Дж. С. (2016). Полногеномный анализ показывает специфичность эндонуклеаз Cpf1 в клетках человека. Nat. Biotechnol. 34, 863–868. DOI: 10.1038 / NBT.3609

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ким, С. К., Ким, Х., Ан, В. К., Парк, К. Х., Ву, Э. Дж., Ли, Д. Х. и др. (2017). Эффективная репрессия транскрипционного гена с помощью CRISPR-Cpf1 типа V-A из Eubacterium eligens. ACS Synth. Биол. 6, 1273–1282.DOI: 10.1021 / acssynbio.6b00368

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ким, Ю., Чеонг, С. А., Ли, Дж. Г., Ли, С. В., Ли, М. С., Бэк, И. Дж. И др. (2016). Создание мышей с нокаутом путем нацеливания на гены, опосредованного Cpf1. Nat. Biotechnol. 34, 808–810. DOI: 10.1038 / NBT.3614

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Кунин Е.В., Макарова К.С., Вольф Ю.И. (2017). Эволюционная геномика защитных систем архей и бактерий. Annu. Rev. Microbiol. 71, 233–261. DOI: 10.1146 / annurev-micro-0

-093830

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ковач, А., Миски, К., Мензель, М., Груэзо, Э., Гоголь-Деринг, А., и Ивиц, З. (2020). РНК-управляемое перенацеливание транспозиции «Спящей красавицы» в человеческие клетки. Элиф 9: e53868. DOI: 10.7554 / eLife.53868.sa2

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ли Б., Руи Х., Ли Ю., Ван, К., Аларики, М., Цинь, Л. и др. (2019). Надежное редактирование генома с помощью CRISPR / Cpf1 (Cas12a) аллотетраплоидного хлопка ( Gossypium hirsutum ). Plant Biotechnol. J. 17, 1862–1864. DOI: 10.1111 / pbi.13147

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ли, Л., Вэй, К., Чжэн, Г., Лю, X., Чен, С., Цзян, В., и др. (2018). Мультиплексное редактирование генома с помощью CRISPR-Cpf1 и репрессия транскрипции у стрептомицетов. Заявл. Environ.Microbiol. 84: e00827-18 DOI: 10.1128 / AEM.00827-18

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ли, С. Ю., Ченг, К. Х., Лю, Дж. К., Не, Х. К., Чжао, Г. П., и Ван, Дж. (2018a). CRISPR-Cas12a обладает активностью как цис-, так и транс-расщепления одноцепочечной ДНК. Cell Res. 28, 491–493. DOI: 10.1038 / s41422-018-0022-x

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ли, С. Ю., Ченг, К. X., Ван, Дж. М., Ли, X.Ю., Чжан, З. Л., Гао, С. и др. (2018b). Обнаружение нуклеиновых кислот с помощью CRISPR-Cas12a. Cell Discov. 4:20. DOI: 10.1038 / s41421-019-0083-0

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст

Ли, X., Wang, Y., Liu, Y., Yang, B., Wang, X., Wei, J., et al. (2018). Редактирование базы с помощью слияния Cpf1-цитидиндезаминазы. Nat. Biotechnol. 36, 324–327. DOI: 10.1038 / NBT.4102

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ли, З.Х., Лю, М., Ван, Ф.К., и Вэй, Д.З. (2018). Эффективная геномная интеграция собранных in vivo частей ДНК в Saccharomyces cerevisiae с помощью Cpf1. Biotechnol. Lett. 40, 1253–1261. DOI: 10.1007 / s10529-018-2574-8

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Liang, M., Li, Z., Wang, W., Liu, J., Liu, L., Zhu, G., et al. (2019). Платформа биочувствительности на основе CRISPR-Cas12a для высокочувствительного обнаружения различных небольших молекул. Nat.Commun. 10: 3672. DOI: 10.1038 / s41467-019-11648-1

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст

Лю Дж. Дж., Орлова Н., Оукс Б. Л., Ма, Э., Спиннер, Х. Б., Бэйни, К. Л. М. и др. (2019). Ферменты CasX составляют отдельное семейство редакторов генома, управляемых РНК. Природа 566, 218–223. DOI: 10.1038 / s41586-019-0908-x

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Лю Л., Ли, X., Ван, Дж., Ван, М., Чен, П., Инь, М., и др.(2017). За активность C2c2 РНКазы отвечают два удаленных каталитических сайта. Ячейка 168, 121–134.e112. DOI: 10.1016 / j.cell.2016.12.031

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Лю В., Тан Д., Ван Х., Лиан Дж., Хуанг Л. и Сюй З. (2019). Комбинированное редактирование генома и репрессия транскрипции для инженерии метаболических путей в Corynebacterium glutamicum с использованием каталитически активного Cas12a. Заявл. Microbiol. Biotechnol. 103, 8911–8922. DOI: 10.1007 / s00253-019-10118-4

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ма, Э., Харрингтон, Л. Б., О’Коннелл, М. Р., Чжоу, К., и Дудна, Дж. А. (2015). Расщепление одноцепочечной ДНК дивергентными ферментами CRISPR-Cas9. Мол. Ячейка 60, 398–407. DOI: 10.1016 / j.molcel.2015.10.030

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Макарова К.С., Вольф Ю.И., Алхнбаши О.С., Коста Ф., Шах С.A., Saunders, S.J. и др. (2015). Обновленная эволюционная классификация систем CRISPR-Cas. Nat. Rev. Microbiol. 13, 722–736. DOI: 10.1038 / nrmicro3569

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Malzahn, A.A., Tang, X., Lee, K., Ren, Q., Sretenovic, S., Zhang, Y., et al. (2019). Применение температурной чувствительности CRISPR-Cas12a для улучшения редактирования генома риса, кукурузы и арабидопсиса. BMC Biol. 17: 9. DOI: 10.1186 / s12915-019-0629-5

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Мартелла, А., Ферт, М., Тейлор, Б. Дж. М., Гепперт, А., Куомо, Э. М., Рот, Р. Г. и др. (2019). Систематическая оценка модальностей CRISPRa и CRISPRi позволяет разработать мультиплексную ортогональную систему активации и репрессии генов. ACS Synth. Биол. 8, 1998–2006. DOI: 10.1021 / acssynbio.8b00527

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ming, M., Ren, Q., Pan, C., He, Y., Zhang, Y., Liu, S., et al. (2020). CRISPR-Cas12b обеспечивает эффективную инженерию генома растений. Nat. Растения 6, 202–208. DOI: 10.1038 / s41477-020-0614-6

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Морено-Матеос, М.А., Фернандес, Дж. П., Руэ, Р., Вейнар, К. Э., Лейн, М. А., Мис, Э. и др. (2017). CRISPR-Cpf1 обеспечивает эффективную гомологически направленную репарацию и контролируемое температурой редактирование генома. Nat. Commun. 8: 2024. DOI: 10.1038 / s41467-017-01836-2

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст

Муруган, К., Бабу К., Сундаресан Р., Раджан Р. и Сашитал Д. Г. (2017). Революция продолжается: недавно обнаруженные системы расширяют набор инструментов CRISPR-Cas. Мол. Ячейка 68, 15–25. DOI: 10.1016 / j.molcel.2017.09.007

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ниссим, Л., Перли, С. Д., Фридкин, А., Перес-Пинера, П., и Лу, Т. К. (2014). Мультиплексная и программируемая регуляция генных сетей с помощью интегрированного инструментария РНК и CRISPR / Cas в клетках человека. Мол.Cell 54, 698–710. DOI: 10.1016 / j.molcel.2014.04.022

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Niu, T. C., Lin, G. M., Xie, L. R., Wang, Z. Q., Xing, W. Y., Zhang, J. Y., et al. (2019). Расширение возможностей технологии редактирования генома на основе CRISPR-Cpf1 в cyanobacterium anabaena PCC 7120. ACS Synth. Биол. 8, 170–180. DOI: 10.1021 / acssynbio.8b00437

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Нуньес, Дж.К., Ли, А.С., Энгельман, А., Дудна, Дж. А. (2015). Получение опосредованного интегразой спейсера во время адаптивного иммунитета CRISPR-Cas. Природа 519, 193–198. DOI: 10.1038 / природа14237

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Пауш П., Аль-Шайеб Б., Бисом-Рапп Э., Цучида К. А., Ли З., Кресс Б. Ф. и др. (2020). CRISPR-CasΦ от огромных фагов — гиперкомпактный редактор генома. Наука 369, 333–337. DOI: 10.1126 / science.abb1400

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Павелчак, К.С., Гаванде, Н. С. П. С., Вандервере-Кароцца и Турчи, Дж. Дж. (2018). Модуляция путей репарации ДНК для повышения точности инженерии генома. ACS Chem. Биол. 13, 389–396. DOI: 10.1021 / acschembio.7b00777

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Рамеш А., Онг Т., Гарсия Дж. А., Адамс Дж. И Уилдон И. (2020). Инженерия направляющей РНК позволяет использовать CRISPR-Cpf1 двойного назначения для одновременного редактирования и регулирования генов в Yarrowia lipolytica . ACS Synth. Биол. 9, 967–971. DOI: 10.1021 / acssynbio.9b00498

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ран, Ф. А., Сюй, П. Д., Лин, С. Ю., Гутенберг, Дж. С., Конерманн, С., Тревино, А. Е. и др. (2013a). Двойное проникновение с помощью CRISPR Cas9 под управлением РНК для повышения специфичности редактирования генома. Cell 154, 1380–1389. DOI: 10.1016 / j.cell.2013.08.021

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ран, Ф.А., Сюй, П. Д., Райт, Дж., Агарвала, В., Скотт, Д. А., и Чжан, Ф. (2013b). Геномная инженерия с использованием системы CRISPR-Cas9. Nat. Protoc. 8, 2281–2308. DOI: 10.1038 / nprot.2013.143

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Сакума, Т., Нисикава, А., Куме, С., Чаяма, К., Ямамото, Т. (2014). Мультиплексная геномная инженерия в клетках человека с использованием комплексной векторной системы CRISPR / Cas9. Sci. Отчет 4: 5400. DOI: 10.1038 / srep05400

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст

Шундер, Э., Рыдзевский, К., Грунов, Р., Хойнер, К. (2013). Первое показание для функциональной системы CRISPR / Cas в Francisella tularensis . Внутр. J. Med. Microbiol. 303, 51–60. DOI: 10.1016 / j.ijmm.2012.11.004

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Шен, В., Чжан, Дж., Гэн, Б., Цю, М., Ху, М., Ян, К. и др. (2019). Создание и применение системы редактирования генома с помощью CRISPR-Cas12a в Zymomonas mobilis . Microb.Cell Fact 18: 162. DOI: 10.1186 / s12934-019-1219-5

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Шмаков С., Абудайе О. О., Макарова К. С., Вольф Ю. И., Гутенберг Дж. С., Семенова Е. и др. (2015). Открытие и функциональная характеристика разнообразных систем CRISPR-Cas 2 класса. Мол. Cell 60, 385–397. DOI: 10.1016 / j.molcel.2015.10.008

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Шмаков С., Смаргон А., Скотт, Д., Кокс, Д., Пизоча, Н., Ян, В. и др. (2017). Разнообразие и эволюция систем CRISPR-Cas класса 2. Nat. Rev. Microbiol. 15, 169–182. DOI: 10.1038 / nrmicro.2016.184

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Скелдинг З., Куин-Бейкер Дж. И Крейг Н. Л. (2003). Альтернативные взаимодействия между транспозазой Tn7 и ДНК-связывающим белком-мишенью Tn7 регулируют иммунитет-мишень и транспозицию. Embo J. 22, 5904–5917.DOI: 10.1093 / emboj / cdg551

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Сорек Р., Лоуренс К. М. и Виденхефт Б. (2013). CRISPR-опосредованные адаптивные иммунные системы у бактерий и архей. Annu. Rev. Biochem. 82, 237–266. DOI: 10.1146 / annurev-biochem-072911-172315

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Standage-Beier, K., Zhang, Q., and Wang, X. (2015). Направленная крупномасштабная делеция бактериальных геномов с использованием CRISPR-никаз. ACS Synth. Биол. 4, 1217–1225. DOI: 10.1021 / acssynbio.5b00132

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Stellwagen, A. E., и Craig, N. L. (1997). Избегание себя: два белка, кодируемых Tn7, опосредуют целевой иммунитет при транспозиции Tn7. Embo J. 16, 6823–6834. DOI: 10.1093 / emboj / 16.22.6823

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Strecker, J., Jones, S., Koopal, B., Schmid-Burgk, J., Zetsche, B., Гао, Л. и др. (2019a). Разработка CRISPR-Cas12b для редактирования генома человека. Nat. Commun. 10: 212. DOI: 10.1038 / s41467-018-08224-4

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст

Strecker, J., Ladha, A., Gardner, Z., Schmid-Burgk, J. L., Makarova, K. S., Koonin, E. V., et al. (2019b). РНК-управляемая вставка ДНК с CRISPR-ассоциированными транспозазами. Наука 365, 48–53. DOI: 10.1126 / science.aax9181

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Вс, Б., Ян, Дж., Ян, С., Е, Р. Д., Чен, Д., и Цзян, Ю. (2018). Система редактирования генома с использованием CRISPR-Cpf1 негомологичного присоединения концов к геному Mycobacterium smegmatis . Biotechnol. J. 13: e1700588. DOI: 10.1002 / biot.201700588

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Sun, J., Wang, Q., Jiang, Y., Wen, Z., Yang, L., Wu, J., et al. (2018). Редактирование генома и репрессия транскрипции в Pseudomonas putida KT2440 через систему CRISPR типа II. Microb. Cell Fact 17:41. DOI: 10.1186 / s12934-018-0887-x

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Teng, F., Cui, T., Feng, G., Guo, L., Xu, K., Gao, Q., et al. (2018). Повторное использование CRISPR-Cas12b для инженерии генома млекопитающих. Cell Discov. 4:63. DOI: 10.1038 / s41421-018-0069-3

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст

Teng, F., Guo, L., Cui, T., Wang, X. G., Xu, K., Gao, Q., et al. (2019a). CDetection: обнаружение ДНК на основе CRISPR-Cas12b с субаттомолярной чувствительностью и специфичностью по одному основанию. Genome Biol. 20: 132. DOI: 10.1186 / s13059-019-1742-z

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Teng, F., Li, J., Cui, T., Xu, K., Guo, L., Gao, Q., et al. (2019b). Улучшенное редактирование генома млекопитающих с помощью новых ортологов Cas12a с оптимизированными каркасами crRNA. Genome Biol. 20:15. DOI: 10.1186 / s13059-019-1620-8

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Унгерер, Дж., И Пакраси, Х. Б. (2016). Cpf1 — это универсальный инструмент для редактирования генома CRISPR для различных видов цианобактерий. Sci. Реп. 6: 39681. DOI: 10.1038 / srep39681

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст

Ванегас, К. Г., Ярчинска, З. Д., Струко, Т., и Мортенсен, У. Х. (2019). Cpf1 обеспечивает быстрое и эффективное редактирование генома в Aspergilli. Fungal Biol. Biotechnol. 6: 6. DOI: 10.1186 / s40694-019-0069-6

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ву, Т. В., Сиванкаляни, В., Ким, Э. Дж., Доан, Д. Т. Х., Тран, М. Т., Ким, Дж., и другие. (2020). Высокоэффективная гомологически направленная репарация с использованием репликона CRISPR / Cpf1-геминивируса в томате. Plant Biotechnol. J . 18: 2133–2143. DOI: 10.1111 / pbi.13373

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ван, X., Дин, C., Yu, W., Wang, Y., He, S., Yang, B., et al. (2020a). Редакторы оснований Cas12a вызывают эффективное и специфическое редактирование с низким ответом на повреждение ДНК. Cell Rep. 31: 107723. DOI: 10.1016 / j.celrep.2020.107723

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ван, X., Чжун, М., Лю, Ю., Ма, П., Данг, Л., Мэн, К. и др. (2020b). Быстрое и чувствительное обнаружение COVID-19 с использованием обнаружения на основе CRISPR / Cas12a с считыванием невооруженным глазом, CRISPR / Cas12a-NE. Sci. Бык . 65, 1436–1439. DOI: 10.1016 / j.scib.2020.04.041

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ву Д., Гуань X., Чжу Ю., Рен К. и Хуан З. (2017). Структурная основа строгого распознавания PAM с помощью CRISPR-C2c1 в комплексе с sgRNA. Cell Res. 27, 705–708. DOI: 10.1038 / cr.2017.46

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Wu, F., Qiao, X., Zhao, Y., Zhang, Z., Gao, Y., Shi, L., et al. (2020). Направленный мутагенез в Arabidopsis thaliana с использованием CRISPR-Cas12b / C2c1. J. Integr. Plant Biol. 62, 1653–1658. DOI: 10.1111 / jipb.12944

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ву, Ю., Лю, Ю., Львов, X., Ли, Дж., Ду, Г., и Лю, Л. (2020).CAMERS-B: CRISPR / Cpf1 помогала редактировать и регулировать множественные гены системы для Bacillus subtilis . Biotechnol. Bioeng. 117, 1817–1825. DOI: 10.1002 / бит. 27322

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Xu, T., Li, Y., Shi, Z., Hemme, C.L., Li, Y., Zhu, Y., et al. (2015). Эффективное редактирование генома Clostridium cellulolyticum с помощью никазы CRISPR-Cas9. Заявл. Environ. Microbiol. 81, 4423–4431. DOI: 10.1128 / AEM.00873-15

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ян, В. X., Ханневелл, П., Альфонс, Л. Э., Карт, Дж. М., Кестон-Смит, Э., Сотисельвам, С., и др. (2019). Функционально разнообразные системы CRISPR-Cas типа V. Science 363, 88–91. DOI: 10.1126 / science.aav7271

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Янг, Х., Гао, П., Раджашанкар, К. Р., и Патель, Д. Дж. (2016). Распознавание и расщепление PAM-зависимой целевой ДНК эндонуклеазой C2c1 CRISPR-Cas. Cell 167, 1814–1828 e1812. DOI: 10.1016 / j.cell.2016.11.053

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Янг З., Эдвардс Х. и Сюй П. (2020). Точное, эффективное и мультиплексное редактирование генома с помощью CRISPR-Cas12a / Cpf1 в Yarrowia lipolytica . Metab. Англ. Commun. 10: e00112. DOI: 10.1016 / j.mec.2019.e00112

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Инь, X., Ананд, A., Quick, P., и Bandyopadhyay, A. (2019). Редактирование гена развития устьиц у риса с помощью CRISPR / Cpf1. Методы Мол Биол 1917: 257–268. DOI: 10.1007 / 978-1-4939-8991-1_19

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Йосеф И., Горен М. Г. и Кимрон У. (2012). Белки и элементы ДНК, необходимые для процесса адаптации CRISPR в Escherichia coli . Nucleic Acids Res. 40, 5569–5576. DOI: 10.1093 / nar / gks216

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Цетше, Б., Гутенберг, Дж. С., Абудайе, О. О., Слеймейкер, И. М., Макарова, К. С., Эсслецбихлер, П. и др. (2015). Cpf1 представляет собой одиночную РНК-управляемую эндонуклеазу системы CRISPR-Cas класса 2. Cell 163, 759–771. DOI: 10.1016 / j.cell.2015.09.038

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Zetsche, B., Heidenreich, M., Mohanraju, P., Fedorova, I., Kneppers, J., DeGennaro, E.M, et al. (2017). Мультиплексное редактирование генов с помощью CRISPR-Cpf1 с использованием единого массива crRNA. Nat. Biotechnol. 35, 31–34. DOI: 10.1038 / NBT.3737

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Zhang, J., Hong, W., Zong, W., Wang, P., and Wang, Y. (2018). Безмаркерное редактирование генома Clostridium beijerinckii с использованием системы CRISPR-Cpf1. J. Biotechnol. 284, 27–30. DOI: 10.1016 / j.jbiotec.2018.07.040

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Чжан, Дж., Ян, Ф., Ян, Ю., Цзян, Ю., и Хо, Ю.X. (2019). Оптимизация системы геномной инженерии на основе CRISPR-Cpf1 для Corynebacterium glutamicum . Microb. Cell Fact 18:60. DOI: 10.1186 / s12934-019-1109-x

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Zhang, J. L., Peng, Y. Z., Liu, D., Liu, H., Cao, Y. X., Li, B.Z., et al. (2018). Репрессия гена с помощью стратегии мультиплексной гРНК в Y. lipolytica . Microb. Cell Fact 17:62. DOI: 10.1186 / s12934-018-0909-8

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Чжан, X., Ван, Дж., Ченг, К., Чжэн, X., Чжао, Г., и Ван, Дж. (2017). Мультиплексная регуляция гена с помощью CRISPR-ddCpf1. Cell Discov. 3: 17018. DOI: 10.1038 / celldisc.2017.18

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст

Zou, Y.-l., Li, Z.-y., Zou, Y.-j., Hao, H.-y., Hu, J.-x., Li, N., et al. (2019). Получение свиней с мутацией бельгийского синего в MSTN с использованием гомологичной рекомбинации, опосредованной CRISPR / Cpf1, ssODN. J. Integr. Agric. 18, 1329–1336. DOI: 10.1016 / S2095-3119 (19) 62694-8

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Как узнать, кто мои гости ВК

Гости в ВК У каждого пользователя есть. Это могут быть друзья и друзья друзей, случайные люди, люди, которые видели вас в рекомендациях или даже нашли в поиске. Гостей на страницах, особенно на популярных страницах, становится много.

Статистика страницы

Управление контактами даже ввело новую функцию для владельцев тех страниц, у которых больше 100 подписчиков.Функция позволяет увидеть, сколько людей заходят на вашу страницу, а также подробную статистику: страны, города, активность, гаджеты, покрытие и т. Д.

Короче говоря, вы без проблем узнаете свою страницу. Просто нажмите на кнопку в левом столбце «Статистика страницы».

Еще раз: там не вся статистика, а если у вас популярная страница
(Более 100 друзей)!

Конечно, любопытство берет верх и нам становится интересно, кто эти безличные люди, которые приходят ко мне на страничку? Кто мои гости Вконтакте ?

Найти гостей ВКонтакте Довольно просто.Есть несколько способов. Некоторые из них работают, а некоторые сверх того, над чем я не работаю, тоже опасны для вашей страницы! Итак, приступим.

Как посмотреть гостей в ВК через приложение:

Существует множество приложений, позволяющих узнавать своих поклонников. Они показывают не только случайных посетителей, но и составляют топ, по которому можно увидеть, кто чаще всего посещает вашу страницу.

Из всех приложений лучше всего приложение «Мои гости и поклонники».

А кто такой Лайкал?

Здесь можно узнать, кто чаще всего заходил, Лайкал, а также увидеть гостей страниц другого человека, друга, парня и девушки, например.

Не советуем устанавливать ловушку для гостей Вконтакте т.к. нет смысла. Также в этом приложении можно купить платный доступ, но толку от него нет, т.к. весь функционал доступен в бесплатной версии.

Бесплатная гостевая программа в ВК:

Есть программа «вкгос»

Скачать программу бесплатно Вы можете на офф сайте, который называется так же, как и сама программа, но не думайте, что она ей понадобится, потому что в этом случае вам нужно будет указать свой логин и пароль, а это чревато консультацией.Хотя все функции он выполняет. Помните: никогда не указывайте свой токен!

Также фанатов можно найти через специальные сайты, которые отслеживают активность вашей страницы, но они отслеживают только тех людей, которым нравится ваша запись, а гости не всегда оставляют следы, поэтому эта опция исчезает.

Конечно жаль, что просмотр гостей в ВК Не встроен в функционал самого сайта. Это упростило бы задачу и уменьшило бы количество взломов страниц людей, которым нравится непроверенный софт.Хотя если бы можно было посмотреть на гостей, то посещаемость страницы была бы не такой высокой. Люди побоялись бы показать себя)).

Надеюсь, что этот стенд вам помог и вы смогли узнать, кто заходил в ВК на вашу страницу. Кратко резюмируя, можно отметить, что приложения лучше всего справляются со своей задачей. У них один минус: слишком навязчивая реклама и просьбы заплатить за полный функционал сайта. Вот и все. Вы можете посмотреть другие статьи сайта.

— Информационный бюллетень | VK Transformation

90% малых и средних предприятий и нишевых розничных брендов упускают — большое время

Помимо разработки продукта, успех продукта часто определяется тем, как он продается его целевой аудитории.За последние несколько лет VK Transformation (VKT) работала с многочисленными клиентами из малого и среднего бизнеса, у которых были слабые бизнес-показатели, несмотря на сильные уникальные торговые предложения, из-за отсутствия опыта продаж и маркетинга, а также из-за неспособности правильно использовать данные о клиентах.

С наступлением цифровой эпохи и ростом электронной коммерции с Covid-19, использование науки о данных и, в частности, искусственного интеллекта (ИИ), в качестве инструмента в маркетинге, стало обязательным для дифференциации от растущего числа людей. соревнование.Это особенно актуально для компаний, которые успешно создали и расширили свое присутствие, но достигли потолка роста, и им трудно развивать свой бизнес с огромным количеством данных о клиентах, которые остаются неиспользованными. Согласно отчету Adobe, только 12% небольших организаций используют ИИ для маркетинга.

Технологии обработки и анализа данных, искусственного интеллекта и машинного обучения и то, как они могут помочь предприятиям

Пока мы работаем с МСП на разных этапах их жизненного цикла (как показано на этой диаграмме), важно понимать, что Использование науки о данных, искусственного интеллекта и машинного обучения может помочь предприятиям повысить эффективность продаж.

Ускорение цифрового роста с помощью анализа данных и искусственного интеллекта

Создание цифрового присутствия бренда

Business Challenge

Компании сталкиваются с проблемами, связанными с расширением своего цифрового присутствия и узнаваемости бренда, чтобы не отставать от меняющегося пути и поведения клиентов.

Повышение качества цифровых результатов

Business Challenge

Из-за конкурентной среды многие компании сталкиваются с трудностями при превращении посетителей веб-сайтов в квалифицированных потенциальных клиентов, клиентов и защитников бренда с помощью рекламных и органических кампаний.

Business Challenge

Интенсивная конкуренция и плохой таргетинг привели к тому, что многие компании не смогли повысить рентабельность инвестиций в рекламу (ROAS) и стоимость привлечения клиента (CPA).

В соответствии с тем, что сотрудничество является одной из наших основных ценностей, VKT выбрала партнерство с Alavi.ai, чтобы дополнить наши решения для цифрового брендинга, продаж и маркетинга для клиентов, благодаря своему обширному опыту в этой области и доступным ценам, которые связаны с решительно с нашей страстью в помощи МСП.

Что могут сделать специалисты по цифровому маркетингу, чтобы улучшить результаты всего за 30 дней?

Когда предприятия электронной коммерции достигают порога роста, мы сотрудничаем с Alavi.ai, приложением для маркетинговой аналитики на базе искусственного интеллекта, которое использует точный таргетинг, чтобы помочь малым и средним предприятиям увеличить свои доходы в Интернете. Он разработан, чтобы быть всеобъемлющим, простым в использовании и доступным по цене.

Используя науку о данных, искусственный интеллект и машинное обучение, Alavi.ai извлекает и анализирует данные из веб-аналитики, рекламных платформ и CRM онлайн-бренда, чтобы повысить эффективность на всех этапах воронки маркетинга и продаж.

Основные нововведения Alavi.ai включают:

Возможность значительного увеличения рентабельности затрат на рекламу (RoAS) онлайн-бренда менее чем за 30 дней

Помогает брендам привлекать новых клиентов, конвертировать посетителей, которые не покупали, и увеличивать количество повторных покупок существующих клиентов

Использует науку о данных, искусственный интеллект, машинное обучение и автоматизацию для предоставления экспертных рабочих процессов, которые цифровые маркетологи всех уровней могут использовать для достижения отличного роста доходов

Помогите специалистам по цифровому маркетингу на всех уровнях сэкономить значительное количество времени на запуск и управление кампаниями

Далеко Преобразование East Flora с Alavi x VKT

В связи с усилением конкуренции и более широким таргетингом, в попытке расширить свою клиентскую базу, команда FarEastFlora.com не получал ожидаемой рентабельности инвестиций в маркетинг, что привело к их решению привлечь VKT.

Мы сотрудничали с Alavi, который использовал свой механизм искусственного интеллекта для определения продуктов для рынка и целевой аудитории, которые компания затем использовала для увеличения доходов, не жертвуя своей чистой прибылью. Всего за 3 недели FEF Singapore удалось ускорить рост рентабельности: RoAS увеличился на 21,75%, а AOV вырос на 20,33%. Сегодня команда FEF продолжает расширять партнерские отношения с VKT и Alavi.

Хотите узнать больше о том, как наука о данных и искусственный интеллект могут максимизировать отдачу от цифрового маркетинга для вашего бизнеса электронной коммерции?

1. У вашего онлайн-бизнеса 10 тыс. Посетителей в месяц и 1 тыс. Онлайн-транзакций? Ускорьте свой рост с помощью автоматизированного искусственного интеллекта и анализа данных Alavi. Узнайте больше о приложении и попробуйте его бесплатно здесь

2. Еще нет? Позвольте нам помочь! Подпишитесь на бесплатную консультацию у нас о том, как создавать и развивать свою электронную коммерцию

с нашими подходами, основанными на данных, производительностью и клиентоориентированностью

ВЗАИМОДЕЙСТВУЙТЕ С НАМИ СЕГОДНЯ!

ДЛЯ ПОДРОБНОЙ ИНФОРМАЦИИ СВЯЖИТЕСЬ С НАШЕЙ КОМАНДОЙ

Чтобы помочь предприятиям ускорить восстановление своего бизнеса с максимальной поддержкой, грант на развитие предприятия доступен для программы VKT GO Digital.Для местных компаний SG доступная финансовая поддержка составляет:

* только до конца сентября 2021 г.

Если вам интересно узнать, как EDG может помочь в достижении бизнес-целей, свяжитесь с нами сегодня!

Вивьен Ко

Основатель и управляющий директор

Практикующий консультант по вопросам управления

Шерил Чиа

Аналитик по эффективному маркетингу

Сэмми Чан

Консультант по цифровому маркетингу

Кельда Лим

Консультант по цифровому маркетингу

Иван РБК

• Поделки на 23 февраля (71 фото) — пошаговые мастер-классы по изготовлению поделки ко Дню защитника Отечества
• Осетрина, запеченная в духовке: секреты приготовления, рецепт с чесноком, овощами, лимонным соком, в фольге, королевский осетр
• Синганские голоса и их классификации
• Что такое антитезис — узнайте, что такое
• Лазерный или струйный принтер: что лучше, что выбрать, в чем разница
• Новогодний олень из проволоки своими руками
• Фенулс — инструкция по применению, описание, вопросы по лекарству
• Говяжий бульон — пошаговый рецепт с фото на поваре.ru
• Что делать, если вы пропадаете на ноуте?
• Какой телевизор лучше Samsung или LG в 2020
• Как отбеливать зубы в домашних условиях: народные средства отбеливания, с использованием продуктов, обзор готовых фармацевтических препаратов, методы отбеливания в стоматологии
• Заключение курсовой работы: как правильно писать, образец
• Стерлядь целиком в духовке рецепт
• Бесбармак Классический — пошаговый рецепт с фото на cook.ru
• Где кататься: Топ-7 живописных роллеров мира
• 10 советов, которые помогут похудеть после родов
• Как красиво сложены салфетки на столе и под техникой: 16 вариантов
• Кекс в мультиварке — 20 рецептов с фото пошагово.Как сделать капкейк в мультиварке просто и вкусно?
• 25 разных способов красиво и модно повязать шарф на голове летом мусульманин с пальто? Стильные прически с косынкой на голову
• Основные причины появления грибка ногтей, симптомы и факторы риска
• Как сделать маску из бумаги — 90 фото и видео как сделать маску своими руками
• Как сделать треугольники для модульного оригами
• Полезное руководство
• Продукты, снижающие уровень холестерина в крови и очищающие сосуды
• Компливит — инструкция по применению, описание, вопросы по препарату
• Грифер? кто это!
• Где раки? — «Как и почему»
• Как поставить накидку на имя парня или девушки — лучшие способы
• Bonjour, что это за программа и что это за
• Домашний рулет из свинины руль — 6 рецептов из отварных ручек, в духовке
• Какие предметы нужно сдать менеджеру: экзамен, экзамены, кому подходит, где учится, недостатки и преимущества профессии
• Картофель фри в домашних условиях — 7 рецептов хрустящей корочки
• Понимание примеров
• Что такое WPS на роутере: инструкция по эксплуатации
• 3 способа как соединить две фотографии в одну
• Как нерестить красную рыбу в домашних условиях, сухой и влажный посол
• «Как мужчина кормил двух генералов» краткое содержание повести Салтыкова-Щедрина — читать пересказ онлайн
• Три ананасовых трюка, которые облегчают жизнь каждому
• Мощная защита от сглаза, порчи: 20 народных способов и средств, советы — Советы народной мудрости — Медиа-платформа Миртесен
• Какой сегодня праздник: 11 декабря 2020 — Рамблер / Новости
• Виагра женская Особенности препарата и какое действие он оказывает на женщину
• ✔️ Почему бы не объединить антибиотики и алкоголь? — Алклаздрав — Центр лечения алкоголизма
• Мастер-класс по шагам с фото
• Как есть шпинат
• Онемение пальцев ног: симптомы, причины, лечение
• Как изменить текстовый текст в Word 2007, 2010, 2013 и 2016
• Как изменить язык интерфейса Windows 10 без переустановки системы?
• Календарный год: понятие календарного года в контракте, как рассчитать какой период
• Сосновая шишка из бумаги с веточкой: пошаговый обзор
• Как удалить Amigo и все его компоненты — правильные способы удаления
• Мастер-класс «Коробка для мелочей без клея в технике оригами.Воспитатели детских садов, школьные учителя и учителя — maam.ru

Цифровой сертификат ЕС на COVID уже доступен, но что это такое и какие страны его принимают?

Цифровой сертификат ЕС на COVID официально вступает в силу с сегодняшнего дня, 1 июля.

К вечеру среды 21 страна ЕС из 27 были подключены к сети системы, а еще 6 были технически готовы. Некоторые страны уже начали использовать новый сертификат здоровья в июне.

По данным Европейской комиссии, теперь все государства-члены должны иметь возможность выдавать и принимать пропуск, за исключением Ирландии, которая была задержана из-за кибератак.

В настоящее время действует период постепенного внедрения, с льготным периодом до 12 августа для стран, которые не готовы к 1 июля. В течение этого периода другие государства должны принимать национальные документы при условии, что они содержат данные, требуемые на европейском уровне.

Но запуск происходит под облаком варианта Delta , который уже побуждает страны ЕС ограничивать поездки из стран, где он распространен, таких как Великобритания, Португалия и Индия.

Авиакомпания также предупредила , что страны ЕС не координируют свои подходы к сертификации вакцин, что может вызвать длительные задержки в аэропортах в разгар летнего сезона.

Что такое EUDCC и как он работает?

EUDCC , ранее называвшийся «Цифровым зеленым сертификатом», призван позволить европейцам легко перемещаться между 27 странами-членами. Он также будет доступен в некоторых странах, не входящих в ЕС.

Он состоит из информации о вакцинационном статусе человека, результатах анализов или статусе выздоровления от COVID-19.

В виде QR-кода путешественник может иметь при себе цифровой или бумажный сертификат.

Цифровой сертификат COVID ЕС (EUDCC) , как он официально известен, является бесплатным и должен быть признан всеми 27 странами ЕС, а также Швейцарией, Лихтенштейном, Исландией и Норвегией.

ЕС ведет переговоры с несколькими другими странами, такими как Великобритания и США, о взаимном признании и применении документов, связанных с COVID.

Пропуск применяется в трех ситуациях: он удостоверяет, был ли человек вакцинирован против COVID-19, имел ли он недавний отрицательный результат теста или считается ли он иммунным и ранее заразился этим заболеванием.Потребуется подтверждение положительного результата теста ПЦР.

Страны обязаны принимать вакцины, одобренные Европейским агентством по лекарственным средствам (EMA): Pfizer / BioNTech, Moderna, AstraZeneca и Johnson & Johnson.

Они также могут, хотя это не обязательно, также допускать людей, вакцинированных вакцинами, разрешенными в некоторых странах ЕС, такими как российский Sputnik V в Венгрии, или продуктами, одобренными Всемирной организацией здравоохранения (ВОЗ), такими как китайский Sinopharm.

Сертификат устраняет необходимость в дополнительном тестировании или карантине по прибытии в другую страну.Однако государство-член по-прежнему может вводить ограничения, если санитарная ситуация в стране или регионе, из которого прибыл путешественник, ухудшается.

В этом случае страна назначения должна попытаться проинформировать Комиссию и другие страны ЕС за 48 часов до вступления ограничений в силу.

Обеспокоенность авиационной отрасли

Европейская отрасль авиаперевозок предупредила ранее на этой неделе , что планы ЕС по цифровому сертификату COVID все еще «фрагментированы».

Группы, представляющие крупнейшие авиакомпании и аэропорты континента, выразили новую обеспокоенность по поводу того, что у путешественников будут длинные очереди, если страны не будут лучше координировать распространение сертификата.

Предупреждение лидерам ЕС подписали группа аэропортов ACI Europe, а также представительства авиакомпаний A4E, IATA и ERA.

«Проверка сертификатов помешает беспрепятственному летнему путешествию пассажиров из ЕС», — говорится в совместном заявлении .«Поскольку в ближайшие недели пассажиропоток возрастет, в европейских аэропортах возникнет реальный риск».

«Повторные проверки и отсутствие инструментов проверки, предоставленных авиакомпаниям, приведут к ненужным очередям в аэропортах и ​​увеличению времени обработки, если государства-члены не обратятся к ним».